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[发明专利]一种重组表达载体的基因序列及其构建方法-CN200810249705.1无效
发明人：胡成进;李传芬 -专利权人：胡成进;李传芬
申请日： 2008-12-24 - 公布日： 2009-07-29 - 主分类号： C12N15/31 文献下载
摘要：本发明提供一种重组表达载体的基因序列及其构建方法，属于生物工程技术领域，是采用高保真酶、上游引物和下游引物利用PCR方法从金黄色葡萄球菌标准菌株基因组中扩增出nEbpS蛋白目的基因克隆到克隆载体中得到重组克隆载体，将重组克隆载体转化感受态宿主细胞后筛选和鉴定得重组质粒，将重组质粒整合到表达载体上得到重组表达载体，再转化到大肠杆菌M15中，在IPTG的诱导下获得EbpS蛋白，利用亲和层析将EbpS蛋白进行纯化后制备乳化抗原
一种重组表达载体基因序列及其构建方法

[发明专利]用于同源重组的方法和组合物-CN03815573.7无效
发明人： P·福加蒂 -专利权人：托斯克公司
申请日： 2003-04-29 - 公布日： 2006-05-17 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：提供了用于将外源核酸同源重组到诸如动物的多细胞生物的靶细胞基因组中的方法。在本发明方法中，让包括线性化内切核酸酶位点，例如，重组酶识别位点，和同源重组整合因子的导向载体与多核细胞生物接触，例如，通过系统性或局部施用，以便所述多细胞生物的靶细胞摄取所述导向载体。所述导向载体是在同源重组事件之前，例如，在与所述多细胞生物接触之前或之后通过诸如重组酶的线性化内切核酸酶在某些点上线性化的载体。在被所述靶细胞摄取之后，所述整合因子通过同源重组从所述线性化导向载体进入所述靶细胞基因组。还提供了用于实施本发明方法的导向载体，系统和试剂盒。
用于同源重组方法组合

[发明专利]一种可提高CRISPR/Cas9系统同源重组效率的方法和应用-CN202110855459.X在审
发明人：孙瑞林;王津津;周宇 -专利权人：上海南方模式生物科技股份有限公司;上海砥石生物科技有限公司;广东南模生物科技有限公司
申请日： 2021-07-28 - 公布日： 2021-11-19 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种可提高CRISPR/Cas9系统同源重组效率的方法和应用，包括：Cas9‑TetR融合蛋白、向导RNA、含有四环素操纵子（tetO）元件的载体，以及一种利用上述系统进行同源重组的方法。本方法不需要对重组载体或者Cas9蛋白进行额外的化学修饰、纯化，只需要像常规载体构建一样，将同源重组载体构建到含有tetO元件的骨架载体中即可；可以提高介导DNA大片段（超过2000碱基对）同源重组的阳性率；并且在基因修饰动物模型制备中可以提高2‑3倍的同源重组阳性率。
一种提高 crispr cas9 系统同源重组效率方法应用

[发明专利]辣椒轻斑驳病毒侵染性克隆的Cre-LoxP重组系统及其应用-CN201810537608.6有效
发明人：彭杰军;郑红英;赵晋平;钱靖;燕飞;鲁宇文;林林;程晔;陈剑平 -专利权人：宁波大学;浙江省农业科学院
申请日： 2018-05-30 - 公布日： 2023-05-12 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明涉及植物基因工程领域，具体涉及一种辣椒轻斑驳病毒侵染性克隆的Cre‑LoxP重组系统及其应用。本发明提供了一种辣椒轻斑驳病毒PMMoV‑GFP侵染性克隆的Cre‑LoxP重组系统，其包括pJM23载体、pJG102载体和pCre载体。进一步通过采用将Cre基因与pJG102载体融合的方式，简化Cre‑LoxP重组系统载体数量，构建了由pJM23载体和pJG2303载体所组成的PMMoV‑GFP侵染性克隆的Cre‑LoxP重组系统。通过本发明所述的Cre‑LoxP重组系统降低了对PMMoV全序列改造的难度，提高了PMMoV外源蛋白表达系统的可操作性。
辣椒斑驳病毒侵染克隆 cre loxp 重组系统及其应用

[发明专利]提高根农杆菌介导的植物转化频率的方法及其专用载体-CN200510115089.7无效
发明人：陈蕾;徐建勇 -专利权人：北京北方杰士生物科技有限责任公司
申请日： 2005-11-28 - 公布日： 2006-06-28 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高根农杆菌介导的植物转化频率的方法及其专用载体。该专用载体是在原核细胞表达载体的多克隆位点插入根农杆菌的virA基因、virG基因和virE基因，得到的可在根农杆菌中过量表达virA、virG和virE的重组表达载体。本发明巧妙地将virA、virG和virE基因插入原核细胞表达载体，构建过量表达virA、virG和virE基因的重组表达载体，再将该重组表达载体转化根农杆菌，得到过量表达virA、virG和virE基因的重组根农杆菌菌株，该重组根农杆菌菌株浸染植物的能力增强，与出发根农杆菌菌株相比，可提高转基因植物的转化效率及转化频率。
提高杆菌植物转化频率方法及其专用载体

