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[发明专利]5-氟胞嘧啶衍生物、其制备方法及其在5-氟胞嘧啶免疫检测试剂中的应用-CN202010717261.0有效
发明人：张小可;封飒飒;成志鹏;张英 -专利权人：湖南苏阳医疗科技有限公司
申请日： 2020-07-23 - 公布日： 2021-07-13 - 主分类号： C07D403/12 文献下载
摘要：本发明获得了一种全新的5‑氟胞嘧啶衍生物，并使用该5‑氟胞嘧啶衍生物制备得到高免疫原性的5‑氟胞嘧啶人工抗原，进而免疫实验动物得到高效价的抗5‑氟胞嘧啶特异性抗体；同时，使用该5‑氟胞嘧啶衍生物制备得到5‑氟胞嘧啶酶标偶联物。含有上述抗5‑氟胞嘧啶特异性抗体与5‑氟胞嘧啶酶标偶联物的5‑氟胞嘧啶免疫检测试剂可以实现在全自动生化分析仪上对5‑氟胞嘧啶含量的自动化测定，可以高通量、快速化、精确地测定生物样本中5‑氟胞嘧啶的含量，且具有操作简便、灵敏度高、特异性强、结果准确等优点，有效降低5‑氟胞嘧啶检测成本，有利于临床广泛推广使用。
胞嘧啶衍生物制备方法及其免疫检测试剂中的应用

[发明专利]脱氨酶辅助的DNA中5-羧基胞嘧啶修饰单碱基分辨率定位分析方法-CN201910555569.7有效
发明人：袁必锋;李俏莹;冯钰锜 -专利权人：武汉大学
申请日： 2019-06-25 - 公布日： 2021-03-16 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明公开了一种脱氨酶辅助的DNA中5‑羧基胞嘧啶修饰单碱基分辨率定位分析方法。本发明使用胞嘧啶脱氨酶APOBEC3A蛋白对DNA中正常的胞嘧啶、5‑甲基胞嘧啶、5‑羟甲基胞嘧啶和5‑醛基胞嘧啶有效的脱氨基，对5‑羧基基胞嘧啶不脱氨基的策略，随后进行聚合酶链式反应扩增进而测序获得5‑羧基胞嘧啶的位点信息。该方法灵敏度高、选择性高、操作简便，且无需对DNA样品进行亚硫酸氢盐的处理，就可以直接获得DNA中5‑羧基胞嘧啶的单碱基分辨率定位。
脱氨酶辅助 dna 羧基胞嘧啶修饰碱基分辨率定位分析方法

[发明专利]一种利用哌啶水溶液检测DNA中5-醛基胞嘧啶和5-羟甲基胞嘧啶的方法-CN201310007487.1无效
发明人：周翔;毛伍祥;郭枫晚 -专利权人：武汉大学
申请日： 2013-01-09 - 公布日： 2013-04-24 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用哌啶水溶液检测DNA中5-醛基胞嘧啶和5-羟甲基胞嘧啶的方法。用哌啶特异性地与带荧光标记DNA中的5-醛基胞嘧啶反应，可以检测出5-醛基胞嘧啶；而通过高钌酸钾将DNA中的5-羟甲基胞嘧啶氧化成5-醛基胞嘧啶后哌啶处理，通过比较DNA聚丙烯酰胺变性胶中两个反应的DNA带可以得到5-羟甲基胞嘧啶的位置和个数。本方法可以快速、有效和灵敏地实现5-醛基胞嘧啶和5-羟甲基胞嘧啶的检测。
一种利用哌啶水溶液检测 dna 胞嘧啶甲基方法

[发明专利]胞嘧啶修饰的免亚硫酸氢盐的碱基分辨率鉴定-CN202210527768.9在审
发明人：宋春啸;刘艺斌 -专利权人：路德维格癌症研究院
申请日： 2019-01-08 - 公布日： 2022-10-14 - 主分类号： C12Q1/6827 文献下载
摘要：本申请涉及胞嘧啶修饰的免亚硫酸氢盐的碱基分辨率鉴定。本公开提供了用于在核酸序列中以免亚硫酸氢盐的方式鉴定5‑甲基胞嘧啶、5‑羟甲基胞嘧啶、5‑羧基胞嘧啶和5‑甲酰基胞嘧啶的位置的方法。
胞嘧啶修饰亚硫酸碱基分辨率鉴定

