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[发明专利]IFN-a2位点突变融合蛋白及其在制备抗呼吸道病毒免疫制剂中的应用-CN202310858597.2在审
发明人：杨正林;何涌泉;尹燚;张易;黄璐琳;王蜀强 -专利权人：四川省医学科学院·四川省人民医院
申请日： 2023-07-13 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： C07K14/56 文献下载
摘要：本发明公开了IFN‑a2位点突变融合蛋白及其在制备抗呼吸道病毒免疫制剂中的应用，属于生物工程及医学技术领域。所述IFN‑a2位点突变融合蛋白的氨基酸序列第82位突变为E。本发明提供的IFN‑a2位点突变融合蛋白，通过对IFN‑α2受体结合位点的序列改造，将IFN‑α2上一特异氨基酸位点突变为相应的IFN‑α4的氨基酸位点，并对IFN‑α2突变体进行抗病毒能力测定以及信号转导通路检测，发现相对于未突变的IFN‑α2，突变体具有更好的抗病毒能力，并且能有限降低病毒蛋白复制。
ifn a2 突变融合蛋白及其制备呼吸道病毒免疫制剂中的应用

[发明专利]一种猪β-干扰素抗菌肽IFN7及其应用-CN202310988273.0在审
发明人：汪忠艳;吴革华 -专利权人：广州爱保农生物科技有限公司
申请日： 2023-08-08 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C07K14/565 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪β‑干扰素抗菌肽IFN7，其氨基酸序列为YYLSILQYLK，抗菌肽IFN7的分子量为1303.56Da。实验证明，本发明抗菌肽IFN7对大肠杆菌、乙型链球菌能够产生了较强的抑制作用，可以用于制备治疗或预防由大肠杆菌、乙型链球菌引起疾病的药物、饲料添加剂，也可用于制备食品防腐剂。
种猪干扰素抗菌 ifn7 及其应用

[发明专利]一种重组猪α-干扰素的制备方法-CN202210798787.5在审
发明人：李倩文;李春艳;陈冠珠;曲卓婷;付文红;陈占省 -专利权人：郑州金大正生物科技有限公司;河南省巴饲福微生物技术研究院
申请日： 2022-07-06 - 公布日： 2023-08-01 - 主分类号： C07K14/56 文献下载
摘要：本发明提供一种重组猪α‑干扰素的制备方法，重组猪α‑干扰素的制备方法包括猪α‑干扰素真核表达载体的构建、重组酵母菌的诱导表达、发酵工艺和后续提取工艺。本发明具有培养成本低、产量高以及便于产物分离纯化等优点，通过酵母表达的α‑干扰素直接以有活性的干扰素的形式分泌在发酵液的上清液中，无需复杂的变复性等后续处理工艺，并且发酵液上清中杂蛋白含量低，易进行大规模的生产。
一种重组干扰素制备方法

[发明专利]一种原核表达猪α干扰素的制备方法-CN202210797756.8在审
发明人：李春艳;陈冠珠;李倩文;曲卓婷;申艳敏;付文红;陈占省 -专利权人：郑州金大正生物科技有限公司;河南省巴饲福微生物技术研究院
申请日： 2022-07-06 - 公布日： 2023-08-01 - 主分类号： C07K14/56 文献下载
摘要：本发明提供一种原核表达的重组猪α干扰素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1)、猪α‑干扰素基因poIFN‑α的优化；S2)、将猪α干扰素基因连接至原核表达载体pET‑28a上，以构建猪α‑干扰素基因poIFN‑α的原核重组表达质粒pET‑28a‑IFN‑α，S3)、将表达载体转化大肠杆菌，获得基因工程菌，基因工程菌用IPTG诱导，以实现诱导重组质粒pET‑28a‑IFN‑α原核表达；S4)、重组猪α干扰素包涵体的制备；S5)、重组猪α干扰素包涵体的溶解和复性。采用本发明方法制备的重组猪α干扰素纯度高、活性强、半衰期长。
一种表达干扰素制备方法

