[发明专利]解淀粉芽孢杆菌及其在防治花生果腐病中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物防治领域，特别涉及解淀粉芽孢杆菌菌株及其在防治花生果腐病中的应用。

背景技术

花生果腐病为一种花生生长中后期发生的土传病害，是由侵脉新赤壳菌（Neocosmospora sp.）侵染花生果而引起花生果腐烂的一种病害，该病害发病特征如下：（1）发生病变的荚果主要是中后期的秕果和饱果；（2）初步发生时，花生荚果的中果皮和外果皮变为黑褐色斑点，内果皮及种子正常；（3）发病严重时，荚果的整个果皮和种子变黑、腐烂；（4）根部外表皮发黑，而地上部分不变或者更绿。2006-2011年，该病害在我国河北、山东、吉林、河南等花生种植区先后被发现，烂果率在30-100%，这严重损害了当地花生种植户的利益。目前市场上还没有有效的防治该病害药物。因此，提供一种能够有效防治花生果腐病的药物具有重要现实意义。

针对花生果腐病这种土传病害，传统的化学农药由于受到持效期短等方面的限制，防治效果有限。而利用芽孢杆菌进行生物防治在持续控制土传病害上表现出很好的应用潜力。其优势主要表现在以下方面：（1）芽孢杆菌制剂在休眠期产生芽孢，芽孢具有耐受高温和具有良好的贮存性能；（2）由于芽孢杆菌易于发酵，且会将抑真菌蛋白分泌到胞外，抑真菌蛋白又具有性质稳定，水溶性等优点，便于应用；（3）芽孢杆菌易于繁殖，适应环境能力强，具有很大的开发利用价值。但是，目前市场上的芽孢杆菌制剂对花生果腐病的长期防治效果不佳。因此，急需一种能够实现持续控制花生果腐病，降低花生果农药残留，实现防病、保果、增产作用的芽孢杆菌。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一株解淀粉芽孢杆菌菌株及其在防治花生果腐病中的应用。该解淀粉芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC No.5436。该解淀粉芽孢杆菌菌株能够持续控制花生果腐病，降低花生果农药残留，实现防病、保果、增产。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一株解淀粉芽孢杆菌，其保藏编号为CGMCC No.5436。

该菌株16S rRNA 在GenBank 序列登记号为JN851189。

本发明的解淀粉芽孢杆菌，革兰氏阳性；菌体杆状、形成芽孢，芽孢卵圆形，孢囊膨大；接触酶（-）；葡萄糖氧化发酵（发酵型）；硝酸盐还原实验（+）；亚硝酸盐利用（+）；甲基红试验（-）；V-P 测定（+）；柠檬酸盐利用（+）；明胶液化反应（+）；淀粉水解（+）；葡萄糖氧化发酵（发酵型）；牛奶分解实验（产酸）；脲酶试验（-）；纤维素分解实验（+）； 利用抗生素合成基因的通用引物进行基因探测，发现该菌含有至少4种抗生素合成基因（包括表面活性素、丰原素、伊枯草菌素三大类抗生素），平皿对峙实验表明该菌对花生果腐病菌、马铃薯早疫病菌，白菜黑斑病菌，棉花黄萎病菌，苹果腐烂病菌，苹果轮纹病菌和苹果斑点落叶病菌具有明显的抑制作用。

本发明还提供了保藏编号为CGMCC No.5436的解淀粉芽孢杆菌在制备抑制植物病原菌药物中的应用；所述植物病原菌包括花生果腐病菌、马铃薯早疫病菌，白菜黑斑病菌，棉花黄萎病菌，苹果腐烂病菌，苹果轮纹病菌和苹果斑点落叶病菌。

本发明还提供了一种菌肥，其包括保藏编号为CGMCC No.5436的解淀粉芽孢杆菌及肥料中可接受的佐剂。

作为优选，所述解淀粉芽孢杆菌的含量≥10¹² CFU/g。

本发明还提供了上述菌肥的固态摇瓶发酵工艺，包括如下步骤：

步骤1：挑取保藏编号为CGMCC No.5436的解淀粉芽孢杆菌置于马铃薯葡萄糖液体培养基中，于30～37℃、200～220 rpm培养12～16h，得第一培养物；

步骤2：将所述第一培养物按1～10 %的接菌量转接于马铃薯葡萄糖液体培养基中，于30～37℃、200～220 rpm培养22～26h，得第二培养物；

步骤3：将第二培养物作为固态摇瓶发酵的种子液，按8～12%的接菌量转接至固态摇瓶发酵培养基中，摇匀后于30～37℃培养120～160 h后即得。所述固态摇瓶发酵培养基包括：麦麸26～30 重量份，棉籽皮7～9 重量份；花生饼粉2.5～4.0重量份，水40～45 重量份。

作为优选，上述菌肥的施用量为15～30kg/公顷。