[发明专利]一种比法卢定的制备方法

权利要求书

1.一种比法卢定(Bivalirudin)的制备方法，其特征在于，所述的方法包括步骤：

(1)将Fmoc-Asn(Trt)-Gly-OH和如式V所示的多肽树脂缩合，得到如式III所示的多肽树脂；

(2)将如式III所示的多肽树脂和去保护剂混合，除去Fmoc保护基；

(3)将Fmoc-Gly-Gly-Gly-Gly-OH和如式VI所示的多肽树脂缩合，得到如式IV所示的多肽树脂；

(4)通过固相合成的方法将氨基酸自C端向N端按照Pro至Arg至Pro至Phe的顺序依次同如式IV所示的多肽树脂上的多肽缩合，形成如式II所示的多肽树脂；和

(5)使式II所示多肽树脂上的多肽和树脂分离，得到如式I所示的比法卢定；

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的Fmoc-Asn(Trt)-Gly-OH通过下述步骤得到：

(i)将Z-Asn(Trt)-OH和H-Gly-OBzl.TosOH混合，进行液相多肽缩合，得到Z-Asn(Trt)-Gly-OBzl；

(ii)将Z-Asn(Trt)-Gly-OBzl进行氢化还原，得到H-Asn(Trt)-Gly-OH；和

(iii)将H-Asn(Trt)-Gly-OH和Fmoc保护基混合，得到Fmoc-Asn(Trt)-Gly-OH。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的Fmoc-Gly-Gly-Gly-Gly-OH通过下述步骤得到：

(a)将H-Gly-Gly-OBzl和Z-Gly-Gly-OH混合，进行液相多肽缩合，得到Z-Gly-Gly-Gly-Gly-OBzl；

(b)将Z-Gly-Gly-Gly-Gly-OBzl进行氢化还原，得到H-Gly-Gly-Gly-Gly-OH；和

(c)将H-Gly-Gly-Gly-Gly-OH和Fmoc保护基混合，得到Fmoc-Gly-Gly-Gly-Gly-OH。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的H-Gly-Gly-OBzl通过将Boc-Gly-OH和H-Gly-OBzl进行液相多肽缩合后脱保护基得到。

5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的Z-Gly-Gly-OH通过将Z-Gly-OH和H-Gly-OMe进行液相多肽缩合后还原得到。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述去保护剂以其总体积计，其中含有3-20％哌啶和0.5-10％二环脒(DBU)；优选，所述的去保护剂中还含有选自下述的一种或多种物质：0-20％1-羟基苯并三唑(HOBt)、0-8％3-羟基-1，2，3-苯并三嗪-4(3H)-酮(HOOBT)

7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中Arg同多肽树脂进行缩合时将Fmoc-Arg(Pbf)-OH和五氟苯酚以及缩合剂混合，使Fmoc-Arg(Pbf)-OH和树脂上的多肽进行缩合。

8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述缩合在选自下述的一种或多种缩合剂的存在下进行：N，N’-二异丙基碳二亚胺(DIC)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸(HATU)、O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N，N-四甲基脲四氟硼酸(TBTU)/N-甲基吗啉(NMM)或二异丙基乙胺(DIEA)、O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N，N-四甲基脲六氟磷酸(HBTU)/N-甲基吗啉(NMM)或二异丙基乙胺(DIEA)、(苯并三唑-1-基-氧)三吡咯烷鏻六氟磷酸(PyBOP)、1-羟基苯并三唑(HOBt)。

9.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的缩合用茚三酮显色法(Kaiser)监控。

10.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(5)在各物质配比为95-60三氟乙酸(TFA)∶5-10三异丙基硅烷(TIS)∶5-30水的切割剂存在下进行。