[发明专利]一种黄腐酚和黄酮类化合物的萃取分离方法

说明书

技术领域

本发明属于黄酮类化合物的分离纯化领域，尤其是一种黄腐酚和黄酮类化合物的萃取分离方法。

背景技术

啤酒花(Humulus lupulus L)又名忽布，属于桑科葆草属多年生草本植物，是酿造啤酒的主要原料之一，它能使啤酒具有独特的香气和苦味，以及防腐作用，与麦汁共沸时能促进蛋白质凝固，有利于麦汁的澄清，增强啤酒的非生物稳定性和泡持性等。啤酒花也是一种使用历史悠久的药食同源植物，酒花中含有树脂、酒花油、多酚、黄酮等多种药理成分，具有抗菌，镇静，治疗结核、神经衰弱、麻风等药理功能。

啤酒酿造中使用的酒花制品可以分为全酒花、酒花粉、颗粒酒花、酒花浸膏等。前三种制品均含有大量的黄酮化合物，采用超临界二氧化碳方法制备的酒花浸膏是将酒花中的有效成分萃取出来而制成的浓缩了5～10倍有效成分的树脂浸膏，因黄酮类化合物有一定的极性，不易被萃取，故采用超临界二氧化碳法制备的酒花浸膏中基本不含有黄酮类化合物，大量的黄酮等物质存在于二氧化碳酒花浸膏萃余物中。研究表明，黄酮类化合物具有抗氧化作用、保护心血管等多种活性作用；黄腐酚是一种存在于酒花中独特的异戊二烯类黄酮化合物，它不仅具有抗氧化、抗病毒和雌激素作用，而且还具有预防癌症和抑制癌细胞增殖的作用。此外，黄腐酚还具有预防、治疗糖尿病和动脉粥样硬化的作用。超临界二氧化碳酒花萃余物目前主要被用做饲料，大量的黄酮化合物没有得到有效的利用，造成一定的资源浪费。

目前，富集、纯化酒花及其超临界CO2酒花浸膏萃余物中黄腐酚和其他黄酮类化合物的方法多采用大孔吸附树脂、柱色谱法等，但大多只注重黄腐酚的分离纯化而忽略了酒花中其他黄酮类化合物，造成了资源浪费，或提取纯度不高，工艺复杂等问题，难以满足医药、保健品等行业对黄腐酚及黄酮类化合物纯度要求较高的的需要。

据检索，发现两篇与专利相关的专利文献，其中CN101337876公开了“一种从啤酒花中提取黄腐酚的方法”，包括如下步骤：(1)将啤酒花粉碎；(2)将100g粉碎的啤酒花用800-2000mL石油醚回流提取，提取温度60-65℃，提取时间0.5-1小时，过滤除去石油醚溶液，重复提取2-3次，得到脱脂啤酒花；(3)将上述脱脂啤酒花用800-2000mL体积浓度90～100％的乙醇进行超声提取，超声功率200W，提取温度55-65℃，提取时间30-50分钟，提取液过滤，重复提取2-3次，合并滤液、减压浓缩至稠膏；(4)在上述稠膏中加入250-350mL乙酸乙酯，搅拌，溶解后加入150-250mL水进行分配，静置分层，分离两相，弃去水相，乙酸乙酯相重复加水分配2-3次，而后乙酸乙酯相减压浓缩，真空干燥，得黄腐酚粗提物；(5)将上述黄腐酚粗提物进行第一步高速逆流色谱分离，分离溶剂体系为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，其体积比为5∶4∶4.8∶4，上相为固定相，下相为流动相，按紫外检测图谱收集目标流分；(6)将目标流分真空浓缩回收溶剂后，进行第二步高速逆流色谱分离，分离溶剂体系为正己烷-正丁醇-甲醇-水，其体积比为3.6∶1∶1.8∶3，上相为固定相，下相为流动相，按紫外检测图谱收集黄腐酚流分，真空浓缩、冷冻干燥得到粉末状黄腐酚。专利申请CN101492357公开了“一种二氧化碳萃取酒花残渣中黄腐酚的富集方法”，该方法包括以下步骤：(1)用40～60％的低级醇或丙酮溶液浸提二氧化碳萃取后的酒花残渣，使其中含有黄腐酚的黄酮类化合物充分溶解；(2)浸提后过滤收集溶液，减压蒸馏回收低级醇或丙酮；(3)将水溶液用吸附树脂处理，含有黄腐酚的黄酮类化合物被吸附树脂吸附，杂质成分用水冲洗出吸附柱后，用有机溶剂洗脱剂将含有黄腐酚的黄酮类化合物从吸附柱上洗脱下来，洗脱剂采用50％～99％的甲醇、乙醇或丙酮水溶液；(4)洗脱液真空蒸馏回收有机溶剂，浓缩后的水溶液经喷雾干燥，得到富集了黄腐酚的黄色粉末。