[发明专利]微生物计数差值原理检测辐射处理食品方法

说明书

技术领域

本发明属于食品卫生检验领域，涉及用微生物差值的方法来检测辐射处理食品的技术。

背景技术

食品辐射处理保藏作为二十世纪50年代发展起来的一种食品保藏技术，已广泛应用于新鲜肉类及其制品、水产品及其制品、蛋及蛋制品、粮食、水果、蔬菜、调味料、草药、饲料等，达到杀菌、杀虫、抑制发芽、延迟后熟等目的，具有保持食品原有成分和风味，无药物残留、不污染环境、杀菌效果彻底、能对产品及包装食品进行加工处理、成本底、能耗少等优势。

目前，全世界已有42个国家和地区批准辐射处理农产品和食品240多种，年市场销售辐射处理食品的总量达30多万吨。辐射处理食品种类也逐年增加，截止2005年我国辐射处理食品种类已达7大类56个品种。7大类产品分别是辐射处理豆类、谷物及其制品；辐射处理干果果脯类；辐射处理熟畜禽肉类；辐射处理冷冻包装畜禽肉类；辐射处理香辛料类；辐射处理水果、蔬菜类；辐射处理水产品类。

国际辐射处理食品规定要求，经电离辐射处理食品的标签上，必须在紧靠食品名称处用文字指明该食品经辐射处理；配料中有辐射处理食品也必须在配料表中指明。我国标签法和食品辐射处理管理办法中也规定了辐射处理食品应有标识，但很难在我国市场上看到有标识的辐射处理食品，我国辐射处理食品的消费者接受性问题依然是阻碍辐射处理商品标识的主要原因。欧盟在对市场上销售的食品进行抽查的结果中检出没有标识的辐射处理冷冻水产品和调味品等，这应引起我国有关部门的注意，提防禁止辐射处理食品的国家以此或以没有标识为由设立新的技术壁垒。

目前，检测辐射处理食品的方法主要有气相色谱/质谱联用法、气相色谱法、高效液相色谱法、DNA裂解产物检测法、电子自旋共振光谱检测法、热释光分析法、激光成像检测法、超微弱发光法、光释光分析法等。微生物检测方法，具有较化学、物理分析方法更广泛的适用范围，并具有高通量的特点，对仪器设备要求不高，可以在不同硬件水平的实验室实施辐射处理食品的检验。目前，我国还没有公布此类方法标准。

发明内容

针对上述情况，本发明填补了国内辐射处理食品检测的空白，提供了一种应用微生物计数差值方法检测辐射处理剂量的方法，具体来讲就是，通过对显微镜荧光菌落计数和普通菌落计数相结合来检测辐射处理剂量的方法。该方法具有快速、准确，应用范围广的特点。

通过微生物计数差值方法检测食品辐射处理剂量的方法包括：检测样品的荧光染色；检测样品中显微镜荧光计数单位；检测样品中菌落总数；判定依据的建立。

微生物计数差值方法优势和特点：

该方法具有检测适用范围广、简便和高通量、硬件设备要求不高和能在辐射检测同时对样品微生物污染进行监控。

1.适用范围广

与化学法例如针对碳氢化合物的气相色谱检测法相比具有更广泛的适用范围。针对碳氢化合物的气相色谱检测法是以检测含有脂肪样品中脂肪酸结构在辐射后发生改变为基础的，因此，对含脂肪低或不含脂肪的样品将无法检测；又如针对2-十二烷基环丁酮的气相色谱-质谱检测法也是针对样品脂肪中的棕榈酸和硬脂酸进行检测，同样受到上述限制。而微生物计数差值方法则不受样品组分的影响，凡是加工食品在加工前都将或多或少受到微生物污染，这就具备了本方法实施的基本条件。

2.简便和高通量

本方法操作过程简单。每完成一份样品平均仅需5～10分钟，如使用多联抽滤装置更可使效率倍增。抽滤-制片-荧光计数、检测细菌总数两个平行过程均可同时或连续操作多份样品。

3.硬件配置要求

主要设备仅需抽滤装置和具落射荧光的显微镜即可，常规微生物实验室即可实施。

4.辐射检测同时对样品微生物污染进行监控

本方法的基础是微生物计数检测，而辐射处理的重要目的之一就是杀灭微生物，保持处理的产品卫生条件，延长保质期。而在进行辐射处理需评估初始微生物状态，以确定所需辐射的剂量，以及在处理后对处理效果进行必要的验证也需进行微生物检测，从而达到控制微生物污染的目的。本方法在检测的过程中采用了细菌总数的检测，从而使本方法既可以用来检测食品是否经过辐射处理，又可对产品微生物状况进行监测。

正如上文所述，本发明的方法适用范围广泛，经过实际检测，证明除可应用于调味品、中草药以外，还可用于肉制品、水产品和乳制品等其它食品的检测。

本发明是通过以下技术方案实现的：

1.试剂及培养基

分析过程中仅可采用分析纯试剂。使用的所有试剂须经0.2μm滤膜过滤或高压灭菌无菌处理。

(1)蛋白胨盐水稀释液

a.成分