[发明专利]地喹氯铵-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺共轭化合物及其修饰的白藜芦醇脂质体

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种地喹氯铵-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺共轭化合物及其制备方法，以及以该共轭化合物修饰的白藜芦醇脂质体

背景技术

肿瘤的多药耐药性是化疗失败的主要原因，可导致肿瘤细胞对治疗的耐药、复发及转移，尤其是内源性的多药耐药。肿瘤细胞可通过改变前凋亡及凋亡基因编码的蛋白质(如Bcl-2家族蛋白、凋亡信号通路中的Caspase蛋白等)的功能来引起遗传及表观遗传的改变，从而造成内源性的多药耐药。

癌症的化疗主要采取两种基本方式来消除肿瘤细胞：一是通过将化疗药直接作用于肿瘤细胞将其杀死，二是通过激活肿瘤细胞的凋亡基因，从而展开程序化杀伤肿瘤细胞。

线粒体是一种绝大多数真核细胞中都存在的膜封闭的细胞器，是细胞的能量工厂。线粒体除了可以供应细胞能量，也是细胞命运的调控中心，参与着细胞分化、细胞死亡，控制着细胞的周期和生长。肿瘤细胞的线粒体在结构和功能上都与正常细胞有所不同，其表现出更广泛的代谢能力，对作用于线粒体的药物也更加敏感。

抗癌药物诱导肿瘤细胞凋亡效应主要包括两种独立的上游起始通路：一，通过与死亡受体的配体交联，从而激活上游的Caspase；二，通过触发各种形式的细胞应激，释放凋亡因子。这两种通路都集中于在线粒体水平，继而诱导细胞凋亡。因此，直接作用于肿瘤细胞的线粒体并诱导其凋亡为克服化疗中的内源性耐药问题提供了策略。综上，线粒体靶向性治疗是一种选择性消除肿瘤细胞的有效手段。

越来越多的线粒体作用的药物被开发用来诱导肿瘤细胞的凋亡，例如葡萄糖转运抑制剂、线粒体通透性转换调节剂、线粒体外膜渗透性调节剂等。但是这些药物常因不利的药动学性质不能达到预期的治疗效果，增大了药物的毒性。人们已经开发了许多线粒体药物递送系统来解决这一问题，如将线粒体靶向性分子磷酸三甲苯酯(TPP)、地喹氯铵(DQA)或线粒体靶向性信号蛋白(MTSs)修饰到脂质载体上，从而达到将药物靶向线粒体的目的。

白藜芦醇是一种多酚化合物，在植物类食物中普遍存在。白藜芦醇是一种很有潜力的抗癌剂，可抑制癌变的三个主要阶段：启动、促进和演进，并启动线粒体凋亡通路，诱导多种癌症细胞凋亡。但是，由于白藜芦醇的水溶性低、稳定性差及治疗指数差，在临床中的应用十分有限。

发明内容

本发明的目的是提供一种地喹氯铵-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DQA-PEG₂₀₀₀-DSPE)共轭化合物及其制备方法。

本发明所提供的DQA-PEG₂₀₀₀-DSPE共轭化合物的结构式如式I所示：

(式I)

式I所示的化合物的制备方法，包括下述步骤：使式II所示的地喹氯铵与式III所示的羧基聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺进行酰胺缩合反应，得到式I所示化合物；

(式II)

(式III)。

所述酰胺缩合反应中所用的反应缩合剂为二环己基碳二亚胺和1-羟基苯并三唑；所述酰胺缩合反应中所用的催化剂为4-二甲氨基吡啶。所述酰胺缩合反应在乙腈与水的混合溶剂中进行，两者的体积比可为1∶1。

所述酰胺缩合反应中地喹氯铵∶4-二甲氨基吡啶∶二环己基碳二亚胺∶1-羟基苯并三唑∶羧基聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺＝5∶24.6∶10∶10∶1(摩尔比)。

所述方法还包括将含式I所示化合物的反应液在水中进行透析纯化，并将透析后的液体冻干的步骤。

所述透析中使用的是截留分子量为2000Da的透析袋。

本发明的再一个目的是提供一种线粒体靶向性白藜芦醇脂质体及其制备方法。

本发明所提供的线粒体靶向性白藜芦醇脂质体，其组成包括：白藜芦醇和脂材，所述白藜芦醇和脂材的质量比为1∶20至1∶40，优选为1∶20；所述脂材由蛋黄卵磷脂、胆固醇和式I所示的化合物组成，三者的摩尔比依次为(63-67)∶(18-22)∶(2-4.35)，优选为65∶20∶4.35。

所述线粒体靶向性白藜芦醇脂质体的制备方法，包括下述步骤：

将组成脂质体的白藜芦醇和脂材溶于有机溶剂中，旋转蒸发除去所述有机溶剂，得到脂膜；将所述脂膜用甘露醇溶液水化，再将得到的悬液用超声或高压匀质处理，最后用微孔滤膜过滤，即得到所述线粒体靶向性白藜芦醇脂质体。

所述甘露醇溶液具体可为质量浓度为5％的甘露醇水溶液。

本发明另一个目的是提供上述线粒体靶向性白藜芦醇脂质体的应用。