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[发明专利] 一种山核桃嫁接过程中小RNA测序分析方法 -CN201610114601.4 在审
发明人：
郑炳松 ;徐栋斌 ;裘玲玲
- 专利权人：
浙江农林大学
申请日：
2016-03-01
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公布日：
2016-06-08
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主分类号：
C12Q1/68 文献下载
摘要： 本发明公开了一种山核桃嫁接过程中小RNA测序分析方法，包括如下步骤：材料准备、枝条嫁接、提取总RNA、miRNA 文库构建和小RNA Solexa测序分析。本发明一种山核桃嫁接过程中小RNA测序分析方法，通过对山核桃中三个小RNA文库的数据进行生物信息学分析能够确认21个保守miRNA 是属于13个miRNA 家族，而10个新miRNA 和8个潜在的新miRNA 是属于15个miRNA 家族。通过分析发现，保守miRNA 在山核桃嫁接过程中都具有明显的差异性，并且2/3都是下调的。同样利用qRT-PCR对14个miRNA 进行表达分析，发现表达的趋势与Solexa测序数据分析结果相吻合。另外还预测了保守miRNA 基因的89个靶基因和新的miRNA 基因的26个靶基因，对山核桃的嫁接理论知识有进一步指导作用，能更好的在山核桃高产、高效、生态和安全实践中指导生产。一种 山核桃 嫁接 过程 中小 rna 分析 方法
[发明专利] 一种同时过表达N个miRNA 的方法 -CN202110420254.9 有效
发明人：
洪哲源 ;武亮
- 专利权人：
海南浙江大学研究院
申请日：
2021-04-19
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公布日：
2023-06-23
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主分类号：
C12N15/84 文献下载
摘要： 本发明公开了一种同时过表达N个miRNA 的方法，属于生物技术领域。所述方法包括：S1、针对目标miRNA ，设计PCR引物，以基因组DNA为模板，PCR扩增获得包括编码目标miRNA 茎环结构以及茎环结构前端160～220bp序列和茎环结构后端160～220bp序列的前体序列片段；S2、将N个miRNA 的前体序列片段进行拼接，得到拼接序列；S3、将拼接序列插入到表达质粒的多克隆位点，得到过表达载体；S4、将过表达载体转入受体材料中，N个miRNA 同时过表达。本发明方法使得多个miRNA 得以同时正常表达，可对多个miRNA 同时进行功能研究，在实现miRNA 调控作物农艺性状研究中具有重要应用价值。一种 同时 表达 mirna 方法
