[发明专利]抗前列腺癌贻贝酶解提取物的制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种贻贝酶解提取物的制备方法，该提取物能用于抗前列腺癌。 

背景技术

多肽在生物体内可作为神经递质、白细胞介素和细胞生长因子等活性物质，具有维持生物体生长发育、免疫调节和新陈代谢等活性功能。现有研究表明，来源于生物体的多肽具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌、抗衰老、抗高血压等活性功能，尤其是抗肿瘤活性已受到各国研究人员的关注。目前，有关天然肽和合成肽的抗肿瘤活性已有大量报道，并有部分多肽作为抗肿瘤药物已应用于临床；食物蛋白来源的多肽对于其抗菌、抗氧化、抗高血压活性研究颇多，而对其抗肿瘤活性的相关报道较少。 

海洋生物蛋白种类繁多，来源广泛，作为活性肽的一个重要来源，已受到越来越多的关注。贻贝作为海洋生物的一个重要组成部分，隶属于海洋软体动物门(Mollusca)双壳纲(Bivalvia)贻贝目(Mytiloida)，在我国北方称海红，江浙称为淡菜，富产于浙江嵊泗周围海域。贻贝富含粗蛋白、脂肪和碳水化合物，此外还含有钙、磷、铁、维生素等多种微量元素。已有研究表明，贻贝提取物具有抗肿瘤、抗氧化、抗凝、降血压、降血脂、提高免疫力等活性功能，可参考专利号为ZL200510110096.8的中国发明专利《厚壳贻贝的提取物、制造方法及其用途》(授权公告号：CN100467030C)，该专利公开了厚壳贻贝的提取物在流感上的应用。类似的还可以参考专利号为ZL200510024391.1的中国发明专利《一种可提高免疫力功能的厚壳贻贝提取物》(授权公告号为CN100486593C)；申请号为200910101136.0的中国发明专利申请公开《厚壳贻贝脂溶性提取物及其制备方法和用途》(公开号：CN101606951A)。但至今未见有关贻贝酶解产物对前列腺癌细胞作用的相关报道。 

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对上述的技术现状而提供一种抗前列腺癌贻贝酶 解提取物的制备方法。 

本发明所要解决的又一个技术问题是提供一种贻贝酶解提取物在抗前列腺癌上的应用。 

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种抗前列腺癌贻贝酶解提取物的制备方法，其特征在于包括如下步骤 

①样品的制备，将贻贝洗净，去壳取肉并匀浆，料液比1∶3～1∶4，调节pH值至9.5～10，保温25～30℃； 

②加入Alcalase(碱性蛋白酶)，加酶量为1500～2000u/g，酶解温度为45～50℃，酶解时间6-8h，灭活，离心，取上清液，得酶解产物。 

作为优选，所述的Alcalase酶活力为19395～19405u/g，采用的缓冲液为pH为10的甘氨酸-NaOH缓冲液。 

所述的贻贝可以是紫贻贝、厚壳贻贝或翡翠贻贝。 

作为优选，所述的包括如下步骤 

①样品的制备，将贻贝洗净，去壳取肉并匀浆，料液比1∶4，调节pH值至10，保温30℃，30min； 

②加入Alcalase，加酶量为2000u/g，酶解温度为50℃，酶解时间8h，灭活，离心，取上清液。 

作为优选，所述的酶解产物的氨基氮为8.3337～8.3347mg/g。 

作为优选，所述的酶解产物的对前列腺癌细胞DU-145的细胞增殖抑制指数为55.36％～55.38％。 

酶解产物在抗前列腺癌上的应用。 

与现有技术相比，本发明的优点在于：通过对酶的筛选，料液比、酸碱度、加酶量、温度及酶解时间的控制，得出了一个最佳的工艺，并产物对前列腺癌细胞具有良好的增殖抑制作用。 

附图说明

图1为酪氨酸标准曲线图。 

图2为各酶水解产物对应的ANN含量。 

图3为各酶水解产物对应的IR含量。 

具体实施方式

以下结合附图实施例对本发明作进一步详细描述。 

1蛋白酶活力测定方法