[发明专利]重组葡萄球菌蛋白A基因、含有该基因的表达载体及用途有效
| 申请号： | 201010110754.4 | 申请日： | 2010-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN102140476A | 公开（公告）日： | 2011-08-03 |
| 发明（设计）人： | 李德山;高学慧;任桂萍;王文飞;刘铭瑶 | 申请（专利权）人： | 哈尔滨市哈科隆生物制药研究所 |
| 主分类号： | C12N15/31 | 分类号： | C12N15/31;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C07K14/31;C07K1/14 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 孙皓晨;费碧华 |
| 地址： | 150009 黑龙江省哈尔滨*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 葡萄球菌 蛋白 基因 含有 表达 载体 用途 | ||
【权利要求书】：
1.一种重组葡萄球菌蛋白A基因，其特征在于：其核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示。
2.权利要求1的重组葡萄球菌蛋白A基因所编码的蛋白质，其特征在于：其氨基酸序列为SEQ ID NO：2所示。
3.含有权利要求1所述重组葡萄球菌蛋白A基因的重组表达载体。
4.按照权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于：其为原核表达载体。
5.由权利要求3或4的重组表达载体所转化得到的重组菌株。
6.一种制备重组葡萄球菌蛋白A的方法，包括以下步骤：
构建含有权利要求1所述重组葡萄球菌蛋白A基因的重组表达质粒；培养用该重组表达质粒所转化的宿主细胞，得重组菌株；培养重组菌株，诱导重组蛋白的表达，分离并纯化所表达的重组蛋白。
7.按照权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的重组蛋白的分离和纯化包括以下步骤：
(1)将收集的菌体用磷酸盐缓冲液悬浮，破碎后0-4℃低温离心收集上清，利用Ni亲和柱和AKTA蛋白纯化系统进行蛋白粗提纯；
(2)将粗提纯的蛋白再利用AKTA系统进行分子筛的纯化，即得。
8.权利要求2所述的蛋白质在纯化抗体中的应用。
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