[发明专利]食源性致病菌多重扩增内标序列及其制备方法

权利要求书

1.一种食源性致病菌PCR检测中的多重扩增内标序列，其特征在于，该序列的碱基序列 如下：

1054F--15bp--hlyAF--15bp--PrsF--15bp--PSF--15bp--SA1F--扩增内标序列--SA1R--15bp --hlyAR--15bp--PSR---15bp--PrsR--15bp--1054R；

其中，

所述1054F的碱基序列如SEQ ID NO：8所示；

所述1054R的碱基序列如SEQ ID NO：9所示；

所述hlyAF的碱基序列如SEQ ID NO：10所示；

所述hlyAR的碱基序列如SEQ ID NO：11所示；

所述PrsF的碱基序列如SEQ ID NO：12所示；

所述PrsR的碱基序列如SEQ ID NO：13所示；

所述PSF的碱基序列如SEQ ID NO：14所示；

所述PSR的碱基序列如SEQ ID NO：15所示；

所述SA1F的碱基序列如SEQ ID NO：16所示；

所述SA1R的碱基序列如SEQ ID NO：17所示；

所述15bp为由如SEQ ID NO：18所示的的碱基序列随机重排后得到的任一序列；

所述多重扩增内标序列的碱基序列如SEQ ID NO：2所示。

2.一种根据权利要求1所述的食源性致病菌PCR检测中的多重扩增内标序列的制备方法， 其特征在于，包括如下步骤：

步骤一，随机重排SEQ ID NO：1所示的碱基序列，得到相应的核酸，选取与所要检测的 五种目的基因无同源性的任一核酸作为扩增内标序列；所述五种目的基因具体为碱基序列分别 如SEQ ID NO：3～7所示的基因；

随机重排碱基序列ATTTCCAAGGTGAGC，选择任一序列作为长度为15bp的序列；

步骤二，采用常规多重扩增内标构建方法，利用步骤一所得的扩增内标序列、长度为15bp 的序列以及碱基序列如SEQ ID NO：8～17所示的10条序列构建如下的多重扩增内标：

1054F--15bp--hlyAF--15bp--PrsF--15bp--PSF--15bp--SA1F--扩增内标序列--SA1R--15bp --hlyAR--15bp--PSR--15bp--PrsR--15bp--1054R。