其构建方法包括：将sgRNA6(SEQ ID NO:6)、sgRNA12(SEQ ID NO:12)与Cas9质粒体外转录成mRNA，获得有活性的sgRNA6、sgRNA12和Cas9mRNA；构建Hspg2基因敲入的打靶载体；将有活性的sgRNA6、sgRNA12、Cas9mRNA和打靶载体显微注射入小鼠受精卵中，培育受精卵并进行传代鉴定，构建获得Hspg2基因敲入的小鼠动物模型。
本发明属于植物基因工程领域，具体公开了一种提高棉花耐旱和耐盐碱能力的sgRNA，该sgRNA的靶标序列由SEQ ID No.1所示的核苷酸序列组成。本发明还公开了该sgRNA在提高棉花耐旱和耐盐碱能力的用途。本发明sgRNA依据陆地棉和海岛棉所有GI同源基因的保守区域设计的，可单独或者同时编辑不同的GI基因，其基因编辑效率高；其次，与野生型植株相比，利用本发明sgRNA对单个Gigantea(GI)基因进行编辑所得的棉花突变体植株的耐旱、耐盐碱能力均获得显著提高；此外，利用本发明sgRNA沉默GI基因的表达对于提高棉花产量和提高棉花纤维品质具有重要意义。
本发明首先获得针对myostatin第二外显子的sgRNA识别区的DNA序列，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示；接着构建myostatin第二外显子的sgRNA表达结构，并将T7启动子插入sgRNA利用Cas9和sgRNA的体外转录载体获得Cas9mRNA和sgRNA，可用于生产敲除myostatin基因的动物。
本发明提出了一种靶向敲低GNAQ和GNA11基因的sgRNA组合、敲低方法及其应用；所述sgRNA组合包括GNAQ‑sgRNA和GNA11‑sgRNAs，GNAQ‑sgRNA的靶向序列如SEQ ID NO本发明利用CRISPR‑Cas9系统针对HEK293细胞设计了特异性强、脱靶率低的sgRNA，从而实现了GNAQ和GNA11基因的靶向突变，效果完整，为研究GNAQ和GNA11基因的功能及与其相关的肿瘤调控机制或通路的提供了理想的细胞模型
