[发明专利]用于辐射后保护的组合物和方法

说明书

发明领域

本公开总体涉及辐射暴露，更具体地涉及包含RLIP76蛋白部分的组合物和这种组合物在哺乳动物的辐射后保护中的应用。

发明背景

辐射损伤由几种机制发生，并且各机制的相对作用取决于暴露量。在极高量下，辐射引起细胞死亡，该细胞死亡是由于造成DNA双螺旋链完全断裂(双链断裂，DSB)的直接DNA损伤。但是，随暴露水平下降，其他作用变得显著。其中包括过氧化过程，这是由于辐射电离能量产生高活性自由基，特别是与元素氧(活性氧物质；ROS)有关，甚至在核避开直接撞击的细胞中。活性氧物质具有毒性，因为其倾向于结合和修饰其途径中的几乎任何物质，包括蛋白质、脂质和核酸。随时间过去，具有显著ROS水平的细胞可与具有直接DNA影响的细胞受到相等损害。由于基因组不稳定性，ROS损伤也可导致最终致死的DNA异常。因此，细胞遭受的损伤量将取决于受到的辐射剂量，并将表现为直接DNA损伤、ROS损伤和源于ROS影响的间接DNA损伤的组合。对生物体总体损伤的定时和程度因此很大程度上取决于受到的辐射量，导致存活率与暴露量之间渐进的非线性关系。

辐射中毒的候选治疗通常是试图增强抵抗ROS影响的正常细胞防御的试剂。实例包括自由基清除剂(如依达拉奉(3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮)、维生素E及类似物)、超氧化物歧化酶类似物(如tempol(4-羟基-2，2，6，6-四甲基哌啶氧))及试图降低胞内ROS浓度的其他试剂。这些候选治疗被设计以在辐射暴露前给予或在辐射暴露后立即给予。对这些试剂的任何益处的评价通常被设计以探寻暴露后一个月存活率的提高，因为到那时任何毒性均是上述间接过程的结果。

常用的基准测量是剂量减少系数(DRF)，其被定义为用候选试剂治疗小鼠时在暴露后30天给出50％死亡率的辐射剂量与不给予治疗(或给予对照治疗)达到该LD50/30的辐射剂量的比。该测量是非线性的，从而DRF的微小增加表示对辐射抵抗力的略大改变。对于被认为将有希望由国防部(Department of Defense)进一步评价的候选试剂，通常要求1.2或更高的DRF。该要求可以是极大的障碍。依达拉奉和tempol在体外系统均具有显著效果，但在全动物研究中，仅控制所报道的1.3的DRF。该限制可出现是由于细胞已防御自由基，包括多种可在其结合其他组分前结合ROS的蛋白质。但是，这种结合没有赋予完全的保护，因为复合蛋白质本身对细胞有毒。因此，额外消耗的清除剂在有益的同时并不表现为细胞防御级联中的“限速”步骤，因为一旦基团不再“自由”，其不能防止任何后续影响。

此外，目前可用的辐射保护剂必须在辐射暴露前被给予或在辐射暴露后被立即给予，例如在辐射暴露后4小时内。Landauer等，“Genistein treatment protects mice from ionizing radiation injury.”J APPL TOXICOL 23(6)：379-85(2003)；Vijay-Kumar et al.，“Flagellin treatment protects against chemicals，bacteria，viruses，and radiation.”JIMMUNOL 180(12)：8280-5(2008)。但不幸地，可能不可能在辐射暴露4小时内治疗该暴露。因此，本领域迫切需要有效的辐射保护剂，特别是在辐射暴露后24小时以上之后给予时有效的辐射后保护剂。

发明概述

本公开总体涉及在生物体已暴露于辐射后，例如在生物体已暴露于辐射后24小时以上之后，良好地治疗或控制对象或生物体——例如，哺乳动物，如人——的辐射暴露效应(影响)的方法。这些方法包括在辐射暴露后——即辐射后——向生物体给予治疗有效量的RLIP76蛋白或RLIP76蛋白的有效部分。令人惊讶地，如本文公开，生物体在辐射暴露后24小时以上之后继续受益于RLIP76蛋白或其有效部分的给予。如本文所用，“RLIP76蛋白的有效部分”或“其有效部分”或“活性片段”是促进对细胞或生物体中的辐射暴露效应的治疗的任意RLIP76蛋白质片段(一个或多个)、蛋白质部分(一个或多个)或其组合。RLIP76蛋白可以是重组的RLIP76蛋白或其片段或部分。在此公开的方法不包括在辐射暴露前(before或prior)给予生物体RLIP76蛋白或其有效部分。