[发明专利]一种多菌灵单克隆抗体及其制备方法与应用

权利要求书

1.多菌灵的单克隆抗体，由保藏编号为CGMCC No. 4575的小鼠杂交瘤细胞株MC-3产生。

2.能分泌抗多菌灵单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞株MC-3，其保藏编号为CGMCC No. 4575。

3.一种制备权利要求1所述多菌灵的单克隆抗体的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

（1）在多菌灵的第9位氨基酸残基引入1个氨基，得到经氨基修饰的多菌灵，再将该经氨基修饰的多菌灵与载体蛋白偶联得到完全抗原A；

（2）将步骤（1）的完全抗原A免疫小鼠，取免疫小鼠的脾细胞，与小鼠骨髓瘤细胞融合，筛选出阳性杂交瘤细胞株；扩大培养该阳性杂交瘤细胞株，将阳性细胞株注入同系小鼠腹腔诱导产生腹水，得到多菌灵的单克隆抗体。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）中，采用乙二醇法在多菌灵的第9位氨基酸残基引入1个氨基。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）中，载体蛋白为钥孔血蓝蛋白。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中，用于免疫的小鼠为Balb/C小鼠；免疫方法为：每只小鼠每次免疫所用的完全抗原A量为40~80μg，两次免疫的间隔时间为20~30天；免疫方式为皮下多点注射；

所述步骤（2）中，小鼠骨髓瘤细胞为小鼠骨髓瘤细胞sp2/0。

7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中，筛选阳性杂交瘤细胞株的方法为：先用包被抗原筛选1~2次，再用偶联有载体蛋白的无关小分子筛选至少1次；所述包被抗原为所述步骤（1）中的多菌灵与载体蛋白偶联得到的完全抗原B；所述完全抗原B与所述完全抗原A中的载体蛋白不相同。

8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述阳性杂交瘤细胞株为能分泌抗多菌灵单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞株MC-3，其保藏号为CGMCC No. 4575。

9.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法还包括纯化所述多菌灵单克隆抗体的步骤。

10.权利要求1所述多菌灵的单克隆抗体在检测多菌灵中的应用。