[发明专利]一种用ACCα基因预示和鉴定鸡腹脂量的分子标记方法

权利要求书

1.一种用ACCα基因预示和鉴定鸡腹脂量的分子标记方法，其特征在于：

(1)、根据鸡ACCα基因序列设计一对引物，其中下游引物3’端最后一个碱基G为人 为设计碱基，不与基因组序列配对：

G2292AF：5’-TAG GTG GATGGTTGGGCT TGA-3’

G2292AR：5’-CCCCAT CCT CCA CCA CAT G-3’

(2)、利用该引物对鸡的基因组DNA进行PCR扩增；

(3)、利用限制性内切酶Mwo I消化扩增的PCR产物；

(4)、使用聚丙烯酰胺凝胶对PCR产物进行电泳分离，检测ACCα基因外显子19中1个 G→A的单碱基突异位点；

(5)、当鸡ACCα基因外显子19中多态性位点为碱基G时，会产生限制性内切酶Mwo I 的酶切位点GCTTATC/CAGC，Mwo I消化PCR产物后会产生2个片段165bp、21bp，将其命名 为GG基因型；该位点为碱基A时GCTTATCCAAC，则不存在Mwo I酶切位点，MwoI消化PCR产 物后产生1个片段186bp，将其命名为AA基因型；该位点为G/A杂合时，MwoI消化PCR产物 后会产生3个片段186bp、165bp、21bp，将其命名为AG基因型；

其中，用于分析多态性的位点选自鸡ACC α基因如下序列中第464位的G→A的碱基突变：

1    GATGACGTGT GGTCACTTGT AAGAGCCCCA GTACTCTGAC CATGCAGTTA GCTGAACCAA    

61   TGTGCAGGTT ATTTAGGTGG GCTCAGATTC CCATTTCCTA AAGCTTCATG GTTTGTGATT

121  TAAAATATGT GCCAGAGGAG ATTTAGATTG GATACCAGAA AGAATTTATT CAAAGGAGAG

181  GTAGTTAGGT GTTGTAACAG ACTGCCCAGG GAAGTGGTAG TATTCTGCTA CCTGGGAACA

241  TTTAAGAGAT GTGGACGTGG TGCGTAGGGA TGTGATTTAG CAGTGGACTT GTCATGTTAG

301  GTGGATGGTT GGGCTTGATG GTCCTGAAAG TCTTTTGCAA CCTAATTCCG TTCTATCTGT

361  TATTTCCTAG GTATCGCATC ACTATAGGTA ACAAGACCTG TGTGTTTGAA AAGGAAAATG

421  ATCCTTCTAT TCTGCGCTCA CCTTCGGCTG GGAAGCTTAT CCAGTATGTG GTGGAGGATG，

AA基因型个体的腹脂重和腹脂率极显著高于AG型和GG型个体的腹脂重和腹脂率。

2.根据权利要求1所述的一种用ACCα预示和鉴定鸡腹脂量的分子标记方法，其特征是： 鸡腹脂量是鸡的腹脂重和腹脂率。

3.根据权利要求1所述的一种用ACCα预示和鉴定鸡腹脂量的分子标记方法，其特征是： 所述的聚丙烯酰胺凝胶质量比浓度为14％。