[发明专利]一种低分子量淀粉样肽寡聚体的人工体外制备方法和用途

权利要求书

1.一种低分子量淀粉样肽寡聚体的人工体外制备方法，其特征是将Aβ多肽的单体用无水二甲基亚砜溶解后，于4℃置于缓冲体系中反应22～26小时，使其自然聚合形成寡聚体；所述缓冲体系组成是：NaCl 125mmol/L，KCl 3.3mmol/L，KH₂PO₄ 1.2mmol/L，NaHCO₃ 26mmol/L，CaCl2 2.5mmol/L，MgSO4 2.4mmol/L，葡萄糖5mmol/L，氨基酸0.3g/L。

2.权利要求1所述的方法，所述Aβ多肽的单体是用基因重组的方法得到淀粉样肽单体。

3.权利要求1所述的方法，反应时间为24小时。

4.权利要求1或2所述的方法，所得的寡聚体是在透射电镜下观察直径100nm以下的球形颗粒物，分子量为16～40kD。

5.一种基因重组制备Aβ多肽的单体的方法，在N端加组氨酸标签组6×His，C端加终止子序列TGA，构建Aβ42单体表达载体，在大肠杆菌表达体系内表达，用Ni柱纯化目的多肽；然后于室温下将Aβ42单体溶于冰预冷1～2h的六氟异丙醇，通过送风挥发，完全除去六氟异丙醇，形成肽膜。

6.一种人工脑脊液，其组成是：NaCl 125mmol/L，KCl 3.3mmol/L，KH₂PO₄ 1.2mmol/L，NaHCO₃ 26mmol/L，CaCl2 2.5mmol/L，MgSO4 2.4mmol/L，葡萄糖5mmol/L，氨基酸0.3g/L。

7.权利要求1所得到的低分子量淀粉样肽寡聚体在制备诊断、预防和治疗阿尔茨海默病的药物、试剂中的应用。

8.权利要求7所述的应用，其特征是将权利要求1所得到的低分子量淀粉样肽寡聚体作为标准品，分别利用酶联免疫吸附试验、Western blot实验、透射电镜或CD实验方法，分别制备检测阿尔茨海默病的试剂。