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[发明专利]一种PEG介导胶孢炭疽病菌原生质体遗传转化的方法-CN201510876528.X有效
发明人：杜艳;刘邮洲;刘永锋 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2015-12-03 - 公布日： 2019-07-05 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开一种PEG介导胶孢炭疽病菌原生质体遗传转化的方法，通过胶孢炭疽病菌原生质体的制备、转化和转化子的筛选，将含有筛选标记的外源DNA片段转到胶孢炭疽病菌基因组中；本发明实现了胶孢炭疽病菌原生质体遗传转化
一种 peg 介导胶孢炭疽病菌原生质体遗传转化方法

[发明专利]苗期草莓炭疽病潜伏侵染及其用药的快速检测法-CN201810021523.2有效
发明人：张传清;胡小然;戴德江;吴鉴艳 -专利权人：浙江农林大学
申请日： 2018-01-10 - 公布日： 2021-11-23 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一种苗期草莓炭疽病的环介导等温扩增检测方法以及所用的环介导等温扩增引物；采用该方法能用于进行现场快速检测草莓种苗是否带菌。本发明还公开了一种检测抗QoI类杀菌剂G143A基因型草莓胶孢炭疽菌的LAMP检测方法及所用的LAMP引物；采用该方法能特异性检测出对QoI类杀菌剂高抗的草莓胶孢炭疽菌。
苗期草莓炭疽病潜伏侵染及其用药快速检测

[发明专利]一种利用根癌农杆菌转化高山被孢霉菌丝的方法-CN201810148096.4有效
发明人：陈海琴;陈卫;陈永泉;王顺贤;唐鑫;张灏 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-02-13 - 公布日： 2020-12-29 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用根癌农杆菌转化高山被孢霉菌丝的方法，属于生物工程技术领域。本发明采用高山被孢霉(Mortierella alpina)尿嘧啶营养缺陷型CCFM 501的液体菌丝作为共培养材料，通过带有尿嘧啶筛选标记载体的根癌农杆菌介导的遗传操作技术，成功得到多个转化子。本发明改进了根癌农杆菌介导高山被孢霉的转化方法，对根癌农杆菌介导高山被孢霉的基础理论研究及高山被孢霉高效的遗传改造有重大意义。
一种利用根癌农杆菌转化高山霉菌方法

[发明专利]一种检测胶孢炭疽菌的环介导等温扩增引物组合物及其应用-CN201510030095.6有效
发明人：郑小波;王帅帅;陆辰晨;田擎;张海峰;王源超 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2015-01-21 - 公布日： 2017-01-04 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测胶孢炭疽菌的环介导等温扩增引物组合物及其应用。以谷氨酰胺合成酶基因为靶标基因，设计并筛选出可用于LAMP检测胶孢炭疽菌的特异性强、灵敏度高的引物，由SEQ ID NO.2所示的正向外引物GS‑F3，SEQ ID NO.3所示的反向外引物GS‑B3，本发明引物组合物主要用于胶孢炭疽菌的快速检测，完成一次检测仅需2h。
一种检测炭疽环介导等温扩增引物组合及其应用

[发明专利]根癌农杆菌介导的黑孢块菌遗传转化方法-CN201410788066.1在审
发明人：汤亚杰;贾开志;徐阳华;张权 -专利权人：湖北工业大学
申请日： 2014-12-17 - 公布日： 2015-03-25 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了一种根癌农杆菌介导的黑孢块菌遗传转化方法，属于黑孢块菌的遗传转化领域。本发明根癌农杆菌介导的黑孢块菌遗传转化方法，包括以下步骤：(1)制备黑孢块菌孢子悬浮液；(2)将携带有目的基因的双元载体质粒转化根癌农杆菌，获得根癌农杆菌阳性转化子，制备菌液；(3)将步骤(2)制备的菌液与步骤(1)制备的黑孢块菌孢子悬浮液混合，共培养；(4)选择性培养，筛选黑孢块菌转化子，鉴定，即得。本发明方法以黑孢块菌的孢子为受体，以根癌农杆菌为介体，具有简单方便，转化效率高且稳定，转化子为单拷贝的频率高等优点，适用于黑孢块菌功能基因组学及生物学研究等。
根癌农杆菌块菌遗传转化方法

