[发明专利]用于检测自身抗体的组合物和方法

权利要求书

1.一种用于检测测试样品中的甲状腺激素封闭免疫球蛋白（TBI）的方法，其包括：

a）提供

i）由包含下述的一种或多种表达载体稳定转染的转基因细胞：

1）与cAMP诱导型启动子可操作地连接的报道基因，和

2）与组成型启动子可操作地连接的嵌合TSH受体（TSHR）基因，

其中所述细胞在细胞膜上表达嵌合TSHR，

ii）促甲状腺激素（TSH），

iii）对照样品，和

iv）测试样品，

b）使所述转基因细胞和所述TSH与下述接触：

i）所述对照样品，以产生第一种样品，和

ii）所述测试样品，以产生第二种样品，

其中所述接触在用于所述TSH与所述嵌合TSHR结合的条件下，和

c）测量所述第一种样品中和所述第二种样品中的所述报道基因的表达水平，其中与所述第一种样品相比较，在所述第二种样品中的所述报道基因的表达水平减少指示所述测试样品中TBI的存在。

2.权利要求1的方法，其中所述检测TBI的方法具有是在下述方法中检测TBI时的TBI IC₅₀的5倍到15倍小的TBI IC₅₀，所述方法包括用表达野生型TSHR的细胞代替表达所述嵌合TSHR的所述转基因细胞。

3.权利要求1的方法，其中所述检测TBI的方法具有是在下述方法中检测TBI时的TBI IC₅₀的10倍到30倍小的TBI IC₅₀，所述方法包括用抗TBI单克隆抗体检测TBI的特异性结合。

4.权利要求1的方法，其中所述方法进一步包括检测与所述第一种样品相比较，在所述第二种样品中的所述报道基因的表达水平减少。

5.权利要求1的方法，其中所述方法进一步包括通过比较下述而测定所述测试样品中的TBI水平：

a）在与所述测试样品的所述接触后的所述报道基因的表达水平，与

b）在使所述转基因细胞与一种或多种标准样品接触后的所述报道基因的表达水平，所述标准样品各自含有已知浓度的TSH。

6.权利要求1的方法，其中所述方法是TBI特异性的。

7.权利要求1的方法，其中所述TSH具有小于100mIU/ml的浓度。

8.权利要求1的方法，其中所述报道基因的所述表达包含生物发光蛋白质的表达。

9.权利要求8的方法，其中所述生物发光蛋白质包含海肾萤光素酶氨基酸序列SEQ ID NO:03。

10.权利要求1的方法，其中所述转基因细胞包含选自CHO-MC4细胞和RD-MC4细胞的细胞。

11.权利要求1的方法，其中将所述TSH替换为甲状腺刺激单克隆抗体。

12.权利要求1的方法，其中将所述TSH替换为甲状腺刺激多克隆抗体。

13.一种用于检测测试样品中的甲状腺激素封闭免疫球蛋白（TBI）和甲状腺激素刺激免疫球蛋白（TSI）的方法，其包括：

a）提供

i）由包含下述的一种或多种表达载体稳定转染的转基因细胞：

1）与cAMP诱导型启动子可操作地连接的报道基因，和

2）与组成型启动子可操作地连接的嵌合TSH受体（TSHR）基因，

其中所述细胞在细胞膜上表达嵌合TSHR，

ii）促甲状腺激素（TSH），

iii）对照样品，和

iv）测试样品，

b）使所述转基因细胞和所述TSH与下述接触：

i）所述对照样品，以产生第一种样品，和

ii）所述测试样品，以产生第二种样品，

其中所述接触在用于所述TSH与所述嵌合TSHR结合的条件下，和

c）测量在所述接触前和在所述接触后，在所述转基因细胞中的所述报道基因的表达水平，其中

i）与所述第一种样品相比较，在所述第二种样品中的所述报

道基因的表达水平减少指示所述测试样品中TBI的存在，和

ii）与所述第一种样品相比较，在所述第二种样品中的所述报

道基因的表达水平增加指示所述测试样品中TSI的存在。