[发明专利]辅助鉴定具有高籽粒脂肪氧化酶活性性状小麦的方法及其专用引物

说明书

技术领域

本发明涉及辅助鉴定具有高籽粒脂肪氧化酶活性性状小麦的方法及其专用引物。

背景技术

面粉及其制品颜色是小麦品质遗传改良的重要内容。脂肪氧化酶(Lipoxygenase，LOX)活性是影响面制品颜色和加工品质的主要因素，在小麦制品加工和贮存期间引起面粉和面制品失色、变白。通过遗传育种途径提高小麦LOX活性，培育LOX活性高的小麦品种是小麦品质改良的重要目标。

研究人员已作过许多关于小麦LOX活性的遗传研究，Borrelli等(1999)研究表明，基因型、环境以及基因和环境互作对LOX活性均有显著的影响，但主要受遗传因素影响。Leenhardt等(2006)对一粒小麦、硬粒小麦和普通小麦籽粒中类胡萝卜素含量(叶黄素Lutein)和LOX活性进行了研究，发现在不同小麦类型中叶黄素含量依次显著降低，而普通小麦LOX活性分别是硬粒小麦和一粒小麦的3倍和7倍。

根据禾本科作物基因共线性原理，结合玉米和水稻中LOX活性相关基因的定位结果，Li等(1999)和Wang等(2008)推测控制小麦LOX活性的重要基因位于第4和第5同源染色体组上。目前，大量QTL定位结果也表明，普通小麦及硬粒小麦LOX活性基因位于第4和第5同源染色体组上，第4同源染色体尤为重要(Hart and Langston，1977；Carrera等，2007)。此外，1A、7B等其它染色体上也存在QTL(Trufanov等，2007)。硬粒小麦4B染色体长臂上存在效应较大的QTL(Hessle等，2002)，而Carrera等(2007)和Pshenichnikova等(2008)也将控制普通小麦LOX活性的位点定位于4BL上。此外，水稻、硬粒小麦等谷物作物的LOX基因研究要比小麦深入，基因全序列已被克隆。普通小麦LOX基因全序列未克隆，其LOX基因cDNA全序列已克隆，但迄今为止还未开发出可应用于小麦育种的LOX基因分子标记。

发明内容

本发明的目的是提供一种辅助鉴定具有高籽粒脂肪氧化酶活性性状小麦的方法及其专用引物。

本发明提供的辅助鉴定具有高籽粒脂肪氧化酶活性性状小麦的方法，包括如下步骤：以待测小麦的基因组DNA为模板，同时用引物对甲和引物对乙进行PCR扩增；如果得到235bp的DNA片段和117bp的DNA片段，待测小麦为候选的具有高籽粒脂肪氧化酶活性性状的小麦；如果没有得到235bp的DNA片段和117bp的DNA片段，待测小麦为候选的具有低籽粒脂肪氧化酶活性性状的小麦；所述高籽粒脂肪氧化酶活性性状为籽粒的脂肪氧化酶活性为75A₂₃₄min^-1g^-1以上；所述低籽粒脂肪氧化酶活性性状为籽粒的脂肪氧化酶活性为70A₂₃₄min^-1g^-1以下；所述引物对甲是序列表的序列1所示DNA和序列2所示DNA组成的引物对；所述引物对乙是序列表的序列3所示DNA和序列4所示DNA组成的引物对。

本发明提供的另一种辅助鉴定具有高籽粒脂肪氧化酶活性性状小麦的方法，包括如下步骤：包括如下步骤：以待测小麦的基因组DNA为模板，分别用引物对甲和引物对乙进行PCR扩增；如果用引物对甲得到235bp的DNA片段且用引物对乙得到117bp的DNA片段，待测小麦为候选的具有高籽粒脂肪氧化酶活性性状的小麦；如果用引物对甲没有得到235bp的DNA片段且用引物对乙没有得到117bp的DNA片段，待测小麦为候选的具有低籽粒脂肪氧化酶活性性状的小麦；所述高籽粒脂肪氧化酶活性性状为籽粒的脂肪氧化酶活性为75A₂₃₄min^-1g^-1以上；所述低籽粒脂肪氧化酶活性性状为籽粒的脂肪氧化酶活性为70A₂₃₄min^-1g^-1以下；所述引物对甲是序列表的序列1所示DNA和序列2所示DNA组成的引物对；所述引物对乙是序列表的序列3所示DNA和序列4所示DNA组成的引物对。