[发明专利]一种高效液相色谱制备高纯度重组人干扰素α2b的方法-CN202310109601.5在审
发明人：朱文瑾;李浛民;李浛君;陈平 -专利权人：宁波博睿瀚达生物科技有限公司
申请日： 2023-02-14 - 公布日： 2023-08-01 - 主分类号： C07K14/56 文献下载
摘要：本发明属于生物医药技术领域，涉及一种高效液相色谱制备高纯度重组人干扰素α2b的方法，包括以下步骤：重组人干扰素α2b的菌体破碎获得包涵体，洗涤包涵体，包涵体变性溶解得到变性溶解液，变性溶解液稀释复性得到复性液，复性液浓缩得到浓缩液，再经疏水作用层析分离和阴离子交换层析分离，得到高纯度重组人干扰素α2b。本发明通过依次组合的两步高效液相色谱柱精纯化方式有效并能快速去除重组人干扰素α2b的相关杂蛋白及干扰素的异构体和多聚体，快速提高生产力的同时，得到的重组人干扰素α2b纯度大、比活性高，内毒素小于0.25EU/1000万IU，保证了重组人干扰素α2b在临床上的疗效和使用安全。
一种高效色谱制备纯度重组干扰素方法

[发明专利]一种分离浓缩重组人干扰素α2b复性液的方法-CN202310109602.X在审
发明人：朱文瑾;李浛民;李浛君;陈平 -专利权人：宁波博睿瀚达生物科技有限公司
申请日： 2023-02-14 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： C07K14/56 文献下载
摘要：本发明属于生物医药技术领域，涉及一种分离浓缩重组人干扰素α2b复性液的方法，包括以下步骤：大肠杆菌表达的重组人干扰素α2b发酵液经过菌体收集、匀浆破菌获得包涵体，包涵体经洗涤、变性溶解及稀释复性，再进行浓缩，所述浓缩包括：吸附剂前处理；复性液前处理；往前处理后的吸附剂中加入pH为2～3的水匀浆，然后加入前处理后的复性剂，搅拌吸附5～50min，置于0～6℃下放置1～5h，收集沉淀，沉淀倒入布氏漏斗中，抽真空，采用洗脱液1洗脱，流出液不收集，然后用洗脱液2淋洗，收集流出液。本发明的浓缩方法可以快速达到浓缩目的，提高蛋白收率，还能有效去除复性沉淀、悬浮物、大分子粘稠的核糖核酸、疏水弱的杂蛋白等。
一种分离浓缩重组干扰素复性方法

[发明专利]鸭α干扰素及其突变体、制备方法和应用-CN202210479170.7有效
发明人：易咏竹;王朋;沈兴家;唐顺明;胡小元;魏珍珍;曾振 -专利权人：江苏科技大学
申请日： 2019-06-13 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C07K14/56 文献下载
摘要：本发明公开了鸭α干扰素及其突变体、制备方法和应用。本发明将鸭α干扰素进行优化并在其基础上进行氨基酸单位点突变、双位点突变和多位点突变，获得多个抗病毒活性提高的鸭α干扰素突变体。本发明还涉及所述鸭α干扰素突变体在制备预防或治疗鸭病毒性疾病的药物或试剂中的应用，属于鸭α干扰素突变体的制备及应用领域。本发明利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中表达的所述鸭α干扰素突变体的抗病毒活性大幅度提高,能够用于制备预防或治疗鸭病毒性疾病的药物或试剂,对鸭养殖业中具有重大威胁的病毒性传染病具有防御和抑制作用。
干扰素及其突变体制备方法应用

[发明专利]鸭α干扰素及其突变体、制备方法和应用-CN202210479211.2有效
发明人：易咏竹;王朋;沈兴家;唐顺明;胡小元;魏珍珍;曾振 -专利权人：江苏科技大学
申请日： 2019-06-13 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C07K14/56 文献下载
摘要：本发明公开了鸭α干扰素及其突变体、制备方法和应用。本发明将鸭α干扰素进行优化并在其基础上进行氨基酸单位点突变、双位点突变和多位点突变，获得多个抗病毒活性提高的鸭α干扰素突变体。本发明还涉及所述鸭α干扰素突变体在制备预防或治疗鸭病毒性疾病的药物或试剂中的应用，属于鸭α干扰素突变体的制备及应用领域。本发明利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中表达的所述鸭α干扰素突变体的抗病毒活性大幅度提高,能够用于制备预防或治疗鸭病毒性疾病的药物或试剂,对鸭养殖业中具有重大威胁的病毒性传染病具有防御和抑制作用。
干扰素及其突变体制备方法应用

