[发明专利]微生物计数差值原理检测辐射处理食品方法

权利要求书

1.一种应用微生物计数法(计数荧光单位N₁、计数细菌总数N₂)检测辐射处理食品的筛选方法，原理为：将由计数荧光单位得到的数值与计数细菌总数方法进行差值计算。如果二者的差值大于某一限值，则表明样品可能经过辐射处理处理。

2.权力1所述的方法包括以下四个主要过程：

(1)以具落射荧光的显微镜计数荧光单位(n₁)，取lg值得N₁；

(2)以标准细菌总数计数方法计数样品中活菌数(n₂)，取lg值得N₂；

(3)计算差值N₃＝N₁-N₂。

(4)将N₃与临界限量值(L)比较进行判定，若N₃＞L，初筛阳性；若N₃＜L，初筛阴性。

3.权力1-2所述荧光单位检测所应用的荧光染色剂为吖啶橙。

4.权力1-2所述荧光单位检测所应用的荧光为蓝光，波长为450nm至490nm。

5.权力1-4所述的荧光单位检测计数范围包括在波长为450nm至490nm蓝光激发下发橙色至橙黄色荧光的微生物单位。

6.权力1-2所述荧光单位检测所采用的滤膜可以是叠放的双层滤膜(上层滤膜直径25mm孔径10μm，下层滤膜直径25mm孔径0.6μm聚碳酸酯膜。

7.权力1-2所述细菌总数检测方法可以是任何一种细菌总数的标准检测方法，培养条件是30℃±1℃培养72h。

8.权力1-2所述方法的计算公式是具有以下关系的因子：

9.权力1-7所述的检测方法采用的临界限量值(L)为3.0。

10.权力1-7和权力8所述的计算中，检测所得荧光计数单位及细菌总数计数单位数值取lg值后进行差值相减得出N₃值。

11.权力1-10所述的方法过程是通过以下步骤实现的：

(1)以1；10比例制备样品悬液，无菌过滤，收集滤液。

(2)将一定体积的样品悬液通过滤膜减压过滤收集微生物。以吖啶橙荧光染色微生物，荧光落射显微镜计数得到N₁值。包括：

①在过滤器中先后叠放孔径0.6μm和10μm滤膜，真空过滤样液；

②移去上层10μm滤膜，加入吖啶橙溶液荧光染色2min。先后用PH3.0缓冲液和2-丙醇清洗滤膜；

③取下滤膜，晾干，制备N₁玻片；

④荧光显微镜镜检计数。

(3)样品N₂值测定

①倍比稀释样液后，倾注平板计数琼脂，30℃±1℃培养72h。

②计数。

(4)计算差值N₃＝N₁-N₂。

(5)判定结果。

12.权力1-11所述的方法检测的样品，可以是调味料(如：黑胡椒，白胡椒，肉桂，辣椒粉，蒜粉，姜粉，孜然等)、中草药(如：豆蔻、白芷、黄芪、甘草等)肉制品、乳品及水产品。