[发明专利]一种利用毛细管培养法检测或筛选微生物的方法

权利要求书

1.一种利用毛细管培养法检测或筛选微生物的方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)填装毛细管：以毛细管为容器，装载培养基；

所述培养基为半固体培养基或液体培养基或固体培养基；

所述培养基中含有供目标微生物生长的营养物质；

所述培养基中含有或不含有选择性杂菌抑制剂或/和目标微生物显色剂；

(2)微生物检测：将上述填装后的毛细管的一端接入待检样本或待检样本的稀释液或增菌液中，或：将待检样本接入毛细管的一端，培养0＜t≤96h后，进行以下操作之一：

①当培养基中含有选择性杂菌抑制剂时，直接观察毛细管的另一端，根据透明度对比判断是否有菌生长，若有菌生长，则证明待检样本中含有目标微生物，若无，反之；

②当培养基中含有选择性杂菌抑制剂时，直接观察毛细管的另一端，根据透明度对比判断是否有菌生长，若有菌生长，则证明待检样本中含有目标微生物，将菌接种至目标微生物的常规选择培养基上进行进一步的分离纯化或培养，若无，反之；

③当培养基中含有目标微生物显色剂时，直接观察毛细管的另一端，判断是否有特异显色反应，若有特异显色反应，则证明待检样本中含有目标微生物，若无，反之；

④当培养基中不含有目标微生物显色剂，含有或不含有选择性杂菌抑制剂时，观察毛细管另一端是否有菌生长，若有菌生长，则将毛细管的另一端接入含有目标微生物显色剂的半固体培养基或液体培养基或固体培养基中，培养后，观察是否有特异显色反应，若有特异显色反应，则证明待检样本中含有目标微生物，若无，反之；若无菌生长，则证明待检样本中不含有目标微生物；

⑤当培养基中不含有目标微生物显色剂，含有或不含有选择性杂菌抑制剂时，观察毛细管另一端是否有菌生长，若有菌生长，，则将菌接种至目标微生物的常规选择培养基上进行纯化或培养；

⑥当培养基中含有或不含有选择性杂菌抑制剂或/和目标微生物显色剂时，将另一端接入一组液体或半固体生化鉴定培养基，对目标微生物进行鉴定，或者多根毛细管另一端分别接入一种液体或半固体生化鉴定培养基形成一组生化鉴定实验。

2.根据权利要求1所述的一种利用毛细管培养法检测或筛选微生物的方法，其特征在于：所述毛细管的材质为玻璃、塑料、合成树脂或硅胶中的一种。

3.根据权利要求1所述的一种利用毛细管培养法检测或筛选微生物的方法，其特征在于：所述毛细管为管径小于0.5cm、管长大于1cm的直管或弯管。

4.根据权利要求1所述的一种利用毛细管培养法检测或筛选微生物的方法，其特征在于：所述供目标微生物生长的营养物质选自能支持或促进微生物生长的碳源、氮源、生长因子和无机盐中的一种或任几种。

5.根据权利要求1所述的一种利用毛细管培养法检测或筛选微生物的方法，其特征在于：所述目标微生物显色剂为目标微生物的特异生化酸碱指示剂、生化鉴定试剂或/和酶底物显色剂。

6.根据权利要求1所述的一种利用毛细管培养法检测或筛选微生物的方法，其特征在于：所述选择性杂菌抑制剂选自胆盐、脱氧胆酸钠、碘、碘化钾、煌绿、孔雀绿、亚硒酸盐、胱氨酸、质量浓度在1％以上的氯化钠溶液、吖啶黄、萘啶酮酸、月桂基硫酸盐、氯化锂、结晶紫、中性红、伊红、美兰、万古霉素、新生霉素、两性霉素、头孢菌素、头孢哌酮、多粘菌素、磺胺嘧啶、利福平、染料和抗生素中的一种或任几种。

7.根据权利要求1所述的一种利用毛细管培养法检测或筛选微生物的方法，其特征在于：所述培养基为选择性半固体培养基，由选择性杂菌抑制剂、营养物质、0.1％～1.0％琼脂和水组成的半固体培养基。

8.根据权利要求1所述的一种利用毛细管培养法检测或筛选微生物的方法，其特征在于：所述培养基为半固体显色培养基，为由目标微生物显色剂、营养物质、0.1％～1.0％琼脂和水组成的半固体培养基。

9.根据权利要求1所述的一种利用毛细管培养法检测或筛选微生物的方法，其特征在于：所述半固体生化鉴定培养基，为由目标微生物生化反应底物、生化反应指示剂、营养物质、0.1％～1.0％琼脂和水组成的半固体培养基，或由酶底物试剂、营养物质、0.1％～1.0％琼脂和水组成的半固体培养基。

10.根据权利要求1所述的一种利用毛细管培养法检测或筛选微生物的方法，其特征在于：所述培养时间为12＜t≤96h。