[发明专利]代谢产物的发酵制备方法及编码sod基因的核苷酸序列

权利要求书

1．来自棒状菌的优选地是重组的DNA，其能在棒状微生物中复制，并至少含有编码sod基因的以SEQ ID NO：1代表的核苷酸序列。

2．权利要求1的能复制的DNA，其包括

(ⅰ)SEQ ID NO：1所示核苷酸序列，或

(ⅱ)至少一个在遗传密码简并区内相应于(ⅰ)序列的序列；

(ⅲ)至少一个与互补于序列(ⅰ)或(ⅱ)的序列杂交的序列，和任选地

(ⅳ)(ⅰ)中的有功能中性有义突变。

3．衍生自权利要求1或2中的核苷酸序列的蛋白质的氨基酸序列，以SEQ ID NO：2代表。

4．通过导入一或多个如权利要求1或2的可复制的DNA而转化的棒状微生物，尤其棒杆菌属。

5．穿梭载体pMM23，特征在于图1所提供的限制图谱，并保藏于E．coli中，保藏号DSM 12860。

6．一种提高棒状菌中超氧化物歧化酶活性的方法，其中sod基因，或编码其的核苷酸序列是扩增的，尤其是过表达的。

7．一种通过棒状菌发酵制备代谢产物，尤其L-赖氨酸的方法，其中所用细菌中sod基因或编码其的核苷酸序列是扩增的，尤其是过表达的。

8．权利要求7的方法，其中所用细菌中，所需代谢产物的生物合成途径中其它基因是扩增的。

9．权利要求7的方法，其中所用细菌中，降低所需代谢产物产生的代谢途径至少部分被关闭。

10．权利要求7～9的方法，其中使用已用质粒载体转化的菌株，且此质粒载体携带编码sod基因的核苷酸序列。

11．权利要求9的方法，其中使用的是用保藏于E.coli中保藏号DSM 12860的质粒载体pMM 23转化的细菌。

12．前述一或多项权利要求的方法，其中使用产生核苷酸，维生素和氨基酸的棒状菌。

13．前述一或多项权利要求的方法，其中使用的棒状菌产生L-赖氨酸。

14．如权利要求8产生核苷酸的方法，其中编码谷氨酰胺-PRPP-酰胺转移酶的purF基因是同时过表达的。

15．如权利要求8制备核苷酸的方法，其中编码氨甲酰合成酶的carAB基因是同时过表达的。

16．如权利要求8制备D-泛酸的方法，其中编码天冬氨酸脱羧酶的panD基因是同时过表达的。

17．如权利要求8制备L-赖氨酸的方法，其中编码二氢吡啶二羧酸合酶的dapA基因是同时过表达的。

18．如权利要求8制备L-赖氨酸的方法，其中促进S-(2-氨乙基)半胱氨酸抗性的DNA片段是同时扩增的。

19．前述一或多项权利要求的经发酵制备所需代谢产物的方法，其中进行以下步骤：

(a)发酵产生所需代谢产物的棒状菌，其中至少sod基因是扩增的，

(b)富集培养基或细菌细胞中的所需代谢产物，并

(c)分离所需产物。

20．权利要求19的经发酵制备L-氨基酸的方法，其中进行以下步骤：

(a)发酵产生所需代谢产物的棒状菌，其中至少sod基因是扩增的，

(b)富集培养基或细菌细胞中的所需代谢产物，并

(c)分离所需产物。

21．权利要求19的经发酵制备D-泛酸的方法，其中进行以下步骤：

(a)发酵产生D-泛酸的棒状菌，其中至少sod基因是扩增的，

(b)富集培养基或细菌细胞中的D-泛酸，并

(c)分离D-泛酸。

22．权利要求19，20或21的方法，任选地存在含氧化合物。

23．权利要求22的方法，其中含氧化合物是过氧化氢。