[发明专利]鸭α干扰素及其突变体、制备方法和应用-CN202210479271.4有效
发明人：易咏竹;王朋;沈兴家;唐顺明;胡小元;魏珍珍;曾振 -专利权人：江苏科技大学
申请日： 2019-06-13 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C07K14/56 文献下载
摘要：本发明公开了鸭α干扰素及其突变体、制备方法和应用。本发明将鸭α干扰素进行优化并在其基础上进行氨基酸单位点突变、双位点突变和多位点突变，获得多个抗病毒活性提高的鸭α干扰素突变体。本发明还涉及所述鸭α干扰素突变体在制备预防或治疗鸭病毒性疾病的药物或试剂中的应用，属于鸭α干扰素突变体的制备及应用领域。本发明利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中表达的所述鸭α干扰素突变体的抗病毒活性大幅度提高,能够用于制备预防或治疗鸭病毒性疾病的药物或试剂,对鸭养殖业中具有重大威胁的病毒性传染病具有防御和抑制作用。
干扰素及其突变体制备方法应用

[发明专利]一种猪α干扰素的制备方法-CN202211614611.6在审
发明人：陈林;曹可佳;石艳丽;孔飒;聂思静;马瑞;徐慧敏;谨瑾;高佩;汤波;张学贤 -专利权人：兆丰华生物科技（南京）有限公司北京生物医药科技中心;北京科牧丰生物制药有限公司;兆丰华生物科技（南京）有限公司
申请日： 2022-12-15 - 公布日： 2023-07-04 - 主分类号： C07K14/56 文献下载
摘要：本发明提供一种制备猪α干扰素的方法，本发明涉及蛋白质工程领域，特别涉及一种猪α干扰素的制备方法，本发明通过构建猪α干扰素重组表达菌，诱导表达后，收集细菌，经过超声裂解后得到包涵体；包涵体经过变性、复性后获得猪α干扰素。本发明制备猪α干扰素的方法简单，成本低，易于工业化生产，猪α干扰素表达量高，包涵体处理过程中变性彻底，通过本发明中特殊的流控透析法复性蛋白得率高，且蛋白纯度高无需再做蛋白纯化。
种猪干扰素制备方法

[发明专利]纯化PEG修饰重组人干扰素β1b蛋白的方法-CN202310325840.4有效
发明人：杨云凯;马昱;刘明;周玉;韩凝;霍元子 -专利权人：北京生物制品研究所有限责任公司
申请日： 2023-03-30 - 公布日： 2023-06-27 - 主分类号： C07K14/565 文献下载
摘要：本发明涉及一种纯化PEG单修饰的干扰素β蛋白的方法，更具体而言，涉及一种纯化PEG单修饰的人干扰素β1b蛋白的方法，以及用该方法获得的蛋白纯化产品。所述方法能够实现PEG单修饰的β干扰素蛋白与游离PEG、未修饰的蛋白、多点修饰的蛋白及其他杂质的有效分离，从而获得纯度高、游离PEG残余量低、氰基硼氢化钠残余量低的PEG单修饰蛋白纯化产品。
纯化 peg 修饰重组干扰素蛋白方法

[发明专利]一种高效猪α干扰素制备方法及其应用-CN202310088104.1在审
发明人：方剑玉;张青娴;郎利敏;席燕燕;游一;李海利;徐彬;王克领;李绍钰 -专利权人：河南省农业科学院畜牧兽医研究所
申请日： 2023-02-08 - 公布日： 2023-06-02 - 主分类号： C07K14/56 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，特别涉及一种高效猪α干扰素制备方法及其应用。首次分析天然猪干扰素(porcineinterferonα,pIFN‑α)的基因序列，通过对猪天然干扰素进行基因突变获得高活性的突变猪干扰素基因序列，其核苷酸显示突变pIFN‑αs具有SEQNo.3所示的DNA序列。采用原核表达系统对突变的IFN‑αs进行表达和纯化，通过western‑blot实验结果表明该蛋白具有较好的特异性和反应性。在细胞上检测获得的重组突变pIFN‑αs对抑制猪水泡性口炎病毒、猪繁殖呼吸障碍综合征病毒和猪流行性腹泻病毒的抗病毒活性，结果证明重组突变pIFN‑αs的抗病毒活性提高了10‑20倍。
一种高效干扰素制备方法及其应用

