[发明专利]一种肉鸡抗性评价的新方法

说明书

技术领域

本发明涉及分子遗传学、免疫学和细胞生物学领域，具体涉及一种肉鸡抗性评价的方法。

背景技术

家禽各种疾病的发生是难以避免的，而且逐年呈上升趋势。现已有不少肉鸡抗性评价的方法，但都没有规范化、标准化，难以达成一致。最重要的是单一的指标不能全面的说明问题，况且不同人在不同时间在不同地点对不同群体用不同方法测定的一些抗性指标也难以比较，难以参考，从而很难下定结论，进一步影响了遗传育种工作的开展以及养禽业的发展。国内对规范肉鸡抗性指标测定操作流程方面的研究还未见有报道。现有的方法只是片面的、就单个抗病指标加以分析，缺乏全面性，我们通过查阅大量资料并加以一些相关的常规实验的验证，选取了6项主要的抗病指标，互补其长短，以期达到全面、准确的目的。

发明内容

本发明的目的是提供一种肉鸡抗性评价的新方法。

本发明的技术方案是：在选定的如皋鸡群体的0周龄到12周龄期间每隔两周龄的7个生长阶段中用尽可能常规的仪器分别测定所选定的6个主要的抗性指标，分别为：

(1)淋巴细胞转化率；

(2)单抗标记的CD4⁺、CD8⁺、T细胞数量，CD4⁺∶CD8⁺的比例；

(3)IgG和IgM；

(4)免疫细胞指数：胸腺、脾脏、法氏囊的绝对重量与鸡体重量；

(5)血液指标：每毫升血液里红细胞，白细胞总数、T细胞、B细胞总数；

(6)细胞因子指标：干扰素；

然后将上述6个指标进行综合评价，以综合评分作为判定样本抗性程度的依据。

我们使用尽可能常规的仪器和尽可能简便的方法，将现有的技术简化，尽可能做到简单易行且准确。根据我们的实验结果，对同群体，使用单一的或其中几个抗性指标进行评价时，会忽略一些对抗性有影响的因素的作用，从而得到的结果欠准确，而使用本发明的方法来进行抗性评价，会得到较单一或几个指标评价更加全面、准确的结果(具体数据说明见下表)。

本发明与现有技术相比，对肉鸡的抗性评价具有全面、准确的优点，有广阔的应用前景。我们对群体中的每个个体进行打分，汇总后得到一个平均分，来评价该群体。分数为10-7(包括7)时，说明具有高抗性；为7-4(包括4)时，说明具有中度抗性；在4以下时，说明具有低抗性。

附图说明：

图1：T淋巴细胞的转化

图2：CD4PE-A

图3：红细胞

图4：白细胞

具体实施方式

实施例1本发明选取的6个抗性指标的具体的测定方法：

1、淋巴细胞转化率的测定

取无菌肝素抗凝血0.1ml，加入1.8ml细胞培养液(用前调至含小牛血清10％、青霉素100u/ml、链霉素μg/ml，用NaHCO3调pH至7.2-7.4)中，同时加入PHA(用RPMIl 640基础培养液配成1000μg/ml)0.1ml，对照管不加PHA，将细胞置37℃、5％CO2培养3天，每天摇动1次。2500r/min，离心10min后弃上清液，留0.2ml沉淀细胞制片，迅速吹干。吉姆萨染色10-20min，水洗，干燥。由于大的细胞离心后居上层者较多，只吸上层细胞推片计数，结果易偏高。所以准确计数方法是在倒净上清后，残留与管壁的少量液体回流至管底后，用毛细滴管吹打将管内细胞打散，置1滴于玻片上，用毛细滴管前端刮片，均匀分布于全片，染色，按头、体、尾三段各1～2纵列(计数走向似城墙形)进行计数，以减少分布不均带来的误差，每片计数100～200个淋巴细胞。记录转化和未转化的淋巴细胞数，求出转化率。

表1-1：应用此方法测定的如皋鸡8周龄的淋巴细胞转化率