[发明专利]一种具有肿瘤靶向性的多肽及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医学技术领域，具体地说是一种具有肿瘤靶向性的多肽及其制备方法。

背景技术

肿瘤的攻克一直是生物医学界的焦点问题。近百年来已经发展形成了手术、放疗、化疗三大肿瘤临床治疗方法。这些治疗手段在一定程度上延长了患者的带瘤生存期，但它们在临床应用过程中除了切除和破坏肿瘤还损伤到正常组织的结构和功能，尤其是在全身使用化疗药物时，药物通过血液循环到达人体的各组织并对正常细胞也发挥杀伤作用，引起全身不良反应，严重影响治疗的最终效果。因此，新型肿瘤治疗手段的研发显得尤为重要。

随着人类基因组计划(HGP)的完成及人类癌症基因组解剖计划(CGAP)的深入开展，对肿瘤分子水平的认识得到很大的提高，肿瘤的形成主要是由于一些癌基因、抑癌基因的突变或控制细胞生长的基因如P53、RAS等发生了改变，如果这些发生改变的基因能够被我们纠正，那么肿瘤可以从根本上被抑制和逆转。肿瘤的基因治疗正是在这种理论下诞生的，并且它被认为是日后彻底治愈肿瘤疾病的有效方法。通过基因载体将目的基因或治疗性药物导入肿瘤细胞的特定位置是基因治疗发挥作用的前提条件。但癌症基因治疗的主要难题之一就是开发合适的载体进行全身治疗。目前临床试验中所用的载体一般有两类：病毒载体和非病毒载体，以腺病毒载体为代表的病毒类载体的表达率高于其他类型的载体，但这种载体存在的潜在安全性问题很难得到控制，包括产生野生型病毒损伤机体以及病毒DNA可能整合到染色体上引起遗传变异。病毒载体另一个突出的缺点是转导无靶向性，无法实现肿瘤的个体化靶向性治疗。与病毒载体相比，非病毒类载体的优势更明显。目前肿瘤基因治疗研究中涉及到的非病毒载体主要包括裸DNA、脂质体、脂质复合物、阳离子多聚物、受体介导的载体等。这类载体种类较多，并具有低毒安全的特点，因此非病毒载体被认为是比较有发展前途的，但它们同样存在着靶向性差和无靶向性的问题。可以看到，以往对于肿瘤基因治疗载体的研究工作主要集中在体外环境下如何提高载体的转导效率和安全性，很少注意其在体内靶向性的杀伤肿瘤的作用。而肿瘤是个体化疾病，肿瘤的产生存在组织特异性和个体差异，肿瘤基因治疗最终的目标是进行个体化治疗，因此，临床上理想的肿瘤基因治疗载体应当具备能靶向性运送治疗性物质进入肿瘤细胞，不影响正常细胞的生长，表达率高，同时安全无毒等特点。迄今为止国内外尚未报道过这种肿瘤靶向特异性基因治疗载体。尚未见受体介导的载体用于肿瘤的亲和特异性研究，用受体介导的载体进行乳腺癌细胞的亲和特异性的检测在国内外尚未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种新型的具有肿瘤靶向性的多肽，它不仅具备高转导率，无毒性，更重要的是它能携带目的基因或者抗肿瘤药物靶向性进入肿瘤细胞对其进行治疗和杀伤，同时对人体其它正常细胞无亲和性或毒性作用。本发明还提供了它的制备方法。

本发明的研究是建立在已有理论的和大量可靠的研究结果的基础上的。

1988著名的科学杂志“Cell”报道的缺陷病毒HIV-TAT蛋白及随后报道的单纯疱疹病毒VP22蛋白，其转导效率高于目前所有的基因治疗载体。进一步的研究表明HIV-TAT、VP22蛋白等蛋白能够穿过细胞膜进入细胞是因为在这些蛋白结构中包含了由几个或十几个氨基酸残基组成，并且富含精氨酸(Arginine)的肽链，称为蛋白转导域(protein-transduction domain，PTD)。PTD是通过某种受体介导的抗原-抗体的反应机制进入细胞内。随后对PTD的研究证实，它与各种大分子或生物活性治疗药物偶联后还可以携带原先不能进入细胞的物质穿过细胞膜并在细胞中表达，发挥其生物学效应。PTD是一类多肽类物质，它的发现为我们寻找特异性多肽肿瘤基因治疗靶向性载体提供了思路。另外，正如我们所知道的，由于癌基因或抑癌基因的突变或失活等原因，不同肿瘤细胞表面会表达特异性的受体物质，虽然对这些受体的了解尚有限，但这种现象的存在为我们寻找到肿瘤细胞靶向性多肽载体奠定了基础。如果能够通过一定的技术方法将与这些肿瘤特异性受体结合的多肽物质分离并分析其氨基酸结构与功能的关系，那么我们就很有可能找到并符合要求的针对不种肿瘤细胞的靶向性基因治疗载体。