[发明专利]具有血管紧张素转移酶抑制活性的蜂花粉肽及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及生物制药技术或功能性食品加工 技术，特别是制备具有血管紧张素转移酶抑制活性蜂花粉肽的方法。

技术背景

目前，我国高血压患病率已上升到11.88％，患病人数估计已近1亿，每年 死于心血管疾病的人数达200万。因此，高血压病已成为一个十分严重的社会 公共卫生问题。我国临床常用的抗高血压药主要包括利尿药、肾上腺素受体阻 断药等。虽然这些药具有很好的降压效果，但都具有一定的副作用或不良反应。 由于来源于食品中的降血压肽具有降血压效果明显且对正常血压无影响、无副 作用等优点，已成为目前研究的热点。

血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂是降血压药物中发展最快的一种，ACE 在血压调节中扮演重要的角色。降压肽通过抑制血管紧张素I向血管紧张素II 转换以及阻止ACE降解缓激肽而起降血压的作用。目前已有多种化学合成肽类 药物，抑制ACE活性。这类合成降血压药物作用时间不长，停药后易引起“停 药综合症”会使血压反弹，而且，这类药物经肾脏排出易造成肾功能的损伤。 引发蛋白尿和白细胞减少等，严重威胁患者的生命安全。

来源于食物蛋白质的降压肽具有食用安全性高、无副作用，可以克服药物 治疗中出现的种种副作用，特别是其对高血压患者具有降血压作用，而对血压 正常的人无降压作用等优点，近来受到广泛重视。这些肽是经酶在温和条件下 水解获得，安全性高，同时它还有免疫调节等其他作用。因此，开发天然降血 压肽产品将成为非药物治疗中的重要组成部分。

目前已有研究发现胶原蛋白、酪蛋白等经胰蛋白酶水解后的产物具有ACE 抑制活性，并通过高压液相色谱分离、分析了部分有抑制活性的组分。这些研 究主要采用单一的胰蛋白酶，选择的原料多为动物蛋白质，且分离方法成本太 高，或者肽中灰分含量较高而影响其活性等，不适合大规模生产。

蜂花粉是蜜蜂采集植物的精细胞加上自身腺体分泌物、唾液和蜂蜜混合而 形成，是我国一种低附加值的蛋白资源，至今没有有效的开发利用。由于蜂花 粉较高的蛋白含量和较低的脂肪含量，因此，蜂花粉是用于酶解的很好的蛋白 资源，而且蜂花粉富含具有与降血压肽结构有关的支链氨基酸和芳香族氨基酸， 是酶解分离降血压肽的好原料。利用蛋白酶水解蜂花粉蛋白生产具有血管紧张 素转移酶抑制活性的肽国内外目前还未见报道。

发明目的

针对现有方法的不足，本发明利用来源广泛的可再生资源蜂花粉为原料， 分离提取蜂花粉中的蛋白质，利用多种蛋白酶，如：木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、 酸性蛋白酶、碱性蛋白酶等，单独或不同组合水解蜂花粉蛋白，水解产物经进 一步分离纯化，获得具有血管紧张素转移酶抑制活性的蜂花粉肽。

技术方案

本发明的目的可通过以下技术方案来实现：

将浓度为3～15％的蜂花粉蛋白溶液，用蛋白酶水解，水解的工艺条件为： 反应温度30～60℃、加酶量0.5～5％、pH值4～12、反应时间60～240分钟，搅拌 酶解。酶解后经2000Da～5000Da的超滤膜超滤，滤液经离子交换树脂脱盐，分 离产物再经过SephadexG-15～SephadexG-25凝胶层析分离获得具有血管紧张素 转移酶抑制活性的蜂花粉肽，经冷冻干燥即成干粉，可制成各种制剂。

本发明所具有的优点是：

1.提供了一种制备具有血管紧张素转移酶抑制活性的蜂花粉肽的新方法。 本发明制品具有生物学功能，对血管紧张素转移酶(ACE)具有极强的抑制活 性。同其他生物活性肽一样，具有直接、快速、主动、完整吸收的特点。特别 是对高血压等心血管疾病有疗效。本发明的制成品可作为保健食品、食品、食 品添加剂、药物增效剂、药品配方等，是一种适宜于工业化生产的方法。

2.工艺科学合理、简单易行。本发明工艺包括3个主要步骤，即：蜂花粉 分离蛋白的提取→蛋白质的酶解→层析分离，方法简单、有效。

3.原料来源广泛。本发明所选择的蜂花粉原料来源广泛，资源丰富，使本 发明具有较强的实用性。

实施例1