[发明专利]检测样品中的甲基化DNA的方法有效
申请号: | 201210055737.4 | 申请日: | 2012-02-28 |
公开(公告)号: | CN102653787A | 公开(公告)日: | 2012-09-05 |
发明(设计)人: | 酒井绫子;梶田昌裕 | 申请(专利权)人: | 希森美康株式会社 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 罗菊华 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 样品 中的 甲基化 dna 方法 | ||
1.检测样品中的甲基化DNA的方法,其包括:
使有含甲基化DNA的可能性的样品和可与甲基化DNA结合的蛋白质接触,从而使上述样品中的甲基化DNA和上述蛋白质结合;
使通过上述结合步骤得到的样品和至少1种脱氧核糖核酸酶接触,而将上述样品中的DNA分解;及
在通过上述分解步骤得到的样品中,通过与上述蛋白质的结合来检测不被上述脱氧核糖核酸酶分解的甲基化DNA;其中
上述脱氧核糖核酸酶的至少1种是与可分解单链DNA的甲基化感受性限制酶不同的脱氧核糖核酸酶。
2.权利要求1所述的方法,其中
上述可与甲基化DNA结合的蛋白质是抗甲基化DNA抗体或甲基化DNA结合蛋白质。
3.权利要求1所述的方法,其中
上述可与甲基化DNA结合的蛋白质是抗甲基化DNA抗体。
4.权利要求1所述的方法,其中
上述可与甲基化DNA结合的蛋白质是选自下列的至少1种甲基化DNA结合蛋白质:MBD1、MBD2、MBD4及MeCP2。
5.权利要求1~4之任一项所述的方法,其中
上述样品是由培养细胞株或从活体采集的血液、体液、组织或细胞制备的样品。
6.权利要求1~4之任一项所述的方法,其中
上述脱氧核糖核酸酶是选自下列的至少1种:脱氧核糖核酸酶I、外切核酸酶I、λ-外切核酸酶、T7外切核酸酶、外切核酸酶III、RecJ型外切核酸酶、外切核酸酶T、BAL31核酸酶、绿豆核酸酶、微球菌-核酸酶及T7内切核酸酶。
7.权利要求1~4之任一项所述的方法,其中
上述样品是有含单链甲基化DNA的可能性的样品,
在检测上述甲基化DNA的步骤中,检测单链甲基化DNA。
8.权利要求1~4之任一项所述的方法,其中
在检测上述甲基化DNA的步骤中,使用核酸扩增法、碱基测序法或微阵列法来检测甲基化DNA。
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