[发明专利]一种重组鸽干扰素α及其表达工程菌株与制备方法-CN202310095939.X在审
发明人：钱晶;李丁;陈鹏举;汤正旭;刘雪;王建锟 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2023-02-10 - 公布日： 2023-05-23 - 主分类号： C07K14/56 文献下载
摘要：一种重组鸽干扰素α及其表达工程菌株与制备方法，涉及生物领域，通过将优化后的鸽干扰素α基因定向克隆至真核表达质粒pPIC9K中构建重组真核表达质粒转化至毕赤酵母X‑33感受态细胞中筛选表达工程菌株，对表达工程菌株进行甲醇诱导、上清收集、亲和层析纯化后获得重组鸽干扰素α。该重组鸽干扰素α产量达到45mg/L，抗病毒活性为3.16×106U/mL，比活性为6.77×106U/mg，其可刺激细胞提高ISG15、OAS、PKR、Mx基因的转录水平，具有显著的生物学活性，能提升鸽群天然免疫力和增强鸽群抗病能力。本发明的制备方法操作简单，成本低，适用于大规模生产。
一种重组干扰素及其表达工程菌株制备方法

[发明专利]一种干扰素α2b可溶性重组表达和分离纯化方法及其应用-CN202210630705.6在审
发明人：华子春;胡敏进 -专利权人：江苏靶标生物医药研究所有限公司
申请日： 2022-06-06 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： C07K14/56 文献下载
摘要：本发明公开了一种干扰素α2b可溶性重组表达和分离纯化方法及其应用，包括如下步骤：(1)PCR扩增目的基因；(2)将原核表达载体pET28a(+)和PCR合成的DNA片段均经NcoI和XhoI进行双酶切；(3)IFNα2b基因片段经PCR扩增和双酶切，与同样经双酶切的pET28a载体连接，转化到Top10感受态细胞中，菌落PCR筛选为阳性的菌落，进行质粒提取，并进行NcoI和XhoI双酶切鉴定，将测序正确的质粒，转化感受态细胞BL21(DE3)；挑取单克隆，制得表达干扰素α2b的工程菌株IFNα2b/BL21(DE3)。干扰素α2b表达菌株破菌后，经硫酸铵沉淀，四步离子交换和疏水层析、以及超滤等分离纯化。本发明表达和纯化的重组人干扰素具有良好的效率、回收率和活性，产品质量远高于国家药典规定的质量标准。
一种干扰素可溶性重组表达分离纯化方法及其应用

[发明专利]一种猪干扰素α17突变体重组蛋白的制备方法与应用-CN202210277827.1有效
发明人：方剑玉;李绍钰;王克领;白杰;席燕燕;徐引弟;李海利;郎利敏;张立宪;王改利 -专利权人：河南省农业科学院畜牧兽医研究所
申请日： 2022-03-21 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C07K14/56 文献下载
摘要：本发明提供一种猪干扰素α17突变体重组蛋白的制备方法与应用，该突变体重组蛋白是将SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中第66位由亮氨酸(L)突变为苯丙氨酸(F)，第102位由谷氨酸(E)突变为天冬氨酸(D)，并在氨基酸序列C端连接氨基酸序列“QDRLRKKE”。重组蛋白的制备方法包括：将上述猪干扰素α17突变体两端引入酶切位点后合成；将合成的片段和pVB220质粒进行酶切后纯化并用T4连接酶连接；转化DH5α感受态细胞，筛选阳性克隆，接种培养；将包涵重组表达质粒菌落进行温度诱导表达；培养结束后将菌液离心，收集菌体；将菌体进行超声破碎后，重悬浮包涵体，并进行分离纯化，即得。该重组蛋白应用于抗VSV或抗PRV药物或疫苗制备。
种猪干扰素 17 突变体重组蛋白制备方法应用

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