[发明专利]一种抗寄生虫的化合物及其制备方法有效
申请号: | 200910073124.1 | 申请日: | 2009-11-02 |
公开(公告)号: | CN101875679A | 公开(公告)日: | 2010-11-03 |
发明(设计)人: | 向文胜;王相晶;姜玲;王明;高爱丽 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
主分类号: | C07H19/01 | 分类号: | C07H19/01;C12P19/00;A61P33/00;A61P33/14;C12R1/465 |
代理公司: | 哈尔滨市哈科专利事务所有限责任公司 23101 | 代理人: | 崔东辉 |
地址: | 150030 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 寄生虫 化合物 及其 制备 方法 | ||
1.一种抗寄生虫的化合物,其特征在于:分子式为:C36H50O7;结构式为:
2.一种抗寄生虫的化合物的制备方法,其特征在于:步骤如下:
步骤一:培养基的制备:平板及斜面培养:培养基的组成(g/L):葡萄糖10,麦芽糖3,酵母抽提粉3,K2HPO4·3H2O 0.5,MgSO4·7H2O0.5,NaCl 0.5,KNO3 1,微量元素溶液5,pH 7.0~7.2,使用去离子水配制,微量元素溶液(g/L):MgSO4·7H2O 80,CaCO3 10,FeCl3 6,ZnSO4 2,MnSO4 2,CuSO4 0.5,CoCl2 0.4,用去离子水定容,置于28℃的培养箱中,相对湿度40~60%,培养9d;
步骤二:种子培养:种子培养基组成(g/L):葡萄糖5,麦芽糊精20,可溶性淀粉1,酵母膏10,牛肉膏1,酪蛋白胨1,pH 7.0~7.2,使用自来水配制;将成熟斜面上的孢子用灭菌后的接种铲挖块接种于种子培养摇瓶中(挖块大小约1×0.5cm),种子摇瓶装液量25ml/250ml,于28℃,250rpm旋转式摇床上培养48h;
步骤三:摇瓶发酵:发酵培养基组成(g/L):葡萄糖10,乳糖25,棉籽饼粉25,CaCO3 3;pH 7.0~7.2,使用自来水配制;将种子液按8%的移种量接入发酵摇瓶中,发酵摇瓶装液量为25ml/250ml三角烧瓶,于28℃,250rpm旋转式摇床上培养9d;
步骤四:分离和提纯化合物:发酵液经100~200目筛网过滤后,滤渣用甲醇提取,提取液浓缩至一定体积后用EtOAc萃取,将萃取夜浓缩后依次进行硅胶柱层析,RP-18柱层析所得到的化合物,得到无色的粉末状化合物。
步骤五:硅胶层析:其所用到的填料是200-300目的硅胶,流动相为石油醚∶乙酸乙酯=9∶1-5∶5(V/V)两种洗脱液混合进行梯度洗脱。其中RP-18柱层析使用混合溶剂,甲醇与水=80∶20-95∶5(V/V)的溶液进行梯度洗脱的。
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