[发明专利]脑脊液中的β淀粉样聚集体作为阿尔茨海默病的生物标记

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求2009年11月30日提交的美国临时专利申请序列号61/265,340的优先权，其通过引用全文纳入本文。

背景技术

阿尔茨海默病是与年龄相关的最常见痴呆形式，在将来50年内将成为一种流行病，因为相当高比率的世界人口年龄增长要超过65岁。尽管照顾阿尔茨海默病患者是社会重要而且增加的经济负担，现存的几种治疗只是减轻疾病症状；没有预防性的治疗。另外，目前诊断方法依赖于此疾病易于观察的症状，所述症状只在疾病发展中显现。

阿尔茨海默病与大脑中错误折叠的Aβ和tau蛋白的聚集有关。已证明难以在活体对象和由活体对象获取的样品中检测错折叠蛋白的聚集。目前证实活体患者中存在聚集物的技术粗略且具有侵入性。例如，组织病理学检查要求对患者存在风险的活检。组织病理学固有地存在取样误差，因为病损和聚集的致病蛋白沉积可能根据进行活检区域而被忽略。因此，在对象死亡之前对这些病症进行确定诊断和姑息治疗仍然是一个巨大的尚未实现的挑战。

大脑中β淀粉样蛋白（Aβ）聚集体主要是Aβ1-40（Aβ40）和1-42（Aβ42），这些聚集体与阿耳茨海默病（AD）关，被视作该疾病的黄金标准标记物。然而，AD唯一的确定性检验是在死后对脑样品进行纤维状Aβ聚集斑块的免疫组织化学染色。目前，尚没有FDA批准的AD死前诊断试验。血浆或CSF样品可用于死前试验。一些死前AD试验聚焦于脑脊液(CSF)，试图对可溶性单体Aβ42进行定量。然而，这种生物标记物仅仅用作AD的间接测量。

近期文献指出Aβ的小、可溶性非纤维状寡聚种类可能是神经毒剂，直接造成阿尔茨海默病表型（Hoshi等，PNAS，2003，100，6370；Lambert等，PNAS，1998，95，6448；Sakano和Zako，FEBBS J.，2010，277（6），1348；Fukumoto等，2010，FASEB J.，24，2716）。另外，使用Aβ42抗体或用荧光标记Aβ42的种子多聚化策略，与发现取自阿尔茨海默病患者的脑脊髓液（CSF）中Aβ寡聚种类水平相较，取自健康对照对象的CSF提高（Georganopoulou等，PNAS，2005，102，2273；Pitschke等，Nature Medicine，1998，4（7））。

需要使用早期检测阿尔茨海默病的额外生物标记，从而能更快和更高效的诊断和评价阿尔茨海默病的潜在治疗。另外，需要预后阿尔茨海默病，这与来自轻度认知损害（MCI）临床诊断的其他痴呆完全不同。还需要确定患者阿尔茨海默病阶段的方法，从而治疗和护理可就有效健康护理方案进行适当调整。另外，评价阿尔茨海默病进展的能力能极大帮助测试和评价疾病的潜在治疗。

优选实施方式的简要概述

本文所述发明通过提供单独使用Aβ40聚集体或与Aβ42单体，Aβ40单体或阿尔茨海默病其他生物标记联用的方法，来满足这些需要。

因此，一方面包括评估所评价对象有阿尔茨海默病可能性增加的方法，包括获得对象生物样品Aβ40聚集体检测值的步骤，其中所述生物样品不包括脑组织，脑组织部分或脑匀浆。在本方面的某些实施方式中，所述方法还包括将Aβ40聚集体检测值报道到包括可见显示或打印机在内的报告机构的步骤。在其他实施方式中，Aβ40聚集体检测包括生物样品中Aβ40聚集体的水平。在另一些实施方式中，所述方法还包括如果Aβ40聚集体水平高于对照水平临界值，确定对象有阿尔茨海默病可能性增加的步骤，其中对照水平临界值从包括多种认知正常对照对象的生物样品的Aβ40聚集体水平计算获得；其中评价对象和对照对象是同一物种；并且其中所有生物样品是同一样品类型。在上述方法的某些实施方式中，阿尔茨海默病处于早期。

另一方面包括评估所评价对象没有阿尔茨海默病的可能性增加的方法，包括如下步骤：获得对象生物样品的Aβ40聚集水平；并且如果对象没有显示临床认知损伤并且如果Aβ40聚集体水平等于或低于对照水平临界值，确定对象没有阿尔茨海默病的可能性增加；其中，对照水平临界值从包括多种认知正常对照对象的生物样品的Aβ40聚集体水平计算获得；其中评价对象和对照对象是同一物种；并且其中所有生物样品是同一样品类型，且所有生物样品都不包括脑组织，脑组织部分或脑匀浆。