本发明属于转基因技术领域,具体地涉及一种Ifnar1基因敲除小鼠动物模型的构建方法和应用,所述方法包括使用CRISPR‑Cas9靶向敲除小鼠Ifnar1基因,包括以下步骤:选择小鼠Ifnar1基因的外显子2作为敲除区域,crRNA设计在外显子2两边的内含子中;合成针对Ifnar1基因的crRNA1,序列如SEQ ID N0.1所示;合成针对Ifnar1基因的crRNA2,序列如SEQ ID N0.2所示本发明利用CRISPR/Cas9系统能够快速高效的将目的Ifnar1基因大片段敲除,并且不留下外源基因片段。
本发明公开了一种I型干扰素受体(type I interferon alpha receptor,IFNAR1)基因敲除牛肾细胞系,是利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对牛肾细胞进行基因编辑,并经过单克隆挑选而得到经表型验证表明IFNAR1敲除的牛肾细胞系不表达IFNAR1且感染牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和3型牛副流感病毒(BPIV‑3)后,病毒滴度均可显著提高,从而可用于牛源病毒临床株的分离鉴定并提高病毒的增殖效率