本发明提供了一种TEV蛋白酶突变体、基因、生物材料、制备方法、试剂或试剂盒和应用,涉及基因工程技术领域。该TEV蛋白酶突变体与具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相比,突变至少如下七个氨基酸残基:第17位由T突变为S;第56位由L突变为V;第68位由N突变为D;第77位由I突变为V;第135位由S突变为G;第219位由S突变为V;第233位由Q突变为H。该TEV蛋白酶突变体具有良好的酶活性、稳定性和特异性。上述TEV蛋白酶突变体的基因、生物材料、TEV蛋白酶突变体的制备方法或包含上述TEV蛋白酶突变体的试剂或试剂盒,以及上述技术方案的应用与TEV蛋白酶突变体基于相同的发明构思。
本发明公开了具有聚酯降解活性的酯酶突变体及其应用,酯酶突变体为下列之一:SEQ ID NO.3所示的酯酶A的氨基酸序列第177位的谷氨酸突变为谷氨酰胺;或第178位的天冬酰胺突变为丙氨酸;或第180位的丝氨酸突变为苏氨酸、亮氨酸、缬氨酸;或第181位的异亮氨酸突变为缬氨酸等;实验表明,本发明的酯酶突变体基因表达的蛋白能够正确折叠,在大肠杆菌系统能够大量纯化。同时本发明的酯酶突变体具有降解聚酯的功能,酯酶突变体基因表达的蛋白的热稳定性及催化效率与野生型酯酶相比显著增加。本发明的酯酶突变体在pH为4‑11范围内均具有降解聚酯的活性。本发明的酯酶突变体在37‑70℃具有活性且稳定。
本发明涉及木聚糖酶HoXyn11A的S95T‑S164T突变体、编码该突变体的多核苷酸、重组载体、重组菌、制备该突变体的方法及该突变体的用途。其中,通过对氨基酸序列为SEQ ID No.3的木聚糖酶进行S95T‑S164T突变,获得木聚糖酶HoXyn11A的S95T‑S164T突变体。与野生型的木聚糖酶HoXyn11A相比,木聚糖酶HoXyn11A的S95T‑S164T突变体在保持木糖降解活性的同时,表现出良好的热稳定性。
本发明公开了一种鱼源肽聚糖识别蛋白突变体、制备方法及其应用,属于分子生物学技术领域,所述突变体的序列如SEQ ID NO.1所示,所述突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供所述突变体的制备方法,所述突变体具有广谱的抗菌活性,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有较强的抑制作用。和野生型LcPGRP5蛋白相比,突变体蛋白抑制金黄色葡萄球菌的活性更强。
本发明提供耐久肠球菌素突变体及其应用,涉及食品领域。耐久肠球菌素突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:5所示。本发明还要求保护所述耐久肠球菌素突变体的编码基因、制备方法和应用。所述制备方法包括将携带有耐久肠球菌素突变体编码基因的载体导入宿主菌,诱导所述宿主菌表达耐久肠球菌素突变体。本发明耐久肠球菌素突变体I30A和V31A均具有较宽抑菌谱、较高活性和稳定性,制备方法简单,有望应用于食品级防腐剂领域。
本发明公开了一种羊α干扰素突变体及其制备方法和应用。本发明首先公开了一种羊α干扰素突变体,其氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示。本发明将所述羊α干扰素突变体第54位氨基酸由赖氨酸(K)突变成谷氨酰胺(Q)得到氨基酸序列为SEQ ID NO.5所示的突变体,其抗病毒活性明显提高。本发明进一步将氨基酸序列为SEQ ID NO.5所示突变体进行氨基酸单位点突变、双位点突变和多位点突变,获得多个抗病毒活性提高的羊α干扰素突变体。本发明利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中表达的所述羊α干扰素突变体的抗病毒活性大幅度提高。本发明提供的羊α干扰素突变体能够用于制备预防或治疗羊病毒性疾病的药物或试剂。
本发明公开了一种羊λ3干扰素突变体及其制备方法和应用。本发明首先公开了一种羊λ3干扰素突变体,其氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示。本发明将所述羊λ3干扰素突变体第58位氨基酸由丙氨酸突变成缬氨酸得到氨基酸序列为SEQ ID NO.5所示的突变体,其抗病毒活性明显提高。本发明进一步将氨基酸序列为SEQ ID NO.5所示突变体进行氨基酸单位点突变、双位点突变和多位点突变,获得多个抗病毒活性提高的羊λ3干扰素突变体。本发明利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中表达的所述羊λ3干扰素突变体的抗病毒活性大幅度提高。本发明提供的羊λ3干扰素突变体能够用于制备预防或治疗羊病毒性疾病的药物或试剂。