[发明专利]核苷类化合物在制备具有防醉、解酒功效的药物中的应用-CN202210322878.1在审
发明人：陈新平;韩梁;周静;刘菁菁;胡卓周;李响响 -专利权人：兰州大学
申请日： 2022-03-30 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： A61K31/7068 文献下载
摘要：本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种核苷类化合物在制备具有防醉、解酒功能的药品中的应用，所述的核苷类化合物具体为胞嘧啶核苷、胞嘧啶核苷酸和拉米夫定。实验结果显示，胞嘧啶核苷、胞嘧啶核苷酸和拉米夫定能显著延长翻正反射消失所需时长和缩短翻正反射恢复所需时长，即胞嘧啶核苷、胞嘧啶核苷酸和拉米夫定均具有预防醉酒和加快醒酒的作用，提供了胞嘧啶核苷、胞嘧啶核苷酸和拉米夫定的新用途
核苷化合物制备具有解酒功效药物中的应用

[发明专利]一种基于化学试剂单碱基分辨率检测RNA中5-醛基胞嘧啶的方法及其应用-CN201910651441.0在审
发明人：周翔;王雅芬;张雄 -专利权人：武汉大学
申请日： 2019-07-18 - 公布日： 2019-11-15 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明涉及表观遗传修饰碱基的化学标记与检测方法技术领域，具体涉及一种基于化学试剂单碱基分辨率检测RNA中5‑醛基胞嘧啶的方法及其应用。基于化学试剂单碱基分辨率检测RNA中5‑醛基胞嘧啶的方法为将吡啶硼烷与RNA中5‑醛基胞嘧啶进行反应，使5‑醛基胞嘧啶还原为二氢尿嘧啶，进行碱基互补配对，5‑醛基胞嘧啶被还原成二氢尿嘧啶后与腺嘌呤配对，从而实现5‑醛基胞嘧啶的位点检测。利用商业化化合物吡啶硼烷在特定条件下能将RNA中5‑醛基胞嘧啶还原为二氢尿嘧啶(DHU)，在碱基互补配对时，5‑醛基胞嘧啶与鸟嘌呤配对，而当其被还原成二氢尿嘧啶后，则与腺嘌呤配对，从而实现5‑醛基胞嘧啶的位点检测
胞嘧啶醛基尿嘧啶还原配对单碱基分辨率碱基互补配对化学试剂位点检测吡啶硼烷检测RNA 腺嘌呤化学标记遗传修饰鸟嘌呤碱基检测应用

[发明专利]脱氨酶介导的DNA中N4-CN202111409397.6在审
发明人：袁必锋;熊军;冯钰锜 -专利权人：武汉大学
申请日： 2021-11-25 - 公布日： 2022-03-04 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种脱氨酶介导的DNA中N4‑甲基胞嘧啶的单碱基分辨率定位分析方法，属于生物技术领域。本发明方法利用胞嘧啶脱氨酶A3A蛋白对DNA中正常的胞嘧啶和5‑甲基胞嘧啶进行脱氨基，随后在后续聚合酶链式反应扩增形成胸腺嘧啶，而目标分析物N4‑甲基胞嘧啶能够抵抗胞嘧啶脱氨酶A3A的脱氨作用，因此在随后的聚合酶链式反应中扩增为胞嘧啶。这样，只有N4‑甲基胞嘧啶修饰才能在最终的测序中被读为胞嘧啶。本发明方法选择性高，准确性好，无需对DNA样品进行亚硫酸氢盐的处理，可直接获得DNA中N4‑甲基胞嘧啶的单碱基分辨率图谱。
脱氨酶 dna base sup