[发明专利]一种农杆菌介导的尖孢镰刀菌西瓜专化型菌株遗传转化方法-CN201410003576.3无效
发明人：张曼;羊杏平;徐锦华;刘广;姚协丰;李苹芳 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2014-01-06 - 公布日： 2014-04-30 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明提供一种农杆菌介导的尖孢镰刀菌西瓜专化型菌株遗传转化方法，包括以下步骤：（1）尖孢镰刀菌西瓜专化型菌株分生孢子悬浮液制备；（2）含有外源基因的农杆菌菌液制备；（3）尖孢镰刀菌西瓜专化型菌株的外源基因转化；（4）尖孢镰刀菌西瓜专化型菌株转化子的鉴定。本发明利用农杆菌介导的方法，将外源基因转入尖孢镰刀菌西瓜专化型菌株的基因组中，获得了尖孢镰刀菌西瓜专化型转基因菌株。该方法简单、快捷、重复性好、转化效率高，可用于尖孢镰刀菌西瓜专化型菌株突变体库构建、寄主抗性筛选、寄主对尖孢镰刀菌西瓜专化型菌株侵染的防卫反应、以及尖孢镰刀菌西瓜专化型菌株侵染及致病机理的研究。
一种杆菌镰刀西瓜专化型菌株遗传转化方法

[发明专利]一种PEG介导的尖孢镰刀菌芝麻专化型原生质体遗传转化的方法-CN201210538745.4有效
发明人：苗红梅;段迎辉;常淑娴;张海洋 -专利权人：河南省农业科学院
申请日： 2012-12-13 - 公布日： 2014-06-18 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了一种PEG介导的尖孢镰刀菌芝麻专化型原生质体遗传转化的方法，属于生物技术领域。本发明利用PEG介导的原生质体转化方法，通过尖孢镰刀菌芝麻专化型原生质体的制备和转化以及转化子的筛选，将含有筛选标记的外源DNA片段转化入尖孢镰刀菌芝麻专化型基因组中。本发明实现了PEG介导的尖孢镰刀菌芝麻专化型原生质体转化，建立了一套完整的遗传转化、筛选方法，获得大量高强度表达潮霉素抗性蛋白和绿色荧光蛋白且稳定遗传的转化菌株，转化效率可达7667个转化子/mg DNA
一种 peg 镰刀芝麻专化型原生质体遗传转化方法

[发明专利]农杆菌介导的尖孢镰刀菌芝麻专化型菌株遗传转化方法-CN201110412454.6无效
发明人：苗红梅;仇存璞;魏利斌;张海洋 -专利权人：河南省农业科学院
申请日： 2011-12-12 - 公布日： 2012-06-13 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明涉及一种农杆菌介导的尖孢镰刀菌芝麻专化型菌株遗传转化方法，包括以下步骤：(1)制备尖孢镰刀菌芝麻专化型菌株分生孢子悬浮液；(2)尖孢镰刀菌芝麻专化型菌株的T-DNA转化。本发明的方法以尖孢镰刀菌芝麻专化型病菌为转化体，利用农杆菌介导的方法，结合适宜的遗传转化受体系统，将外源T-DNA序列转入到尖孢镰刀菌芝麻专化型菌株基因组中，首次获得了尖孢镰刀菌芝麻专化型转基因菌株。该方法重复性好，转化效率高，用于今后的尖孢镰刀菌芝麻专化型突变体库构建；获得的菌株含有双标记基因，可用于芝麻枯萎病害机理分析，是芝麻枯萎病菌致病及芝麻抗病研究中的一个重要创新。
杆菌镰刀芝麻专化型菌株遗传转化方法

[发明专利]链格孢菌的发酵化合物在治疗炎性损伤类疾病中的应用-CN202310019292.2在审
发明人：杨献文;刘晨风;刘庆梅;邹正彪;谢明敏;张勇;谢春兰 -专利权人：自然资源部第三海洋研究所
申请日： 2023-01-06 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种链格孢菌(Alternariasp.Xiao20)及其发酵化合物在制备治疗炎性疾病药物中的应用。本发明的链格孢菌(Alternariasp.Xiao20)于2022年4月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO:M2022501；本发明的链格孢菌(Alternariasp.Xiao20)的发酵产物为苯酚类化合物，能够显著保护由脂多糖介导的急性肾损伤，明显降低T细胞介导的炎性损伤或过敏反应等。本发明提供的链格孢菌(Alternariasp.Xiao20)发酵化合物对我国海洋药物开发具有重要意义。
链格孢菌发酵化合物治疗损伤疾病中的应用

[发明专利]可视化绿豆叶斑病病菌环介导等温扩增检测方法-CN202111129093.4在审
发明人：刘铜;刘震 -专利权人：海南大学
申请日： 2021-09-26 - 公布日： 2021-12-14 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明提供了可视化绿豆叶斑病病菌环介导等温扩增检测方法，根据变灰尾孢菌细胞色素b的特异性DNA区域设计环介导等温扩增引物，并优化等温扩增体系和扩增反应程序，建立了一种特异、快速、灵敏度高且可视化的变灰尾孢菌分子检测方法
可视化绿豆叶斑病病菌环介导等温扩增检测方法

