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[发明专利] 一种TIM-3纳米抗体、制备方法及其应用 -CN202010157316.7 有效
发明人：
陈创夫 吴鹏
- 专利权人：
石河子大学
申请日：
2020-03-09
-
公布日：
2023-08-01
-
主分类号：
C07K16/28 文献下载
摘要： 本发明属于来自动物或人的抵抗物质技术领域，公开了一种TIM‑3纳米抗体、制备方法及其应用，纳米抗体为TIM‑3纳米抗体序列为SEQ ID NO：1；TIM‑3抗原为哺乳动物细胞瞬时转染表达，使用TIM‑3抗原对纳米抗体库进行多次筛选，获得特异性的纳米抗体噬菌体，测序得到目的片段。本发明使用HEK293细胞株对抗原进行表达，使用哺乳动物表达系统表达人的蛋白最大化的保证蛋白的原始结构，保证了蛋白拥有翻译后修饰以及糖基化等真核蛋白特有的修饰，使获取的蛋白具有较高活性；该方法最大地的保证了蛋白的原始结构与活性；本发明筛选得到的纳米抗体能高效、特异性的结合到靶点上。一种 tim 纳米 抗体 制备 方法 及其 应用
[发明专利] 牛病毒性腹泻病毒纳米抗体及其制备方法及应用 -CN202210903051.X 在审
发明人：
盛金良 ;杨艳 ;陈创夫 肖盛中 ;李岩 ;周子恒 ;李玉豪 ;宋雯妍 ;郑婷
- 专利权人：
石河子大学 ;新疆方牧生物科技有限公司
申请日：
2021-04-13
-
公布日：
2023-04-28
-
主分类号：
C07K16/10 文献下载
摘要： 本发明属于生物技术检测领域，公开了一种抗BVDV‑重要功能蛋白纳米抗体及其制备方法和应用，主要通过构建BVDV‑NS5A表达载体，纯化NS5A蛋白；使用BVDV灭活苗对羊驼进行免疫，分离羊驼外周血淋巴细胞，通过巢式PCR获得VHH基因，构纳米抗体噬菌体展示文库，目的基因插入率为90.8％，文库容量为1.02×107 CFU/mL，经M13K07噬菌体救援建立纳米抗体噬菌体展示文库容量为1.68×1016 CFU/mL；以BVDV‑重要功能蛋白作为目标抗原，对扩繁得到的噬菌体展示文库进行三轮亲和筛选，从该文库筛选出与E0/E2/NS5A/NS3蛋白特异性结合纳米抗体，通过ELISA检测其反应原性，特异性良好的纳米抗体进行测序，分析序列，进而获得该特异性纳米抗体的基因，构建原核表达载体，对其进行原核表达、纯化和鉴定，得到所需纳米抗体Nb‑Y1、Nb‑Y2、Nb‑Y3，并通过Westernblot验证纳米抗体和BVDV重要功能蛋白的反应原性。病毒性 腹泻 病毒 纳米 抗体 及其 制备 方法 应用
[发明专利] 抗BVDV E0的纳米抗体及其制备方法及应用 -CN202210903994.2 在审
发明人：
盛金良 ;杨艳 ;陈创夫 肖盛中 ;李岩 ;周子恒 ;李玉豪 ;宋雯妍 ;郑婷
- 专利权人：
石河子大学 ;新疆方牧生物科技有限公司
申请日：
2021-04-13
-
公布日：
2023-04-07
-
主分类号：
C07K16/10 文献下载
摘要： 本发明属于生物技术检测领域，公开了一种抗BVDV‑重要功能蛋白纳米抗体及其制备方法和应用，主要通过构建BVDV‑NS5A表达载体，纯化NS5A蛋白；使用BVDV灭活苗对羊驼进行免疫，分离羊驼外周血淋巴细胞，通过巢式PCR获得VHH基因，构纳米抗体噬菌体展示文库，目的基因插入率为90.8％，文库容量为1.02×107 CFU/mL，经M13K07噬菌体救援建立纳米抗体噬菌体展示文库容量为1.68×1016 CFU/mL；以BVDV‑重要功能蛋白作为目标抗原，对扩繁得到的噬菌体展示文库进行三轮亲和筛选，从该文库筛选出与E0/E2/NS5A/NS3蛋白特异性结合纳米抗体，通过ELISA检测其反应原性，特异性良好的纳米抗体进行测序，分析序列，进而获得该特异性纳米抗体的基因，构建原核表达载体，对其进行原核表达、纯化和鉴定，得到所需纳米抗体Nb‑Y1、Nb‑Y2、Nb‑Y3，并通过Westernblot验证纳米抗体和BVDV重要功能蛋白的反应原性。bvdv e0 纳米 抗体 及其 制备 方法 应用
[发明专利] PD-1纳米抗体、制备方法及其应用 -CN201910604218.0 有效
发明人：
陈创夫 吴鹏
- 专利权人：
石河子大学
申请日：
2019-07-05
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公布日：
