本发明公开了氨基转移酶和异构酶在催化形成L‑allo‑Ile中的应用。所述的氨基转移酶为氨基转移酶DsaD或氨基转移酶MfnO，所述的异构酶为异构酶DsaE或异构酶MfnH，所述的氨基转移酶DsaD的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示，所述的异构酶DsaE的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示，所述的氨基转移酶MfnO的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述的异构酶MfnH的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。本发明公开了由氨基转移酶和异构酶组成的酶对在催化形成L‑别异亮氨酸或L‑异亮氨酸中的应用。从而在酶学水平上解释L‑allo‑Ile的生物合成机制奠定了重要的基础。L‑allo‑Ile生物合成酶学机制的解释，将为利用绿色的酶学方法制备L‑allo‑Ile，以及对枫糖尿症的诊断和治疗具有重要的实用意义。
本发明公开了氨基转移酶和异构酶在催化形成L‑allo‑Ile中的应用。所述的氨基转移酶为氨基转移酶DsaD或氨基转移酶MfnO，所述的异构酶为异构酶DsaE或异构酶MfnH，所述的氨基转移酶DsaD的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示，所述的异构酶DsaE的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示，所述的氨基转移酶MfnO的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述的异构酶MfnH的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。本发明公开了由氨基转移酶和异构酶组成的酶对在催化形成L‑别异亮氨酸或L‑异亮氨酸中的应用。从而在酶学水平上解释L‑allo‑Ile的生物合成机制奠定了重要的基础。L‑allo‑Ile生物合成酶学机制的解释，将为利用绿色的酶学方法制备L‑allo‑Ile，以及对枫糖尿症的诊断和治疗具有重要的实用意义。
本发明提供一种3′‑O‑甲基转移酶突变体及其应用，将源于水稻的野生型植物氧甲基转移酶第284位色氨酸W突变为丙氨酸A得到，所述野生型植物氧甲基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1，所述3′‑O‑甲基转移酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2；通过半理性设计的酶工程策略确定类黄酮3′‑O‑甲基转移酶催化活性关键氨基酸位点，获得优势突变体，明确了定向改造对类黄酮‑3′‑O‑甲基转移酶催化类黄酮化合物合成甲基化类黄酮化合物的优势作用，获得的3′‑O‑甲基转移酶突变体具有优良催化性能，同时通过优化、强化代谢途径，进一步提高甲基化类黄酮化合物产量。
本发明属于基因工程技术领域，具体是一种硫酸基转移酶的编码基因及其蛋白质。所述基因来源于角叉菜(Chondrus crispus)，命名为GcrSULT基因，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示的序列，其编码蛋白质的氨基酸序列为SEQ ID NO：2所示的序列，该蛋白质为硫酸基转移酶本发明通过基因克隆技术克隆出该基因序列，构建原核表达载体，通过对重组蛋白进行酶活性检测，证实了其具有硫酸基转移酶的功能；且底物特异性与已知的其他硫酸基转移酶均不完全相同。本发明提供的硫酸基转移酶的基因及其编码的蛋白质为硫酸基转移酶家族的研究提供了优异的基因资源和酶资源。
本发明公开了一种白藜芦醇‑3‑糖基转移酶及其在虎杖苷合成中的应用。所述白藜芦醇‑3‑糖基转移酶包括如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3所示的氨基酸序列。本发明还构建了一个用于筛选白藜芦醇糖基转移酶的酵母底盘细胞，并以此为宿主，能直接验证糖基转移酶的功能。本发明提供的白藜芦醇‑3‑糖基转移酶能够用于虎杖苷的合成，为工业化大规模发酵生产或酶转化方法生产虎杖苷奠定基础。
本发明公开了一种7‑O‑糖基转移酶及其编码基因和应用。本发明的7‑O‑糖基转移酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，其编码基因7‑O‑糖基转移酶基因EsGT1，核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示。本发明克隆的7‑O‑糖基转移酶是在淫羊藿苷合成过程中的最后一步的酶，这对于解析淫羊藿苷的合成途径具有重要意义。7‑O‑糖基转移酶能够特异性地催化类黄酮物质(kaempferol)的7‑O‑糖基化反应。
本发明涉及糖基转移酶、突变体及其应用。具体地，提供了一种体外糖基化方法，包括步骤：在糖基转移酶存在下，将糖基供体的糖基转移到四环三萜类化合物的C‑3位羟基上；从而形成糖基化的四环三萜类化合物；其中，所述的糖基转移酶为如SEQ ID NO.4所示的糖基转移酶或其衍生多肽；或如SEQ ID NO.21所示的糖基转移酶或其衍生多肽。
