本发明公开了一种可溶性幽门螺杆菌重组抗原CagA的重组载体及诱导表达方法,1)将SEQ ID NO:1所示的CagA目的基因连接在表达载体pET28a(+)中,构成重组载体pET28a‑CagA;2)将重组载体pET28a‑CagA转化至外源蛋白表达的宿主细胞E.coli Top 10中进行诱导表达,得到表达CagA的重组大肠杆菌pET28a(+)/CagA/E.coli Top 10。本发明的重组载体,采用pET28a(+)质粒获得的重组载体表达效果最好,同时pET28a(+)载体序列中除了组氨酸标签序列没有其它的标签或融合蛋白基因序列,获得的CagA蛋白最接近原始蛋白氨基酸序列和蛋白结构,使得外源蛋白的可溶性表达水平高,具备很高的生物学活性,获得了单独高效表达的可溶性重组蛋白CagA,实现目的蛋白的可溶性表达,工艺简单,重复性好,对CagA蛋白后续进行更有效深入的研究提供了基础。
本发明属于基因工程领域,具体涉及一种基于pCDH的荧光素酶的重组载体及其应用,所述重组载体由慢病毒载体pCDH和荧光素酶基因串联构成,所述重组载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述重组载体介导的荧光素酶基因在raji细胞中表达荧光素酶,利用酶催化底物反应原理,应用于模式动物活体成像研究中CD19的追踪,从而评判CAR‑T细胞的靶向杀伤效果。