[发明专利]冬虫夏草胞嘧啶脱氨酶、编码基因及其应用-CN201210536936.7有效
发明人：郑裕国;柳志强;吴晖;李邦良;许静;吴玲芳;许峰;薛亚平;袁水金;王鸿艳 -专利权人：浙江工业大学;杭州中美华东制药有限公司
申请日： 2012-12-10 - 公布日： 2013-04-17 - 主分类号： C12N9/78 文献下载
摘要：本发明涉及一个来自“百令”生产菌冬虫夏草中国被毛孢参与胞嘧啶出发合成代谢尿嘧啶或胸腺嘧啶出发合成代谢5-甲基胞嘧啶的酶，编码这个酶的基因及其应用，所述酶即为胞嘧啶脱氨酶，具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列90%以上同源性，其编码基因具有SEQ ID No.2所示的核苷酸序列90%以上同源性；本发明从原理上对胞嘧啶合成尿嘧啶和胸腺嘧啶合成5-甲基胞嘧啶的代谢途径进行了详细研究，包含本发明所提供的核苷酸序列的克隆DNA可以用来通过转导、转化、结合转移的方法转入工程菌中，通过调节尿嘧啶和5-甲基胞嘧啶生物合成基因的表达，赋予宿主尿嘧啶和5-甲基胞嘧啶的高表达性，为扩大尿嘧啶和5-甲基胞嘧啶的产量提供了有效途径，具有重大应用前景
冬虫夏草胞嘧啶脱氨酶编码基因及其应用

[发明专利]胞嘧啶修饰的免亚硫酸氢盐的碱基分辨率鉴定-CN201980011272.2在审
发明人：宋春啸;刘艺斌 -专利权人：路德维格癌症研究院
申请日： 2019-01-08 - 公布日： 2020-11-20 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本公开提供了用于在核酸序列中以免亚硫酸氢盐的方式鉴定5‑甲基胞嘧啶、5‑羟甲基胞嘧啶、5‑羧基胞嘧啶和5‑甲酰基胞嘧啶的位置的方法。
胞嘧啶修饰亚硫酸碱基分辨率鉴定

[发明专利]一种从微生物发酵液中分离纯化胞嘧啶的方法-CN201910663480.2有效
发明人：时铭;田锋 -专利权人：苏州华赛生物工程技术有限公司
申请日： 2019-07-23 - 公布日： 2022-12-16 - 主分类号： C07D239/47 文献下载
摘要：本发明属于生化分离技术领域，本发明公开了一种从微生物发酵液中分离纯化胞嘧啶的方法，包括如下步骤：（1）发酵液的预处理：胞嘧啶发酵液加热后经固液分离、超滤连续式处理得到预处理液；（2）胞嘧啶的粗提：将预处理液浓缩、结晶、过滤得到胞嘧啶粗品；（3）胞嘧啶的精制：胞嘧啶粗品用去离子水加热复溶、加入EDTA和活性炭、脱色、过滤、结晶、过滤、去离子水淋洗晶体、真空干燥得到含量98.5%以上的胞嘧啶成品。
一种微生物发酵分离纯化胞嘧啶方法

[发明专利]用于检测核苷酸修饰的方法-CN202180089870.9在审
发明人：尚卡尔·巴拉苏布拉马尼安;本·莫迪夏尔-史密斯;西德尼·贝克尔 -专利权人：蓝猫知识产权有限公司
申请日： 2021-11-09 - 公布日： 2023-09-01 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明提供了一种识别多核苷酸中经修饰的胞嘧啶残基的方法。该方法包括将多核苷酸内的5‑甲基胞嘧啶残基还原和脱氨基以及对多核苷酸进行测序的步骤，从而可以识别经修饰的胞嘧啶残基的位置。本发明还提供了一种识别多核苷酸中的5‑甲基胞嘧啶残基、5‑羧基胞嘧啶残基或核苷酸的方法。该方法包括用自由基引发剂处理多核苷酸。作为通过对经处理的多核苷酸的测序检测的残基诸如胸腺嘧啶，可以识别5‑甲基胞嘧啶残基、5‑羧基胞嘧啶残基或核苷酸的存在。还提供了将多核苷酸中的5‑甲基胞嘧啶残基转化为二氢胸腺嘧啶残基的方法，以及自由基引发剂将多核苷酸中的5‑甲基胞嘧啶残基转化为二氢胸腺嘧啶残基或将5‑羧基胞嘧啶残基转化为二氢尿嘧啶残基的用途。
用于检测核苷酸修饰方法

