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- [发明专利]一种基于MSRE-qPCR检测HIV-1启动子甲基化的方法-CN202111330195.2在审
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王晓霞;李媛媛;贾怀杰
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兰州大学
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2021-11-11
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2023-05-12
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C12Q1/70
- 本发明建立了一种基于甲基化敏感性限制性内切酶-定量PCR(methylation‑sensitiverestrictionenzymes‑basedquantitativePCR,MSRE‑qPCR)检测HIV‑1启动子甲基化的方法,包括如下步骤:1)提取HIV‑1感染细胞的总DNA;2)使用甲基化敏感性限制性内切酶HpaⅡ对DNA进行酶切;3)酶切产物纯化回收;4)设计引物,以纯化的DNA为模板,进行qPCR检测;5)根据Ct值计算HpaⅡ敏感性,评价样品中HIV‑1启动子甲基化水平。本发明在甲基化敏感限制性内切酶的基础上,采用qPCR的方法,针对HIV‑1启动子5'‑LTR设计扩增引物,定量检测启动子的甲基化程度。这一方法能够有效量化被感染细胞中HIV‑1启动子的甲基化程度,且容易操作,耗时短,可在一定程度上缩短实验时间,节省人力、物力,将为探索病毒甲基化调控的分子机制,筛选潜在的甲基化调节药物提供技术支持。
- 一种基于msreqpcr检测hiv启动子甲基化方法
- [发明专利]结直肠癌相关的甲基化标志物以及用于检测结直肠癌的试剂盒-CN202011165628.9有效
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赵亚双;李大鹏;张磊;崔滨滨;黄浩;王帆
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哈尔滨医科大学
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2020-10-27
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2022-09-09
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C12Q1/6886
- 本发明公开了一种结直肠癌相关的甲基化标志物以及用于检测结直肠癌的试剂盒。所述的甲基化标志物为分布在ZNF304,LIFR及C20orf194基因上的10个CpG位点。本发明首次在血液和组织DNA中检测了C20orf194、ZNF304、LIFR基因的甲基化水平,并首次使用qMSP以及数字PCR和MethyLight相结合的检测方法,通过优化PCR引物和探针,优化反应体系和反应条件,成功建立了基于qMSP以及ddPCR技术检测人ZNF304、LIFR基因甲基化的检测方法,和已有的基于qPCR技术的人SEPT 9基因甲基化检测方法相比,本发明的检测方法具有更高的特异性。ddPCR方法通过计算甲基化阳性液滴数和甲基化阳性液滴及非甲基化阳性液滴的比值进而对结直肠癌患者ZNF304、LIFR基因甲基化进行定性和定量检测,从而实现对结直肠癌的辅助诊断。
- 直肠癌相关甲基化标志以及用于检测试剂盒
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