[发明专利]鹰嘴豆壳二孢叶枯病环介导等温扩增快速检测方法-CN201310186323.X有效
发明人：马德英;马丽娟;羌松 -专利权人：新疆农业大学
申请日： 2013-05-20 - 公布日： 2013-07-24 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种鹰嘴豆壳二孢叶枯病环介导等温扩增快速检测方法，该方法包括真菌DNA的提取、真菌的环介导等温扩增、显示检测步骤完成，以克服现有技术所需周期长、操作复杂等问题，该方法优点是快速、特异性强、灵敏度高，且成本低，可用于田间鹰嘴豆壳二孢叶枯病的早期诊断和病菌的监测和鉴定。
鹰嘴豆壳二孢叶枯病环介导等温扩增快速检测方法

[发明专利]一种通过同源重组敲除ura5基因的高山被孢霉尿嘧啶营养缺陷型及其构建方法-CN201310347934.8有效
发明人：陈卫;郝光飞;陈永泉;陈海琴;黄小云;杜凯;赵山山;张灏 -专利权人：江南大学
申请日： 2013-08-09 - 公布日： 2013-12-25 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明涉及一种高山被孢霉（Mortierella alpinaATCC32222）的尿嘧啶营养缺陷型菌株及其构建方法。本发明采用高山被孢霉ATCC32222为材料，运用根癌农杆菌介导的遗传操作技术进基因敲除，得到一株高山被孢霉尿嘧啶营养缺陷型，对产油真菌高山被孢霉ATCC32222的基础理论研究及产品开发具有重要的意义
一种通过同源重组 ura5 基因高山被孢霉尿嘧啶营养缺陷及其构建方法

[发明专利]利用otef启动子进行球孢白僵菌遗传转化方法-CN201410353303.1有效
发明人：李启云;徐文静;路杨;张佳诗;张正坤;郑岩;杜茜;隋丽;任金平;田志来 -专利权人：吉林省农业科学院
申请日： 2014-07-23 - 公布日： 2014-11-05 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用otef启动子进行球孢白僵菌遗传转化方法，包括以下步骤：1)otef:GFP质粒载体的构建；2)球孢白僵菌DNA提取；3)球孢白僵菌原生质体的制备；4)PEG介导的遗传转化；5)PCR应用来otef启动子进行球孢白僵菌遗传转化，其转化效率达到20个转化子/μgDNA。
利用 otef 启动子进行球孢白僵菌遗传转化方法

[发明专利]一种根癌农杆菌介导的多主棒孢遗传转化方法-CN201811534396.2在审
发明人：李俊香;古勤生 -专利权人：中国农业科学院郑州果树研究所
申请日： 2018-12-14 - 公布日： 2019-04-05 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明提供了一种根癌农杆菌介导的多主棒孢遗传转化方法，包括如下步骤：（1）多主棒孢对潮霉素的敏感性测定；（2）抗生素抑制农杆菌正常生长的浓度筛选；（3）多主棒孢分生孢子悬浮液制备；（4）含双元载体根癌农杆菌菌液制备；（5）根癌农杆菌与多主棒孢分生孢子共培养；（6）转化子的筛选；（7）转化子的分子鉴定，插入拷贝数以及遗传稳定性分析。本发明提供了一套稳定高效的根癌农杆菌介导的多主棒孢遗传转化方法，为获得致病突变体提供潜在可能，为深入研究致病相关基因及致病机制奠定基础。
主棒根癌农杆菌介导遗传转化转化子根癌农杆菌制备分生孢子悬浮液致病相关基因敏感性测定遗传稳定性真菌细胞壁分生孢子分子鉴定菌液制备浓度筛选双元载体稳定遗传原生质体致病机制转化效率潮霉素单拷贝拷贝数农杆菌突变体去除抗生素筛选生长分析研究

[发明专利]PEG介导的菜豆壳球孢遗传转化体系的建立方法及其应用-CN202210548808.8在审
发明人：吴会杰;郭婷婷;杨士兵;肖峰;康保珊;洪霓;彭斌;刘莉铭;古勤生 -专利权人：中国农业科学院郑州果树研究所
申请日： 2022-05-20 - 公布日： 2022-08-30 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明属于微生物领域，涉及菜豆壳球孢的遗传转化，特别是指PEG介导的菜豆壳球孢遗传转化体系的建立方法及其应用。将活化好的菜豆壳球孢菌丝，经研磨再振荡培养后，用三层滤纸过滤收集沉淀，沉淀经KCl溶液洗涤后，转移至裂解液中经摇床培养获得原生质体；向原生质体悬浮液中加入目的质粒，再逐滴加入40%SPTC溶液，再加入TB3培养液，制备恢复好的菌丝；将菌丝转入含有筛选抗生素的PDA培养基中，进行平板筛选培养，获得转化子；利用PEG介导将gfp基因转化至菜豆壳球孢中，转化子经转化后的菌株接种甜瓜后表现出与原始菌株一致的致病性，表明成功构建了菜豆壳球孢的遗传转化体系。
peg 菜豆壳球孢遗传转化体系建立方法及其应用

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