[发明专利]甲鱼低聚肽的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及甲鱼的深加工技术领域，具体涉及一种以甲鱼为原料，利用生物复合酶酶解制备甲鱼低聚肽的方法。

背景技术

甲鱼又名鳖、团鱼，有补血、强骨、抗疲劳、延年益寿之功效，是我国传统食品，也是开发高级保健食品的良好原料；甲鱼的主要营养成分为蛋白质、脂肪、铁、钙、动物胶、角质白及多种维生素等。甲鱼含有很高的蛋白质，大约每公斤有165克蛋白质，而食物或药物中的蛋白质一般要被消化液酶解为低聚肽或氨基酸而被机体吸收和利用，因此吸收慢，利用率低，所以也达不到应有的药效。

利用现代生物酶解技术，超滤和薄膜浓缩，喷雾干燥技术处理得到的小分子甲鱼低聚肽，可以克服上述问题，使甲鱼低聚肽口服能够更完全和直接被消化道吸收，目前，提取甲鱼低聚肽的方法主要有碱液提取法和生物酶解法，前者在提取过程中加入大量的碱处理，既破坏了蛋白质的成分，造成成品苦咸等不良口感，而且对环境造成污染；申请号201010103157.9专利文献中公开了甲鱼小分子多肽的制备方法：用胰酶在55-60°C酶解1-4h，在90-95°C保温10h,降温至60°C，加入复合蛋白酶酶解1-4h，再经过去油脂，活性炭脱色，真空浓缩，醇沉，高温灭菌，喷雾干燥得到成品。该方法胰蛋白酶但是成本高，操作流程太长，步骤繁琐，不适合工业化生产。   

发明内容

针对现有技术的酶解液存在腥味，咸味和分子量大，分子量分布不集中，成本高的缺陷，本发明的目的在于提供了一种甲鱼低聚肽的提取方法，以甲鱼为原料用碱性蛋白酶和风味蛋白酶酶解，膜截留分子量为0.5-30万道尔顿的超滤膜进行超滤和薄膜浓缩精制技术和喷雾干燥得到甲鱼低聚肽肽；本方法操作简便，口感好，成本低，环保高效，适合工业化大生产。

为了实现上述技术目的，本发明采取以下技术措施：

一种甲鱼低聚肽的制备方法，其步骤如下：

1.  按原料甲鱼的重量的0.2-5%的比率加入碱性蛋白酶，40-70℃恒温搅拌，酶解1-10h, 再按原料甲鱼重量的0.1-2%的比率加入风味蛋白酶，40-70℃恒温酶解0.2-4h,将得到的酶解液升温至85-120℃，灭酶10-60min;

2.  将酶解液离心后过滤，上清液经过中空超滤膜，卷式膜或管式膜精制分离，膜截留分子量为0.5-30万道尔顿的超滤膜，进口压力为1.8-3bar，出口压力1-2bar,酶解液温度为20-30℃进行超滤分离，超滤液经过薄膜浓缩，喷雾干燥即得到甲鱼低聚肽。

本发明也可以先把原料甲鱼搅碎，煎煮1-10h，冷却至45-65℃后再进行酶解。

优选的制备方法：

1. 按原料甲鱼的重量的0.5-3%的比率加入碱性蛋白酶，50-65℃恒温酶解2-4h, 再按原料甲鱼重量的0.25-1%的风味蛋白酶，50-65℃恒温酶解0.5-2h,将得到的酶解液升温至90-110°C，灭酶20-40min;

2. 将酶解液离心后过滤，上清液经过中空超滤膜，卷式膜或管式膜精制分离，膜截留分子量为5-15万道尔顿的超滤膜，进口压力为1.2-2.5bar，出口压力1-1.8bar，酶解液温度为20-30°C进行超滤分离，超滤液经过薄膜浓缩，喷雾干燥即得到甲鱼低聚肽成品。

上述步骤中也可以先把原料甲鱼搅碎，煎煮2-4h，冷却至50-62°C后再进行酶解。

更优的方法：

1.    按原料甲鱼的重量的2%的比率加入碱性蛋白酶，60℃恒温酶解3h,再分别按原料甲鱼重量的0.5%的风味蛋白酶，60℃恒温酶解1h,将得到的酶解液升温至100°C，灭酶30min;

2.      3.将酶解液离心后过滤，上清液经过中空超滤膜，卷式膜或管式膜精制分离，膜截留分子量为10万道尔顿的超滤膜，进口压力为1.5-2bar，出口压力1.5bar；酶解液温度为25°C进行超滤分离，超滤液经过薄膜浓缩，喷雾干燥即得到甲鱼低聚肽成品。

上述步骤中也可以先把原料甲鱼搅碎，煎煮4h，冷却至60°C后再进行酶解。

本品为鳖科动物鳖Trionyx sinensis Wiegmann的全体。

与现有技术相比，本发明方法的优点和有益效果如下：

1.    本发明方法提取的甲鱼低聚肽纯度高，分子量集中，分子量在1000-140道尔顿占50%以上。

2.    本发明生产出来的甲鱼低聚肽的人体容易吸收。

3.    本方法避免了调节PH，纳滤脱盐工序，减少了工业成本，改善了成品的风味，提高了肽的得率。