[发明专利]一种细菌的检测方法

权利要求书

1.一种细菌的检测方法，包括以下步骤：

步骤1：提供对照细菌样品；

步骤2：固定有一种以上凝集素的固体支持物分别与待测样品和对照细菌样品充分作用，洗涤除去固体支持物上未结合的样品；

步骤3：洗涤后的固体支持物与凝集素修饰的金纳米粒子充分作用，洗涤除去固体支持物上未结合的金纳米粒子；

步骤4：检测固体支持物上结合的金纳米粒子的共振光散射信号，与对照细菌样品共振光散射信号比较，分析待测样品细菌种类。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述凝集素为蓖麻凝集素I、山槐黄柏苷凝集素、荆豆凝集素、大豆凝集素、鸡冠珊瑚树凝集素、接骨木凝集素、西非单叶豆凝集素、麦胚凝集素、刀豆素A、橙黄网胞盘菌凝集素、喇叭水仙凝集素、蔓陀萝凝集素、扁豆凝集素或花生凝集素。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述金纳米粒子半径为10nm～13nm。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述检测共振光散射信号之前还包括增强信号步骤。

5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，所述增强信号步骤具体为与银增强溶液反应5～10min，18.2MΩ水洗涤。

6.一种用于细菌检测的凝集素修饰的金纳米粒子，其特征在于，金纳米粒子直接或间接与凝集素结合。

7.一种凝集素修饰的金纳米粒子的制备方法，包括：

步骤1：金纳米粒子与多肽反应，得到多肽修饰的金纳米粒子，所述多肽为Cys-Ala-Leu-Asn-Asn和摩尔比为9∶1的混合物；

步骤2：多肽修饰的金纳米粒子与亲和素反应，得到亲和素修饰的金纳米粒子；

步骤3：生物素与凝集素反应，得到生物素修饰的凝集素；

步骤4：亲和素修饰的金纳米粒子与生物素修饰的凝集素反应，得到凝集素修饰的金纳米粒子。

8.权利要求7所述制备方法制备的凝集素修饰的金纳米粒子。

9.一种用于细菌检测的试剂盒，包括权利要求6或8所述凝集素修饰的金纳米粒子和凝集素生物芯片，所述凝集素通过将一种以上的凝集素固定在固体支持物上得到。