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[发明专利]基于双链环化的文库构建方法及其在测序中的应用-CN202110932761.0在审
发明人：胡玉刚;汪彪;郑文莉;吴强 -专利权人：纳昂达（南京）生物科技有限公司
申请日： 2021-08-13 - 公布日： 2021-12-03 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于双链环化的文库构建方法及其在测序中的应用。该文库构建方法包括：采用双链环化扩增引物对带有接头序列的文库进行PCR扩增，得到扩增产物，其中，双链环化扩增引物为一对带有RNA碱基的文库扩增引物；对扩增产物中的RNA碱基进行酶切，得到双链酶切产物，双链酶切产物的两端为凸出的互补结构；利用两端的凸出的互补结构，对双链酶切产物进行环化，得到带缺口的双链环化文库。该双链环化的文库构建方法，不受待环化片段碱基组成的影响实现环化，进而解决现有技术中MGI测序平台针对GC含量高低不同的文库产出数据有偏差的问题。
基于链环文库构建方法及其中的应用

[发明专利]一种超微量全长RNA测序文库的构建方法-CN202110936057.2在审
发明人：葛芹玉;施华娟;贾二腾;赵祥伟;刘芝余;白云飞 -专利权人：东南大学
申请日： 2021-08-16 - 公布日： 2021-12-14 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开超微量的全长总RNA测序文库的构建方法，包括以下步骤：1）对获得细胞或者亚细胞样本中的超微量的总RNA，进行cDNA文库的构建，获得包含rRNA序列信息的cDNA文库；2）对获得的cDNA文库进行无偏性扩增；3）根据相应物种的rRNA序列，设计sgRNA序列组合；4）将sgRNA序列组合配置的溶液与步骤扩增产生的cDNA文库进行混合，获得不包含rRNA信息的cDNA文库。本发明能够实现超微量的总RNA及全长建库，同时又能够在cDNA合成之后使用CRISPR/Cas9高效切割PCR扩增产生的含有rRNA的cDNA文库，从而避免RNA的降解；适用于超低起始量的转录组建库，且花费较低
一种微量全长 rna 序文构建方法

[发明专利]一种单细胞转录组及染色质可及性双组学测序文库构建方法及测序方法-CN202211237949.4在审
发明人：瞿昆;高绪远;刘柯 -专利权人：中国科学技术大学
申请日： 2022-10-10 - 公布日： 2022-12-16 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本申请公开了一种单细胞转录组和染色质可及性双组学单细胞测序文库的构建方法，其包括a)制备单细胞悬液；b)获取染色质开放位点，c)使用逆转录酶和逆转录引物对细胞的转录组进行逆转录反应，以获取单细胞的转录组信息；d)使用模板转换寡聚物(TSO)进行模板转换反应；e)后续编码；f)初始文库扩增，和g)制备测序用染色质开放位点文库以及转录组文库。本申请还公开了一种对单细胞转录组和染色质可及性双组学测序文库测序的方法，其包括将通过所述方法制备的染色质开放位点文库以及转录组文库分别进行测序。
一种单细胞转录染色质性双组学测序文构建方法

[发明专利]一种基于高通量测序技术检测拷贝数变异的文库构建方法-CN202211679381.1在审
发明人：刘增玮 -专利权人：苏州璞瑞卓越生物科技有限公司
申请日： 2022-12-26 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于高通量测序技术检测拷贝数变异的文库构建方法，涉及文库构建技术领域。该基于高通量测序技术检测拷贝数变异的文库构建方法包括以下步骤：待测样本的处理和模板的提取、使用内切酶对模板进行酶切、酶切完成后按接头Mix配制数据配制接头Mix、片段双选、文库扩增、PCR产物纯化、DNA文库质检以及文库测序。该基于高通量测序技术检测拷贝数变异的文库构建方法，可高效特异捕获全基因组SNP用于CNV分析，提高CNV检测类型和准确性；CNV检测方法与CNV‑Seq相比，可以检测CNV‑seq能够检测的非整倍体、重复
一种基于通量技术检测拷贝变异文库构建方法

[发明专利]一种利用多重荧光竞争性PCR检测拷贝数变异的方法-CN201810059593.7有效
发明人：肖君华;陈科 -专利权人：东华大学;上海翼和应用生物技术有限公司
申请日： 2018-01-22 - 公布日： 2022-01-11 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明利用多重荧光竞争性PCR对多个目标基因或位点进行拷贝数变异检测，以多重PCR取代人工合成或质粒构建进行内参文库构建。第一轮扩增构建文库后，将内参文库和检测文库混合，进行通用引物的第二轮扩增。利用检测文库和内参文库的目标基因或位点的荧光比值确定目标基因或位点的拷贝数。减少了竞争性PCR需要准确定量和稀释内参文库的过程，使多重荧光竞争性PCR替代了复杂的多重连接探针扩增。
一种利用多重荧光竞争性 pcr 检测拷贝变异方法

