本发明提供了一种肝素酶突变体H1‑5及其编码基因、突变菌株和应用，属于基因工程技术领域。本发明提供的肝素酶突变体H1‑5，是在野生型肝素酶氨基酸序列SEQ ID NO:1的基础上进行了以下突变：S104C、A122G、K134M和L160P。本发明对来源于拉乌尔菌属(Raoultellasp.)的肝素酶基因采用CepPCR与MegawhopPCR结合的易错PCR技术进行随机突变，高通量筛选获得高酶活的肝素酶突变体。实验结果表明，重组表达的肝素酶突变体菌株的酶活为3718U/L以上，而野生型菌株酶活仅为1886U/L，本发明提供的肝素酶突变体比野生型肝素酶酶活提高了97.1％以上，具有较高的应用价值。
本发明提供了酸性蛋白酶Candidapepsin及其异源表达及纯化方法。所述的酸性蛋白酶Candidapepsin来源于热带假丝酵母，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，该酸性蛋白酶的酶活可高达268.2U/mL，比酶活达2086.7U/mg，远高于同类报道的酸性蛋白酶酶活；且本其水解效果优于商业木瓜蛋白酶及酸性蛋白酶。本发明还提供了所述的酸性蛋白酶Candidapepsin的异源表达及纯化方法，所述的方法大幅度提高了Candidapepsin蛋白酶的产量，产量可高达384.3mg/L，具有广阔的推广应用前景。
