[发明专利]小蓬竹组织培养的培养基组合物及其应用

说明书

技术领域

本发明属于竹类组织培养技术，具体地说是涉及一种小蓬竹组织培养的培养基组合物及其应用。

背景技术

小蓬竹(Drepanostachyum Luodianense(Yi et R.S.Wang)Keng f.)系禾本科竹亚科镰序竹属竹种，又名“藤竹”，是中国特有种，在《中国物种红色名录》中被列为极危种。目前只在贵州的罗甸、平塘及长顺有栽培或有野生分布，常成片生长于海拔600～1000m的石灰岩裸露石山上。它的竹材柔韧可编凉椅和农具，也可作为造纸原料；形态优美，是良好的园林绿化竹种，并在环境恶劣的喀斯特地区生长良好，能耐干旱和瘠薄，对增强土壤的固土、保水、保肥能力效果十分显著，是喀斯特地区的适生性物种，在喀斯特生态系统中对水源涵养、水土保持、养分平衡等生态功能发挥着重要作用，具有很高的生态效益。

竹类的生殖周期长，很少开花结实，难以获得大规模繁殖的种子。而传统的移竹、埋鞭、竹枝扦插等繁殖方法存在消耗种竹多、种苗运输不便、劳动强度大、繁殖系数低等问题。采用组织培养的方法效率高，条件可控，生长快，周期短，重复性强，可进行周年试验或生产等优点，可以快速繁殖苗，适合竹子的工厂化育苗。

迄今为止，国内外竹子组织培养工作取得了很大的进展，但还是存在着许多的问题，培养基类型和植物生长调节物质的组合就是关键问题。培养基是组织培养中最重要的基质，选择合适的培养基对培养成功与否关系很大。目前适合不同外植体组织培养的基础培养基多达数十种，人们针对不同外植体材料的生物学特性和培养目的，设计建立了各种类型的培养基，目前常用的类型有MS、N6、sH、ws等培养基，这些培养基均是在植物组织培养发展过程中，根据人们的认识和培养的需要，不断改进产生的。大量研究表明，竹子组织培养较为适用的培养基主要为MS培养基或改良MS培养基。植物生长调节剂对植物组织培养的诱导与分化过程具有重要作用。用于组织培养诱导阶段诱导与分化的植物生长调节物质通常为细胞分裂素和生长素，细胞分裂素促进细胞分裂与分化，延迟组织衰老，促进侧芽生长，常用的有6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)和KT(6-糠氨基嘌呤)；生长素主要诱导愈伤组织的形成，体细胞胚的发生及试管苗的生根，常用的有2，4-D(2，4-二氯苯基乙酸)、NAA(萘乙酸)和IBA(吲哚丁酸)等。同一种植物生长调节物质的不同浓度及不同植物生长调节物质间的配比对植物的诱导与分化会产生重要影响，提高细胞分裂素的浓度有利于芽的诱导，提高生长素的浓度有利于组织和器官的生长。因此，探索细胞分裂素和生长素的优选组合，保证试管苗既有较高的增殖率又有较好的长势，对于提高种苗质量和实现工厂化生产具有很重要的意义。

目前国内对小蓬竹研究最多的是小蓬竹的群落结构、多样性、水土保持功能、土壤种子库、叶面积指数以及其栽培技术研究应用等领域，而在组织培养方面的研究还是空白。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种小蓬竹组织培养的培养基组合物及其应用，以克服小蓬竹繁殖困难，诱导难的问题。

上述目的可通过如下措施实现：

本发明的小蓬竹组织培养的培养基组合物，是由基本培养基MS、诱导培养基、琼脂和蔗糖配制而成，所指诱导培养基为细胞分裂素6-BA或6-BA与激动素KT的混合物，在每升的MS基本培养基中含细胞分裂素6-BA 1-5mg，或同时含细胞分裂素6-BA 1-5mg与激动素KT 0.5mg，含琼脂7g，含蔗糖30g；培养基组合物溶液pH值5.8。

试验证明，当所说培养基组合物在每升MS基本培养基中含细胞分裂素6-BA 3mg，含琼脂7g和含蔗糖30g；培养基组合物溶液pH值5.8时，小蓬竹组织培养的成活率最高。

同样试验证明，当所说培养基组合物在每升MS基本培养基中含细胞分裂素6-BA 2mg和激动素KT 0.5mg，含琼脂7g和含蔗糖30g；培养基组合物溶液pH值5.8时，小蓬竹组织培养的成活率也很好。

将所述的培养基组合物用于小蓬竹的组织培养，培养条件：温度25～27℃，光照时间12h/d，光照强度1200Lx。

本发明的有益效果是解决了小蓬竹繁殖困难，克服了传统的母竹移栽、竹鞭移栽等繁殖方法耗费资源、对生境破坏大、培植时间长、效率低、运输成本高等缺点，且不受季节的限制，为小蓬竹大面积的推广与利用，充分发挥其生态效益和经济效益提供了快速且充足供应的有效途径。

本发明所述的“MS培养基”是指Murashige和Skoog研制的培养基，其成分配方见表1。