[发明专利]一种邻苯二甲酸二乙酯荧光偏振免疫检测试剂盒

权利要求书

1.一种邻苯二甲酸二乙酯荧光偏振免疫检测试剂盒，其特征在于：包括荧光标记物储备液、DEP标准溶液、DEP多克隆抗体血清和浓缩磷酸盐(PBS)缓冲溶液并分别封装于试剂管中，荧光标记物储备液为将异硫氰酸荧光素(FITC)标记DEP的荧光偶联物溶于200μL甲醇所得的溶液并封装于一个容积为1.5mL的试剂管中；DEP标准溶液按DEP在甲醇溶剂的不同浓度设置并分别封装于七个容积为1.5mL的试剂管中，溶剂为甲醇，每管1mL；DEP多克隆抗体血清为600μL并封装于一个容积为1.5mL的试剂管中；浓缩PBS缓冲溶液封装于两个容积为10mL的试剂管中，每个试剂管内装液9mL。

2.根据权利要求1所述邻苯二甲酸二乙酯荧光偏振免疫检测试剂盒，其特征在于：所述荧光标记物储备液的配制方法是，将1mg 4-氨基-邻苯二甲酸二乙酯与1mg FITC在500μL质量百分比含量为25％的三乙胺的甲醇中，在4℃温度下反应8-10小时，取上述混合溶液50μL，在薄层层析硅胶片底部画一条带，将此薄层层析硅胶片放入氯仿与甲醇的体积比为4∶1的展开剂中层析，然后刮下薄层层析硅胶片上Rf为0.5的带，溶于200mL甲醇并过滤，取滤液作为荧光标记物储备液。

3.根据权利要求1所述邻苯二甲酸二乙酯荧光偏振免疫检测试剂盒，其特征在于：所述DEP标准溶液设置的浓度为0ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、75ng/mL、100ng/mL和200ng/mL，甲醇为溶剂，每管1mL；配制方法为是将0.2mg DEP标准品溶解在1mL甲醇中配制成200ng/mL的标准溶液，然后用甲醇将200ng/mL的标准溶液梯度稀释为100ng/mL、75ng/mL、50ng/mL、20ng/mL及10ng/mL的标准溶液，取1mL甲醇作为0ng/mL的空白对照标准溶液。

4.根据权利要求1所述邻苯二甲酸二乙酯荧光偏振免疫检测试剂盒，其特征在于：所述DEP多克隆抗体血清的配制方法是，将DEP半抗原改造物4-氨基-邻苯二甲酸二乙酯的氨基与牛血清蛋白偶联制得DEP免疫抗原，将免疫抗原纯化冻干后，分5次注射入新西兰大白兔体内，心脏采血离心后，得到多克隆抗体血清，分装后于-20℃温度下保存。

5.根据权利要求1所述邻苯二甲酸二乙酯荧光偏振免疫检测试剂盒，其特征在于：所述浓缩磷酸盐(PBS)缓冲溶液中各组分浓度为27mmol/L KCl、1380mmol/L NaCl、70mmol/L Na₂HPO₄和15mmol/L KH₂PO₄。