[发明专利]利用稳定辅酶的酶的稳定化在审
| 申请号: | 201080036800.9 | 申请日: | 2010-08-18 |
| 公开(公告)号: | CN102471767A | 公开(公告)日: | 2012-05-23 |
| 发明(设计)人: | W.勒德尔;C.霍恩;N.施泰因克;N.布西;T.迈尔;R.施姆克;R.纳格尔;D.海因德尔 | 申请(专利权)人: | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 |
| 主分类号: | C12N9/96 | 分类号: | C12N9/96;C12N9/06 |
| 代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 柯珂;郭文洁 |
| 地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 利用 稳定 辅酶 | ||
1.稳定酶的方法
其特征在于
所述酶在存在稳定化的辅酶的情况下保存,并且醇脱氢酶(EC 1.1.1.2)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(EC 1.1.1.49)或心肌黄酶(EC 1.6.99.2)被用作所述酶。
2.根据权利要求1的方法,
其特征在于
稳定化的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD/NADH)化合物、稳定化的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP/NADPH)化合物或式(I)的化合物
被用作稳定化的辅酶。
3.根据权利要求1或2的方法
其特征在于
通式(II)的化合物被用作稳定化的辅酶:
其中
A = 腺嘌呤或其类似物,
T = 在每种情况下独立的O、S,
U = 在每种情况下独立的OH、SH、BH3-、BCNH2-,
V = 在每种情况下独立的OH或磷酸基团,或形成环状磷酸基团的两个基团,
W = COOR、CON(R)2、COR、CSN(R)2 其中R=在每种情况下独立的H或C1-C2烷基,
X1, X2 = 在每种情况下独立的O、CH2、CHCH3、C(CH3)2、NH、NCH3
Y = NH、S、O、CH2,
Z = 直链或环状的有机残基,条件是Z和吡啶残基不通过糖苷键连接,或其盐或任选的还原形式。
4.根据权利要求3的方法,
其特征在于
Z是饱和的或不饱和碳环的或杂环的 5-元环,特别是通式(III)的化合物
其中单键或双键可以存在于R5'和R5''之间,其中
R4 = 在每种情况下独立的H、F、Cl、CH3,
R5 = CR42,
R5' = O、S、NH、NC1-C2-烷基、CR42、CHOH、CHOCH3,以及如果R5'和R5''之间是单键,R5'' = CR42、CHOH、CHOCH3 ,
如果R5'和R5''之间是双键,R5' =R5'' = CR4
以及
R6, R6' = 在每种情况下独立的CH或CCH3。
5.根据权利要求1到4之一的方法,
其特征在于
carbaNAD被用作稳定化的辅酶。
6.根据权利要求1到5之一的方法,
其特征在于
所述稳定化的酶被保存至少2周、优选的至少4周以及最优选的至少8周的时间。
7.根据权利要求1到6之一的方法,
其特征在于
所述稳定化的酶被保存在至少20℃、优选的至少25℃以及最优选的至少30℃的温度下。
8.根据权利要求1到7之一的方法,
其特征在于
所述稳定化的酶在至少50%的相对空气湿度下,或/和在不存在干燥剂的情况下保存。
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