[发明专利]一种重组慢病毒载体及其制备方法与应用-CN202011584923.8有效
发明人：蒋明贵;刘军鹏;方娟;刘彩云;屈飞 -专利权人：湖南丰晖生物科技有限公司
申请日： 2020-12-28 - 公布日： 2023-01-20 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组慢病毒载体及其制备方法与应用。所述重组慢病毒载体包括插入有绿色荧光基因EGFP及钙调素依赖性蛋白激酶II基因的慢病毒载体。本发明提供的重组慢病毒载体对细胞的毒性小，且制备方法简单，易于工业化生产。
一种重组病毒载体及其制备方法应用

[发明专利]一种重组病毒载体及其应用-CN201010291367.5无效
发明人：曹寅;张梅;何金生 -专利权人：曹寅;常州市口腔医院
申请日： 2010-09-16 - 公布日： 2011-04-20 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组病毒载体及其应用，该重组病毒载体包括一个病毒载体和至少两条核苷酸序列，所述核苷酸序列分别编码骨保护素和成纤维生长因子，该重组病毒载体能促进牙周组织生长，可用于制备作为治疗牙周病的药物。
一种重组病毒载体及其应用

[发明专利]一种新型火鸡疱疹病毒的细菌人工染色体、构建方法与应用-CN201610742805.2在审
发明人：王继春;王志胜;许梦微;刘芳;乔永峰;刘娅梅;侯继波 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2016-08-26 - 公布日： 2017-01-25 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：所述细菌人工染色体的构建方法扩增HVT基因组中gC基因上、下游同源臂，插入pUC19载体内获得重组载体A；将mini‑F质粒片段插入重组载体A内，得到重组转移载体B，与HVT 的DNA共转染CEF，筛选得到mini‑F重组HVT；提取mini‑F重组HVT的DNA转化DH10B细胞，采用氯霉素筛选，获得阳性重组菌，培养后，提取质粒DNA。本发明细菌人工染色体具有较高的稳定性，构建方法简单、高效，可以应用于重组载体活疫苗的构建。
一种新型火鸡疱疹病毒细菌人工染色体构建方法应用

[发明专利]山羊痘疫苗株表达载体-CN200710180005.7无效
发明人：陈创夫;郭志儒;李有文;魏风 -专利权人：石河子大学
申请日： 2007-10-24 - 公布日： 2009-04-29 - 主分类号： C12N15/863 文献下载
摘要：本发明提供用于在重组山羊痘病毒中表达外源蛋白的表达载体，在表达载体中的VV I1L启动子或VV P11启动子下游，插入外源基因，通过与山羊痘病毒亲本株同源重组获得12个表达外源蛋白的重组羊痘病毒，载体中能与山羊痘病毒亲本株发生同源重组的侧翼序列是羊痘病毒G14-STV-44-55疫苗株，含TK基因或IFNR-γ基因或RR小亚基基因，利用这些表达载体可以用不同的方法，构建表达不同外源蛋白的重组山羊痘病毒，这些重组病毒即可以作为重组活载体疫苗，用于疾病的防治
山羊疫苗表达载体

[发明专利]一种防治虹鳟鱼传染性造血器官坏死症的活载体疫苗及其制备方法和应用-CN201710112929.7在审
发明人：柳纪省;李宝玉;高鹏;李守湖;高欣;吴鹏程;范玉峰 -专利权人：兰州威特森生物科技有限公司
申请日： 2017-02-28 - 公布日： 2017-06-27 - 主分类号： A61K39/205 文献下载
摘要：本发明公开了一种防治虹鳟鱼传染性造血器官坏死症的活载体疫苗的制备方法，将传染性造血器官坏死症病毒抗原蛋白G基因插入到复制缺陷型腺病毒穿梭载体的特异性启动子和终止子之间，构建得到含有G基因的重组复制缺陷型腺病毒穿梭载体，再将重组复制缺陷型腺病毒穿梭载体与腺病毒骨架载体通过同源重组得到重组腺病毒质粒，用重组腺病毒质粒产生基因组结构均一的重组腺病毒，即得到防治虹鳟鱼传染性造血器官坏死症的活载体疫苗。本发明的有益效果为相较于现有技术，本发明制备得到的活载体疫苗更为安全和有效，且制作周期较短，在虹鳟鱼传染性造血器官坏死症的预防或治疗领域将具有良好的应用前景。
一种防治虹鳟鱼传染性造血器官死症载体疫苗及其制备方法应用