[发明专利]一种用于PacBio测序的文库构建方法-CN202110042549.7有效
发明人：张勇;贾行星;谭生军;蔡英傲;张雅琼 -专利权人：中国科学院动物研究所
申请日： 2021-01-13 - 公布日： 2022-05-17 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于PacBio测序的文库构建方法。本发明提供了一种PacBio测序文库构建方法，为将含有发卡结构的测序接头通过转座酶插入目标DNA分子，实现DNA环化，得到PacBio测序文库。本发明的实验证明，本发明的PacBio测序文库构建方法，通过有效选择反应缓冲液，使整个反应在从转座插入片段化到文库环化完成均在同一反应管中完成，尤其在低DNA用量的测序文库构建过程中有效地避免了常规片段化步骤后的纯化回收导致的DNA样品损失，提高了模板的利用率，减少了实验的复杂性和时间消耗，可以实现最快在2小时内完成PacBio测序文库的构建与回收。
一种用于 pacbio 文库构建方法

[发明专利]一种高通量测序文库构建的DNA转化效率的检测方法-CN201911380158.5有效
发明人：赵军;李韶妍;方楠;伍启熹;王建伟;刘倩;唐宇 -专利权人：北京优迅医学检验实验室有限公司
申请日： 2019-12-27 - 公布日： 2022-08-19 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明涉及高通量测序技术领域，具体涉及一种高通量测序文库构建的DNA转化效率的检测方法。本发明利用用于模拟真实样品末端情况的模拟DNA模板构建文库，利用毛细管电泳检测文库中DNA片段的分布情况，根据所述DNA片段分布情况分析两端连接接头的DNA片段在所述文库中所占比例，分析文库构建过程的DNA与传统的定量PCR方法相比，该方法具有操作简单、快速、可同时适用于多种测序平台的优势；同时，该方法具有较高的准确性，可更真实、全面地反映待评价的建库试剂或建库方法的DNA转化效率性能，对于文库构建试剂和方法的筛选以及提高文库构建的质量和效率具有重要意义
一种通量序文构建 dna 转化效率检测方法

[发明专利]杂交捕获效率评估模型、其构建方法及应用-CN201911425465.0有效
发明人：赵静波;王晓璐;李伟伟;方楠;伍启熹;王建伟;刘倩;唐宇 -专利权人：北京优迅医学检验实验室有限公司
申请日： 2019-12-31 - 公布日： 2022-07-12 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：其中，构建评估模型的方法包括：对多个已知捕获效率的杂交捕获文库中的非目标捕获序列的模板进行定量，得到多个定量结果；根据多个定量结果与多个杂交捕获文库的已知捕获效率，建立定量结果与杂交捕获效率之间的关系模型利用捕获后文库中非目标捕获序列的量来反向推导目标捕获序列的捕获效率的思想，建立已知捕获效率的杂交捕获文库中非目标捕获序列的模板量与测序获得的真实的目标捕获序列的捕获效率之间的关系模型，从而获得评估模型。该模型既可在捕获文库上机测序之前评估出该文库的捕获效率，也有助于研发文库杂交捕获相关试剂。
杂交捕获效率评估模型构建方法应用

[实用新型]基因测序文库制备装置及其限位部件-CN202221624150.6有效
发明人：洪志强;曹震廷;王兆松 -专利权人：上海思路迪生物医学科技有限公司
申请日： 2022-06-27 - 公布日： 2022-11-04 - 主分类号： C12M1/34 文献下载
摘要：本实用新型实施例提供一种基因测序文库制备装置及其限位部件，其中，所述限位部件适用于基因测序文库制备装置，包括：限位槽，开设于所述基因测序文库制备装置的主转盘，延伸方向绕着所述主转盘的旋转中心，且延伸方向的端部设置有限位挡边；限位块，容纳于所述限位槽，在所述主转盘的圆周方向上，与所述基因测序文库制备装置的固定结构相对固定，且随着所述主转盘的转动，能够相对于所述主转盘沿所述限位槽的延伸方向移动。本申请实施例所提供的基因测序文库制备装置及限位部件可以在实现全流程基因测序文库制备的基础上，提高基因测序文库制备装置的各个制备模组位置调整的安全性。
基因序文制备装置及其限位部件

[发明专利]一种抗羊口疮病毒双峰驼VHH重链单域抗体cDNA文库及其制备方法-CN201610288469.9在审
发明人：田宏;吴锦艳;林彤;陈妍;尚佑军;郑海学;张克山;刘湘涛 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2016-05-03 - 公布日： 2016-08-03 - 主分类号： C40B40/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种抗羊口疮病毒的双峰驼VHH重链单域抗体cDNA文库及其制备方法。其文库包含羊口疮疫苗免疫骆驼的抗原剂量、免疫程序和血清抗体效价，制备文库包括以下步骤：骆驼外周血淋巴细胞分离、总RNA提取及mRNA分离、纯化；CDSⅢ和SMART引物逆转录合成全长cDNA，设计两套扩增引物，采用同源重组的方法将扩增产物与pGADT7共转染酵母细胞Y187；构建骆驼抗羊口疮病毒的VHH基因cDNA文库；计算文库库容量；扩增cDNA文库进行质量评价。本发明针对羊口疮病毒构建的cDNA文库是一种具备病毒特异性、生物学活性好、结合抗原能力强、具有潜在中和功能的抗体文库，尤其是单域抗体之类的新型抗体，对于建立羊口疮病毒的临床诊断方法，研究病毒的感染机理具有极其重要的作用
一种口疮病毒双峰驼 vhh 重链单域抗体 cdna 文库及其制备方法

