[发明专利]一种人类DNA STR检测用标准物质的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种人类DNA STR检测用标准物质的制备方法，用于解决法医学、人类学、遗传学和疾病等领域的个体识别、亲子鉴定以及基因诊断方面的DNA检测的准确性和标准化问题。 

背景技术

标准物质是具有准确量值的测量标准，按照“国际通用计量学基本术语”和“国际标准化组织指南30”，标准物质(reference material，RM)有如下定义：具有一种或多种足够均匀和很好地确定了的特性值，用以校准测量装置，评价测量方法或给材料赋值的一种材料或物质。通过标准物质实现了量值的传递和溯源，使得测量的标准可溯源至国际基本单位。 

DNA标准物质(DNA standard reference materials，简称SRM)，是具有特性量值的DNA测量标准，能够保证DNA测量结果的有效性和可比性，保证测量结果可溯源至国际单位制或者其他国际一致认可的单位，确保实验室DNA检测结果的可比性及一致性。 

DNA检测属于生物技术的范畴，快速发展的生物技术对有效性检测提出了更高的要求，生物计量作为一门崭新的科学也得到了人们的关注。1999年10月，第21届国际计量大会决定把生物计量学提上日程。随后，物质的量咨询委员会(Consultative Committee for Quantity ofSubstance-Metrology，CCQM)成立了生物分析工作组(BioanalysisWorking Group，BAWG)，至2007年已召开了11次会议。该工作组的主要目的是建立生物技术可溯源测量系统，优先考虑的是核酸测量、蛋白质测量及其方法、分析过程的标准化，以及标准物质的研制，以 便巩同核酸和蛋白质测量的应用领域。 

DNA检测主要采用PCR方法检测，人类DNA检测用标准物质通常是具有特性量值的人类DNA基因组，以人类DNA检测用标准物质作为模板进行PCR，可以为DNA检测工作提供科学的溯源保证，以提高检测结果的科学性和可靠性，也可以对仪器进行检验及校准、评价和研究新的DNA检验方法、实验室认可、DNA分析的内部质量控制，还可以用于对DNA检验人员水平及能力的考核。 

在法医DNA检测领域，其检测技术迅速发展，检测过程的标准化及规范化显得尤其重要，这就需要标准物质对检测过程进行质量控制。1998年，美国联邦调查局(FBI)的DNA建议委员会标准9.5指出：“实验室每年或者实验条件变化时都应该使用美国国家标准技术研究所(NIST)提供的标准物质(SRM)对DNA检验步骤进行核查。”目前我围还没有适合法医DNA检测的标准物质。 

法医DNA检测经历了限制性片段长度多态性(RFLP)、短串联重复序列(STR)和单核苷酸多态性(SNP)。同样，法医DNA标准物质也随着检测技术的发展而不断推出新的标准物质。NIST作为美国的商业部门，负责开发国家及国际标准物质。在NIST提供的标准物质中，有多种标准物质用于法医DNA的分型检测——基于RFLP分型技术的SRM2390、基于STR分型技术的SRM2391b、用于线粒体DNA检测的SRM2392、用于Y染色体DNA分型的SRM2395和用于人类DNA定量的SRM2372。 

目前最常用于法医DNA检验的遗传标记为STR遗传标记，短串联重复序列(short tandem repeat，STR)是广泛存在于人类基因组中的一类具有长度多态性的DNA序列。它由2-6个碱基作为核心序列，呈串联重复排列，其长度多态性主要由核心序列的数目变化和重复次数不同而产生。STR分布广、数目多，约占人类基因组的10％，一般认为，人类基因组平均每6-10kb就有1个STR基因座，不同STR基因座的组合产生了极为丰富的基因座图谱信息，为法医物证学中的个体识别和亲子鉴定提供了基础。法医DNA STR检测用标准物质用于 对DNA检测过程中的质量控制和质量保证，通过使用标准物质，使检测过程的标准化和规范化，建立标准化的DNA分析技术，确保法医DNA检测分析结果的准确性、公正性和可靠性，为DNA的检测结果提供了质量保障，DNA标准物质也有利于各国各实验室之间的数据的交流。