[发明专利]参麦注射液的化学成分的制备及其在治疗心脑血管疾病中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种应用于治疗心脑血管疾病的中药注射剂的新化合物和活性化学成分的制备方法及在治疗心血管疾病方面和质量控制方面的应用。

背景技术

参麦注射液(又称“参麦水针剂”，以下简称“参麦针”)是古方“生脉散”的衍变方，由红参和麦冬两种中药材经现代工艺提取加工而成，用于治疗气阴两虚型之休克、冠心病、病毒性心肌炎、慢性肺心病、粒细胞减少症，为国家中药保护品种，系基本急救药品。参麦针已有20余年的临床应用，但是其中的活性成分一直不是很清楚，目前的参麦针的质量标准只规定了人参(红参)里的三个人参皂甙Rb₁、Rg₁和Re的含量测定，而对处方中的另一味药材麦冬的有效成分根本没有体现，这对于药品生产中对麦冬部分的质量控制是非常不利的，从而对参麦注射液的质量控制也是相当不利的。

同时，市场上存在的大量的含麦冬中药制剂，比如生脉胶囊、益心口服液、心通口服液等，长期以来也一直缺乏对麦冬部分的有效质控方法，含麦冬中药制剂的质控方法也是有待解决的问题。

发明内容

本发明的目的是通过对参麦针的麦冬原液所含化学成分及其在抑制心肌细胞凋亡、促进血管内皮细胞一氧化氮(NO)释放、促进心肌细胞增殖和抑制2，2-偶氮二(2-脒基丙烷)二盐酸盐(简称AAPH)引起的氧化等药理活性测试的研究，确定其中用于治疗心脑血管疾病的有效成分，此研究可以用于拓展参麦针产品的质量控制指标以保证这个复方药物在生产中的质量，及参麦针的二次开发以提高心脑血管疾病的治疗效果。

本发明主要将参麦针的麦冬原液经大孔树脂吸附，以水和含乙醇水溶液洗脱，再经硅胶柱、反向硅胶柱(RP-18)、葡聚糖凝胶柱等层析分离，高效液相分离和结晶升华等方法得到9个化合物，分别为I(2-莰醇)、II(2-莰醇葡萄糖苷)、III(2-莰醇-O-芹糖(1-6)葡萄糖苷)、IV(2，5-莰二醇)、V(甲基麦冬二氢高异黄酮B)、VI(羟基甲基麦冬二氢高异黄酮B)、VIIa(2β-羟基甲基麦冬二氢高异黄酮A)、VIIb(2α-羟基甲基麦冬二氢高异黄酮A)、VIII(川麦冬皂苷A，Ophiopojaponin A)。

研究表明，这9个化合物分别或同时具有抑制心肌细胞凋亡、增加血管内皮细胞一氧化氮(NO)释放、促进心肌细胞增殖和抑制AAPH引起的氧化等功效。

本发明公开了上述9个活性化合物的制备方法，其中化合物VI、VIIa和VIIb经鉴定为全新化合物，化合物I和IV为首次从浙麦冬中分离得到，化合物II、III、V和VIII的制备方法与文献报道不同(化合物结构和化学名如下)。

本发明还公开了一种新的参麦注射液的质量控制方法。包括如下内容：对新化合物VI、VIIa和VIIb以及活性化合物V、VIII以及以及人参皂苷Rb₁进行定量控制，在一定的色谱条件下测试参麦注射液液相图谱，要求每1ml含Rb₁不得少于80μg/ml，含V不得少于1.5μg/ml，含VI不得少于0.8μg/ml，含VIIa不得少于0.7μg/ml，含VIIb不得少于0.7μg/ml，含VIII不得少于5μg/ml。

所述的一定的色谱条件，包括如下因素：色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(包括Agilent Zorbax C18)。流动相：A为50mmol/L的KH₂PO₄溶液，B为80％的乙腈水溶液，梯度洗脱程序如下：B的比例：0-5min，25％；5-50min，25％→64％；50-65min，64％；65-75min，64％→85％；75-90min，85％。检测波长为203nm。流速1ml/min。柱温为40℃。

应用本发明，我们将上述6个质控指标(新化合物VI、VIIa和VIIb以及活性化合物V、VIII以及以及人参皂苷Rb₁)的含量要求作为产品出厂检验的检验质控标准，将参麦注射液的新检测技术成功应用于参麦注射液的生产检验质量控制，由于新增加麦冬心血管活性有效成份作为质控指标，与传统质控技术比较，所得参麦注射液产品质量更为稳定可靠，初步解决了传统参麦注射液生产中对麦冬部分的质量控制不利的局面。

应用本发明的化合物VI、VIIa和VIIb，对于含麦冬中药制剂以及其他含VI、VIIa和VIIb的中药制剂的产品质量标准完善和产品质量提高也是显而易见的。

附图说明

图1、化合物I、II、VI和VIII对血管内皮细胞促进NO释放的作用