[发明专利]一种原核生物的酵母cDNA文库的构建方法-CN202310337919.9在审
发明人：张萍萍;赵仕兰;高可辉;肖云平 -专利权人：上海欧易生物医学科技有限公司
申请日： 2023-03-31 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C40B40/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种原核生物的酵母cDNA文库的构建方法，提取原核生物总RNA，使用逆转录引物进行逆转录合成cDNA；利用LD‑PCR对单链cDNA进行扩增获得双链cDNA，再使用DSN酶对双链cDNA进行均一化处理；再通过均一化后一轮扩增获得含有文库重组接头的cDNA，然后同源重组到文库载体，转化到大肠杆菌DH10B中进行文库保存和文库质粒提取，然后将文库质粒转化到相应的酵母菌株中制备成酵母cDNA文库。去除探针的非特异性导致的mRNA产物数据丢失；经过DSN酶处理后，mRNA来源的cDNA得以保留，而rRNA来源的cDNA被消化掉，从而可以构建成更高质量，mRNA完整性更好，unigene含量更高的原核生物酵母cDNA文库
一种生物酵母 cdna 文库构建方法

[发明专利]全基因组增强子筛选系统、筛选方法及应用-CN202310097328.9有效
发明人：张玉波;朱秀生;黄雷;黄其通;罗静;李清 -专利权人：中国农业科学院农业基因组研究所
申请日： 2023-02-10 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种全基因组增强子筛选系统，该系统包括MAE‑seq增强子筛选载体、待筛选片段构成的质粒文库、转染质粒文库并抽提gDNA进行PCR扩增后测序获得的input文库、转染质粒文库经荧光分选后再抽提gDNA并进行PCR扩增后测序获得的output文库以及可过滤掉output文库中假阳性数据的统计学过滤模型。由此，可以通过仅对待筛选的基因片段构建质粒文库、荧光分选、高通量测序及过滤模型过滤即可实现高效稳定的全基因组增强子筛选。本系统适用于适合物种，且不用构建转录组文库，通过荧光表达富集直观高效，还没有覆盖范围不均匀、过度分散且被测序偏差混淆的问题，是相对于现有技术STARR‑seq操作更便捷，成本更低，且稳定、高效的增强子筛选系统
基因组增强筛选系统方法应用

[发明专利]用于数字基因表达谱的标签及其使用方法-CN201010299248.4有效
发明人：章文蔚;张艳艳;田方;于竞;龚梅花 -专利权人：深圳华大基因科技有限公司;深圳华大基因研究院
申请日： 2010-09-21 - 公布日： 2012-04-11 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明基于目前illumina公司提供的Solexa Single End测序平台，针对数字基因表达谱文库(DGE)样品建库方法，设计了独特的标签序列(index1-12)，通过接头将标签嵌DGE文库的3’接头中，成功的建立了数字基因表达谱标签文库(DGE标签文库)的建库方法，适合任何真核生物RNA样品的DGE标签文库构建，并成功用于solexa测序，不仅增大了DGE样品的测序通量，而且降低了solexa
用于数字基因表达标签及其使用方法

[发明专利]用于多重核酸测序的标签及其使用方法-CN201110050238.1有效
发明人：刘琳;何毅敏 -专利权人：深圳华大基因科技有限公司;深圳华大基因研究院
申请日： 2011-03-03 - 公布日： 2012-09-05 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于多重核酸测序的标签及其使用方法，基于目前illumina公司提供的Illumina/Solexa测序平台，针对测序文库，特别是Illumina/Solexa测序样品建库方法，设计了不同长度的标签，特别是独特的梯度标签序列(index1-6)，通过接头将标签嵌入测序文库，特别是Illumina/Solexa测序文库的3’接头中，成功的建立了测序标签文库，特别是Illumina/Solexa测序标签文库的建库方法，适合任何生物的测序标签文库构建，并成功用于Illumina/Solexa测序，不仅增大了Illumina/Solexa测序样品的测序通量，而且降低了针对Illumina/Solexa测序测序的费用。
用于多重核酸标签及其使用方法

[发明专利]一种构建PacBio测序文库的方法-CN202080059481.7在审
发明人：张建光;张海满;张晓杰;施波;毛爱平 -专利权人：北京贝瑞和康生物技术有限公司
申请日： 2020-06-22 - 公布日： 2022-04-15 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明提供一种构建PacBio测序文库的方法，包括以下步骤：(1)获得目标双链DNA；(2)加入热稳定RNA连接酶将所述双链DNA的两个末端分别连接封闭成环，获得哑铃状DNA文库；(3)纯化所述哑铃状DNA文库；和(4)结合测序引物并加入DNA聚合酶，获得PacBio测序文库。
一种构建 pacbio 序文方法