[发明专利]葛根素-7-O-葡萄糖醛酸苷及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种葛根素-7-O-葡萄糖醛酸苷及其制备方法和用途。属于生物及化学药物技术领域。

背景技术

葛根素(8-β-D-葡萄糖吡喃糖-7，4′-二羟基异黄酮)是从野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi的干燥根中提取分离得到的主要活性成分，葛根素在治疗动脉硬化、高血压、糖尿病以及代谢综合征中具有显著的药理作用，如抗血小板聚集、扩张血管、改善微循环、降低胆固醇、改善内皮功能、降低心率、降血压以及β受体阻滞和血管转换酶抑制样作用。临床上葛根素广泛地应用于心脑血管疾病的治疗，但是葛根素存在溶解性极差，口服生物利用度很低的问题。

研究表明，黄酮类化合物给药后，在体内主要以II相结合产物的形式存在，如葡萄糖醛酸结合产物、硫酸酯结合产物等。化合物在体内形成的结合产物与原型化合物比较，其水溶性增加，有利于其排泄。越来越多的研究表明，黄酮类化合物的部分结合产物其实还保留一定的活性，如槲皮素的代谢产物槲皮素-4′-O-葡萄糖醛酸苷、槲皮素-7-O-葡萄糖醛酸苷具有抗氧化活性，橙皮素的代谢产物橙皮素-5-O-葡萄糖醛酸苷和橙皮素-7-O-葡萄糖醛酸苷对细胞具有保护作用，黄芩素的代谢产物黄芩素-7-O-葡萄糖醛酸苷可抑制DU145细胞增殖。因此，这些化合物的结合代谢产物不仅是排泄形式之一，在体内也同样可发挥药理作用。经过研究后发现，葛根素在大鼠体内的主要代谢产物是葛根素-7-O-葡萄糖醛酸苷。

发明内容

本发明的第一个目的是为了提供一种葛根素-7-O-葡萄糖醛酸苷。

解决了葛根素溶解性极差，口服生物利用度很低的问题，并具有自由基清除活性的。

本发明的第二个目的是为了提供一种葛根素-7-O-葡萄糖醛酸苷的制备方法。

本发明的第三个目的是为了提供一种葛根素-7-O-葡萄糖醛酸苷的用途。

本发明的第一个目的可以通过以下技术方案达到：

葛根素-7-O-葡萄糖醛酸苷，其特征在于：其分子式为C₂₇H₂₈O₁₅，分子量为592.14，其化学结构式如下：

本发明的第二个目的可以通过以下技术方案达到：

2、葛根素-7-O-葡萄糖醛酸苷的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)收集大鼠尿液

将大鼠尾静脉注射葛根素后，置于代谢笼中，收集给药后24h的尿液，将该尿液在-15℃～-25℃温度下保存；

2)水浴旋蒸浓缩

将1)步保存的尿液解冻后，加入2倍体积的甲醇，涡旋混匀，13000rpm离心10min，取初步上清液在55～60℃温度下水浴旋蒸后浓缩，在取得的浓缩液中加入甲醇，然后经13000rpm离心10min，取上清液备用；

3)分离纯化

将2)步制得的上清液选择不同的流动相进行三次分离纯化，

第一次分离纯化：流动相为甲醇∶乙腈∶冰醋酸∶水＝20∶5∶0.5∶74.5，流速为2mL/min，收集16～20min流出液；收集的流出液在55～60℃温度下水浴旋蒸；

第二次分离纯化：将第一次分离纯化得到的物质用甲醇复溶(用甲醇再次制成液体)后进行第二次分离纯化，流动相为甲醇∶冰醋酸∶水＝20∶0.5∶79.5，流速为2mL/min，收集25～30min流出液；收集的液体在55～60℃温度下水浴旋蒸；

第三次分离纯化：将第二次分离纯化得到的液体用甲醇复溶(用甲醇再次制成液体)后进行第三次分离纯化，流动相为乙腈∶冰醋酸∶水＝20∶0.5∶79.5，流速为2mL/min，收集18～20min流出液；收集的液体在55～60℃温度下水浴旋蒸，得到分离纯化物；

4)制成葛根素-7-O-葡萄糖醛酸苷

将第3)制得的分离纯化物在25～35℃温度下经真空干燥，得到的白色粉末即为葛根素-7-O-葡萄糖醛酸苷。

本发明的第二个目的还可以通过以下技术方案达到：

本发明的一种实施方案是：3)步中所述的分离纯化采用半制备色谱进行。

本发明的一种实施方案是：使用液质联用仪监测制备时葛根素-7-O-葡萄糖醛酸苷的出峰时间，确定收集时间。

本发明的第三个目的可以通过以下技术方案达到：

葛根素-7-O-葡萄糖醛酸苷的用途，其特征在于：

1)用于清除2，2-联苯基-1-苦基肼基自由基的活性；

2)用于羟自由基羟自由基的活性。

本发明具有如下突出的有益效果：