[发明专利]米曲霉高效制备EGCG水解酶及生产EGC和没食子酸的方法无效
| 申请号： | 200710044314.1 | 申请日： | 2007-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN101134941A | 公开（公告）日： | 2008-03-05 |
| 发明（设计）人： | 洪枫;钟坤 | 申请（专利权）人： | 东华大学 |
| 主分类号： | C12N1/14 | 分类号： | C12N1/14;C12N9/14;C12P7/42;C12R1/69 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 | 代理人： | 黄志达;谢文凯 |
| 地址： | 201620上海市松*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 曲霉 高效 制备 egcg 水解 生产 egc 没食子酸 方法 | ||
1.一种高效诱导米曲霉制备EGCG水解酶的方法，包括下列步骤：
(1)将米曲霉种子培养基在25-30℃，100-250r/min条件下培养36小时；
(2)以4-10％接种量转接至含EGCG的发酵培养基中，在25-30℃，100-250r/min条件下培养48-120小时，过滤，离心得酶液。
2.根据权利要求1所述的一种诱导制备EGCG水解酶方法，其特征在于：所述的米曲霉是食品工业用安全菌种。
3.根据权利要求1所述的一种诱导制备EGCG水解酶方法，其特征在于：所述的EGCG原料采用不同的纯度。
4.根据权利要求1所述的一种诱导制备EGCG水解酶方法，其特征在于：所述的培养产酶过程是间歇式的、分批补料式或连续培养式。
5.一种利用EGCG水解酶生产EGC和没食子酸的方法，包括下列步骤：
(1)构建EGCG酶水解反应体系、酶液空白体系和底物空白体系；
(2)反应体系和空白体系在25-60℃，反应0-48小时或直至水解反应结束才停止；
(3)利用高效液相色谱和薄层层析分析底物和产物。
6.根据权利要求5所述的一种利用EGCG水解酶生产EGC和没食子酸的方法，其特征在于：所述的EGCG酶水解反应体系是EGCG底物、EGCG水解酶和pH3-7缓冲液体系，酶液空白体系是EGCG水解酶和pH3-7缓冲液体系，底物空白体系是EGCG底物和pH3-7缓冲液体系。
7.根据权利要求5所述的一种利用EGCG水解酶生产EGC和没食子酸的方法，其特征在于：所述的EGCG底物采用不同的纯度。
8.根据权利要求5所述的一种利用EGCG水解酶生产EGC和没食子酸的方法，其特征在于：所述的薄层层析分析是正相硅胶板分析或反相硅胶板分析。
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