[发明专利]一种检测DNA中的5-甲基胞嘧啶的方法-CN201410033529.3有效
发明人：周翔;洪婷婷 -专利权人：武汉大学
申请日： 2014-01-24 - 公布日： 2014-05-14 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种检测DNA中5-甲基胞嘧啶方法，该方法以不对称PCR原理为基础运用含荧光基团的（脱氧鸟苷三磷酸）dGTP来检测DNA中的5甲基胞嘧啶。具体检测步骤如下：先用亚硫酸氢钠法处理含5甲基胞嘧啶的DNA，将DNA中的胞嘧啶转化为尿嘧啶，再通过不对称PCR可以得到大量目标DNA的互补链，这样与DNA中的胞嘧啶互补的是不带荧光的腺嘌呤，而与5甲基基胞嘧啶互补的是带荧光的再通过DNA凝胶电泳（PAGE）可以检测DNA中的5-甲基胞嘧啶。此后在492nm处激发可以对DNA中的5-甲基胞嘧啶进行荧光检测。
一种检测 dna 中的甲基胞嘧啶方法

[发明专利]一种化学衍生化方法及其在LC-MS法检测核酸修饰中的应用-CN201510018723.9有效
发明人：袁必锋;冯钰锜;唐阳 -专利权人：武汉大学
申请日： 2015-01-14 - 公布日： 2015-04-08 - 主分类号： G01N30/06 文献下载
摘要：本发明使用2-溴-1-(4-二甲氨基-苯基)-乙酮（BDAPE）对DNA中5-甲基胞嘧啶、5-羟甲基胞嘧啶、5-醛基胞嘧啶和5-羧基胞嘧啶的衍生化策略。该方法灵敏度高、选择性高、操作简便，且无需进行繁琐的样品前处理，就可以定量检测DNA中极低丰度的胞嘧啶修饰，可以应用在分析疾病与5-甲基胞嘧啶、5-羟甲基胞嘧啶、5-醛基胞嘧啶和5-羧基胞嘧啶相互关系的研究中
一种化学衍生方法及其 lc ms 检测核酸修饰中的应用

[发明专利]甲基化胞嘧啶的检测方法-CN200880103915.8有效
发明人：梶田昌裕;岡智子;山本宪明;酒井绫子;石原英干 -专利权人：希森美康株式会社
申请日： 2008-08-20 - 公布日： 2011-01-26 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明的甲基化胞嘧啶检测方法包括以下步骤：使寡核苷酸与标本DNA杂交的步骤，该寡核苷酸与标本DNA中含预期甲基化的胞嘧啶的区域杂交且在与上述胞嘧啶互补位置有脱碱基部位；氧化步骤，使氧化剂与上述步骤中生成的杂交标本DNA进行反应，当存在甲基化胞嘧啶时，氧化该甲基化胞嘧啶；以及检出被氧化的甲基化胞嘧啶的步骤。
甲基化胞嘧啶检测方法

[发明专利]一种人工改造脱氨酶辅助的DNA中5-羟甲基胞嘧啶修饰单碱基分辨率定位分析方法-CN202210304239.2在审
发明人：袁必锋;谢能彬 -专利权人：武汉大学
申请日： 2022-03-25 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： C12N9/78 文献下载
摘要：本发明公开了人工改造脱氨酶辅助的DNA中5‑羟甲基胞嘧啶修饰单碱基分辨率定位分析方法，属于生物技术领域。本发明利用人工改造的胞嘧啶脱氨酶eA3A‑1及eA3A‑2蛋白分别对DNA中不同序列特征的胞嘧啶和5‑甲基胞嘧啶有效的脱氨基，而其对不同序列特征的5‑羟甲基胞嘧啶不脱氨基的策略，随后进行聚合酶链式反应扩增进而测序获得5‑羟甲基胞嘧啶的位点信息。该方法灵敏度高、选择性高、操作简便，无需亚硫酸氢盐的处理，亦无须对5‑羟甲基胞嘧啶进行糖基化保护，就可以直接获得DNA中5‑羟甲基胞嘧啶的单碱基分辨率定位。
一种人工改造脱氨酶辅助 dna 甲基胞嘧啶修饰碱基分辨率定位分析方法

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