[发明专利]一种对丙型肝炎病毒进行基因分型的试剂盒有效
申请号: | 201110248312.0 | 申请日: | 2011-08-26 |
公开(公告)号: | CN102286644A | 公开(公告)日: | 2011-12-21 |
发明(设计)人: | 李艳;童永清;顾剑;郑红云 | 申请(专利权)人: | 李艳;童永清;顾剑;郑红云 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 张火春 |
地址: | 430060 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 肝炎 病毒 进行 基因 试剂盒 | ||
1.一种对丙型肝炎病毒进行基因分型的试剂盒,其特征在于,包括HCV NS5B基因扩增引物、HCV NCR保守区域基因扩增引物、HCV RNA提取试剂、阴性对照和阳性对照、cDNA合成试剂、PCR反应液和PCR测序试剂,其中,HCV NS5B基因上游引物序列为SEQ ID No.1所示,HCV NS5B基因下游引物序列为SEQ ID No.2所示,HCV NCR保守区域基因上游引物序列为SEQ ID No.3所示,HCV NCR保守区域基因上游引物序列为SEQ ID No.4所示。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,其中HCV RNA提取试剂为:TRIzol,氯仿、异丙醇、无水乙醇和无RNase去离子水。
3.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,其中的阴性对照和阳性对照,以去离子水为阴性对照,以已知型别的含有HCV样品为阳性对照。
4.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,其中的cDNA合成反应液包括:200 U/μL 逆转录酶、40 U/μL RNase抑制剂、50 μM Oligo(dT)15、50 μM 随机引物、5×第一链合成缓冲液、 无RNase的去离子水、10 mM dNTPs。
5.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,其中的PCR反应液包括:10×PCR 混合液、0.25 pmol/μL的引物、2.5~4.0 mM的MgCl2、2U的Taq酶、0.2~0.4 mM的dNTPs、0.3~0.6 mM dUTP。
6.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,其中PCR测序试剂由4 μL测序缓冲液,1 μL DNA模板,1 μL测序引物组成。
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