[发明专利]蓝萼甲素的阿魏酸衍生物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及蓝萼甲素(GLA)衍生物，特别涉及蓝萼甲素的阿魏酸取代物。本发明还涉及所述蓝萼甲素的阿魏酸取代物的制备方法及其在治疗癌症中的应用。 

背景技术

唇形科香茶菜属植物。在亚洲东部和非洲西部广为分布，全世界约有150种，我国约有90种25个变种。其中约有30种民间作为药用，作为清热解毒、抗癌消炎、健脾、活血、杭菌药来使用。人们对该属植物的-菇类成分作了研究，已从中提取了百余种药类成分。经药理筛选发现许多二萜化合物具有细胞毒、抗肿瘤、杭炎活性作用。 

蓝萼香茶菜是唇形科香茶菜属植物，分布在我国的东北、华北，朝鲜.日本，原苏联远东地区，吉林省资源尤其丰富。蓝萼香茶菜具有健胃、清热解毒、活血、抗菌消炎和抗癌活性，用于胃炎、肝炎初起、感冒发热、乳腺炎、关节痛等疾病。现代研究发现全草对心血管有一定的作用，而其中的有效成分对血小板聚集及癌症有一定的影响。 

1981年许云龙等人从蓝萼香茶菜中提取出蓝萼甲素(glaucocalyxinA)和蓝萼乙素(glaucocalyxinB)，从光谱中推断蓝萼甲素具有香茶菜属二萜典型的巧一氧-16一贝壳杉烯(ent-15-oxo-l6-kaurene)骨架，而蓝萼乙素是蓝萼甲素的14一乙酰化物，把两者分别乙酰化，得到相同的乙酰化物，从而证实了两者的相互关系。随后赵全成也从吉林产蓝萼香茶菜中分得这两种二萜。 

1988年刘晨江等从北京地区产蓝萼香茶菜中分得甲素和乙素外，还分得蓝萼丙素(glaucocalyxinC)，结构为对映-7p，14a，15a-三羟基-16-贝壳杉-3-酮。Dongsa kimls，除了从中分出蓝萼甲素、蓝萼乙素和蓝萼丙素，还分出了两种新二萜glaucocalyxinD和glaucocalyxinE并列出了这五种化合物的结构红外紫外吸收值、最主要的1H一核磁共振、13C一核磁共振化学位移值及质谱数据值。 

金永日等从蓝萼香茶菜根中分得了蓝萼甲素，另外王先荣等从安徽产王枣子〔Isodonamethystoides(Benth)CyWuetHsuan〕中也分得蓝萼甲素。王慧芬等人用反相高效液相色谱法外标法对不同部位及不同采集期的蓝萼香茶菜中蓝萼甲素的含量进行了 测定，结果表明叶中蓝萼甲素远高于根、茎。不同采集期以7-8月份含量高，9月末含量下降。张元桐等也采用反相HPLC测定蓝萼甲素含量，测得蓝萼甲素含量为1.03％，平均回收率为99.2％。 

从蓝萼甲素体内外实验结果来看，其具有较强的抗肿瘤作用，且抗瘤谱较广，能抑制Lewis肺癌、5180实体型以及HCA实体型等实体瘤的生长，明显增加荷腹水型5180腹水型和荷HCA腹水型小鼠的生命延长率，其抗肿瘤作用的强弱呈剂量依赖性。 

科研人员用MTT法对从毛叶香茶菜叶中分离鉴定的14个已知对映-贝壳杉烯类二萜化合物进行了人早幼粒白血病细胞、人卵巢癌细胞和人肺癌细胞的抗癌活性研究，其中具有α-亚甲基环戊酮结构的化合物对上述3种肿瘤细胞株均表现出不同程度的抑制活性。从蓝萼香茶菜叶分离的化合物如蓝尊香茶菜甲素(GLA)和乙素(GLB)结构中具有α-亚甲基环戊酮，因而显示出较强的生物活性。 

对若干天然及化学修饰后的贝克杉烯类化合物进行了系统的体外抗肿瘤活性筛选及构效关系研究表明，应用化学手段破坏分子中α-亚甲基环戊酮结构单元，会显著降低贝克杉烯类化合物的抗肿瘤活性。 

由于蓝萼甲素为对映-贝壳杉烯类二萜化合物，其化合物极性小，易溶于氯仿等非极性溶剂，在水中不溶，因此不适合直接作为药物进行给药；蓝萼甲素体外具有明显的抗癌作用，但在体内需大剂量长时间用药才能产生药效。药物在体内消除很快，半衰期短，尚不能直接作为药物使用。 

发明内容

鉴于蓝萼甲素(GLA)特别是其α-亚甲基环戊酮结构对肿瘤细胞株活性具有良好的抑制作用，然而由于其极性小、半衰期短等特点，其不适于直接作为药物进行给药，故现在需要以蓝萼甲素(GLA)为先导化合物，通过对先导化合物的结构改造，来获得蓝萼甲素的衍生物，从而使其按照已知的代谢途径失活或不代谢，而由原形排出体外，从而提高药物的安全性，增加药效。 

本发明的目的之一在于提供具有对肿瘤细胞株良好的抑制作用的、结构改良的蓝萼甲素的阿魏酸取代物，从而解决GLA极性小、不易溶于水、半衰期短、在体内消除过快等缺陷，从而作为治疗癌症的药物使用。 

本发明的目的之二在于提供所述蓝萼甲素的阿魏酸取代物的制备方法，避免单纯的采用有机合成所带来的毒副作用较大的缺陷，并且避免单纯的采用原料提纯多带来的药效较 低、无法针对性治疗某一特定癌症的缺陷。