2022-10-25
-
主分类号：
C07K16/28 文献下载
摘要： 本发明属于生物医学技术领域，特别涉及PD‑1纳米抗体、制备方法及其应用。使用纳米抗体可以提高或者协同增强与抗原的结合能力。纳米抗体不具备完整的抗体结构，缺少Fc端以及Y型结构，抗原与纳米抗体结合后不容易被识别，可以轻易逃避免疫系统的捕捉。技术手段主要包括：抗原与载体连接；转入感受态细胞中，提取重组质粒；然后转染至宿主菌中进行表达；利用抗原蛋白对驼类动物进行免疫；采集外周血，抽提淋巴细胞样品的总RNA，反转录为cDNA，扩增得到VHH文库片段，将VHH文库片段插入表达载体，并转化至感受态细胞中，构建抗体免疫库；筛选抗体免疫库中的纳米抗体；验证筛选的纳米抗体与PD‑1抗原结合。pd 纳米 抗体 制备 方法 及其 应用
[发明专利] PD-L1纳米抗体、制备方法及其应用 -CN202010156943.9 有效
发明人：
陈创夫 吴鹏
- 专利权人：
石河子大学
申请日：
2020-03-09
-
公布日：
2022-10-25
-
主分类号：
C07K16/28 文献下载
摘要： 本发明属于抗体技术领域，公开了一种PD‑L1纳米抗体、制备方法及其应用，设计合成引物2条，通过PCR的方法扩增出足够量的目的产物换载酶切，目的片段与载体连接，转化，筛选克隆；蛋白鉴定表达；构建抗体库；选用M13噬菌体展示系统展示VHH抗体文库，该系统由pMECS噬菌粒载体、E.coli TG1和M13KO7辅助噬菌体组成。本发明在噬菌粒载体pMECS中，Pst I酶切位点之前的序列为pelB分泌信号肽和抗体第一个框架区部分氨基酸的编码序列，pelB信号肽能够将后续多肽引导分泌至周质腔；Not I酶切位点之后是HA和6×His标签的编码序列，可用于融合蛋白的纯化或检测。pd l1 纳米 抗体 制备 方法 及其 应用
[发明专利] CTLA-4纳米抗体、制备方法及其应用 -CN202010157317.1 有效
发明人：
陈创夫 吴鹏
- 专利权人：
石河子大学
申请日：
2020-03-09
-
公布日：
2022-10-25
-
主分类号：
C07K16/28 文献下载
摘要： 本发明属于生物医学技术领域，特别涉及CTLA‑4纳米抗体、制备方法及其应用。使用纳米抗体可以提高或者协同增强与抗原的结合能力。纳米抗体不具备完整的抗体结构，缺少Fc端以及Y型结构，抗原与纳米抗体结合后不容易被识别，可以轻易逃避免疫系统的捕捉。技术手段主要包括：抗原与载体连接；转入感受态细胞中，提取重组质粒；然后转染至宿主菌中进行表达；利用抗原蛋白对驼类动物进行免疫；采集外周血，抽提淋巴细胞样品的总RNA，反转录为cDNA，扩增得到VHH文库片段，将VHH文库片段插入表达载体，并转化至感受态细胞中，构建抗体免疫库；筛选抗体免疫库中的纳米抗体；验证筛选的纳米抗体与CTLA‑4抗原结合。ctla 纳米 抗体 制备 方法 及其 应用
[发明专利] BVDV纳米抗体及其制备方法及应用 -CN202110392556.X 有效
发明人：
盛金良 ;杨艳 ;陈创夫 肖盛中 ;李岩 ;周子恒 ;李玉豪 ;宋雯妍 ;郑婷
- 专利权人：
石河子大学 ;新疆方牧生物科技有限公司
申请日：
2021-04-13
-
公布日：
2022-10-14
-
主分类号：
C07K16/10 文献下载
摘要： 本发明属于生物技术检测领域，公开了一种抗BVDV‑重要功能蛋白纳米抗体及其制备方法和应用，主要通过构建BVDV‑NS5A表达载体，纯化NS5A蛋白；使用BVDV灭活苗对羊驼进行免疫，分离羊驼外周血淋巴细胞，通过巢式PCR获得VHH基因，构纳米抗体噬菌体展示文库，目的基因插入率为90.8％，文库容量为1.02×107 CFU/mL，经M13K07噬菌体救援建立纳米抗体噬菌体展示文库容量为1.68×1016 CFU/mL；以BVDV‑重要功能蛋白作为目标抗原，对扩繁得到的噬菌体展示文库进行三轮亲和筛选，从该文库筛选出与E0/E2/NS5A/NS3蛋白特异性结合纳米抗体，通过ELISA检测其反应原性，特异性良好的纳米抗体进行测序，分析序列，进而获得该特异性纳米抗体的基因，构建原核表达载体，对其进行原核表达、纯化和鉴定，得到所需纳米抗体Nb‑Y1、Nb‑Y2、Nb‑Y3，并通过Western blot验证纳米抗体和BVDV重要功能蛋白的反应原性。bvdv 纳米 抗体 及其 制备 方法 应用