[发明专利]一种重组载体及其构建方法和应用-CN202010326647.9有效
发明人：闸雯俊;游艾青;李三和;周雷;徐华山;杨国才;刘凯;李培德;陈志军;方国成;陈俊孝 -专利权人：湖北省农业科学院粮食作物研究所
申请日： 2020-04-23 - 公布日： 2020-12-01 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供了一种重组载体及其构建方法和应用，属于昆虫基因工程技术领域，所述重组载体，包括双荧光素酶报告基因载体和褐飞虱Ccdc124基因的3’UTR区核苷酸序列；所述重组载体的构建方法，包括以下步骤：1)以褐飞虱的cDNA为模板，进行PCR扩增获得褐飞虱Ccdc124基因的3’UTR区核苷酸序列；2)将所述褐飞虱Ccdc124基因的3’UTR区核苷酸序列重组至双荧光素酶报告基因载体中获得重组载体。本发明提供的重组载体可以测定褐飞虱Ccdc124基因的表达活性，用于筛选调控褐飞虱Ccdc124基因的microRNA，还能够对预测的microRNA调控Ccdc124基因的调控机制进行研究。
一种重组载体及其构建方法应用

[发明专利]一种CEA重组腺相关病毒载体及其构建方法与应用-CN200810093221.2无效
发明人：刘勇;保罗·L·赫蒙纳特 -专利权人：广州博沃津生物技术有限公司
申请日： 2008-04-23 - 公布日： 2008-11-19 - 主分类号： C12N15/86 文献下载
摘要：一种CEA重组腺相关病毒载体及其构建方法与其应用。该重组腺相关病毒载体是将腺相关病毒载体中的腺相关病毒结构基因替换为癌胚抗原CEA基因或其突变型基因得到的重组腺相关病毒载体。本发明的CEA重组腺相关病毒载体可将其携带的野生型或突变型的癌胚抗原基因输送入单核细胞－巨噬细胞－树突状细胞系中，携带有这些特异性抗原基因的细胞被用于刺激免疫系统的效应细胞。实验证明，被本发明的rAAV感染的DC所诱导的CTL在患者体内可有效地抑制恶性肿瘤细胞的生长或者杀灭肿瘤细胞，因而，本发明的CEA重组腺相关病毒载体或与本发明重组腺相关病毒载体相关的产品可被用于制备乳腺癌
一种 cea 重组相关病毒载体及其构建方法应用

[发明专利]一种AFP重组腺相关病毒载体及其构建方法与应用-CN200810093225.0无效
发明人：刘勇;保罗·L·赫蒙纳特 -专利权人：广州博沃津生物技术有限公司
申请日： 2008-04-23 - 公布日： 2008-09-03 - 主分类号： C12N15/86 文献下载
摘要：本发明公开了一种AFP重组腺相关病毒载体及其构建方法与其应用。该AFP重组腺相关病毒载体是将腺相关病毒载体中的腺相关病毒结构基因替换为AFP基因或其突变型基因得到的重组腺相关病毒载体。本发明的AFP重组腺相关病毒载体可将其携带的野生型或突变型的AFP基因输送入单核细胞－巨噬细胞－树突状细胞系中，携带有这些特异性抗原基因的细胞被用于刺激免疫系统的效应细胞。实验证明，被本发明的rAAV感染的DC所诱导的CTL在患者体内可有效地抑制恶性肿瘤细胞的生长或者杀灭肿瘤细胞，因而，本发明的AFP重组腺相关病毒载体或与本发明AFP重组腺相关病毒载体相关的产品可被用于制备治疗肝癌药物
一种 afp 重组相关病毒载体及其构建方法应用

[发明专利]表达流感血凝素的重组HVT载体和免疫原性组合物，以及其生产和用途-CN202180050209.7在审
发明人： T·梅巴特松;A·卡萨 -专利权人：勃林格殷格翰动物保健有限公司
申请日： 2021-06-16 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： A61K39/155 文献下载
摘要：重组病毒载体和包含它们用于用作运载体以诱导免疫学应答的组合物。可以在用于针对各种各样的病原体进行保护的包含一种或多种重组病毒载体的组合物或疫苗中使用多价病毒载体。这些病毒载体的形成可以包括外来基因的插入和表达以针对各种各样的病原体进行保护。进一步提供了制备和使用所述重组病毒载体的方法，以及包含所述载体和/或抗原的免疫原性组合物。特别地，免疫原性组合物可以包含重组病毒载体例如vHVT509、vHVT522和/或vHVT523。
表达流感血凝素重组 hvt 载体免疫原性组合及其生产用途

[发明专利]一种家蚕shRNA表达载体构建方法及应用-CN202111313387.2在审
发明人：张冰;王宇腾;李娜;姚伦广;阚云超 -专利权人：南阳师范学院
申请日： 2021-11-08 - 公布日： 2022-02-08 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种家蚕shRNA表达载体构建方法，采用家蚕RNA聚合酶U6启动子，并对该启动子的两端分别引入gtatcttatcatgtctggat和ggtaccaagctttaaattcg重组位点，通过PCR扩增将pIZT/V5‑His载体线性化后重组置换载体上的OpIE2启动子。该家蚕shRNA表达载体构建方法，通过重组法将骨架载体pIZT/V5‑His中的启动子OpIE2重组替换为家蚕中的U6启动子BmU6，不受酶切位点的限制，而且重组效率很高。
一种家蚕 shrna 表达载体构建方法应用

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