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[发明专利]一种利用膜层析技术纯化α1-抗胰蛋白酶的方法-CN201610227427.4在审
发明人：宋伟杰;万印华;罗建泉;樊金鑫 -专利权人：中国科学院过程工程研究所
申请日： 2016-04-13 - 公布日： 2016-07-13 - 主分类号： C07K14/81 文献下载
摘要：本发明提供一种利用膜层析技术纯化α1‑抗胰蛋白酶的方法，所述方法包括以下步骤：将Cohn法组份Ⅳ沉淀溶解得到溶解液；向所得溶解液中加入PEG进行沉淀，取上清液；将上清液进行微滤；将所得滤液经过阴离子交换膜层析吸附α1‑抗胰蛋白酶，而后利用洗脱液洗脱，收集含α1‑抗胰蛋白酶的洗脱液；利用疏水层析膜色谱对所得含α1‑抗胰蛋白酶的洗脱液进一步纯化；对所得流穿液进行超滤、除菌、冻干得到α1‑抗胰蛋白酶。本发明的纯化方法经济高效，使得α1‑抗胰蛋白酶的纯度可达95％，总回收率可达83.3％，能保障α1‑抗胰蛋白酶的活性，活性回收率高达91.4％，具有良好的工业化应用前景。
一种利用层析技术纯化胰蛋白酶方法

[发明专利]一种高活性的胰蛋白酶的制备工艺-CN201610198288.7在审
发明人：黄金科 -专利权人：天津科仪嘉欣科技有限公司
申请日： 2016-04-01 - 公布日： 2017-10-24 - 主分类号： C12N9/76 文献下载
摘要：本发明属于生物化学药物制药技术领域，具体涉及一种高活性的胰蛋白酶的制备工艺。通过将胰蛋白酶粗品进行溶解得到胰蛋白酶粗品溶解液；将胰蛋白酶粗品溶解液在60-70℃放置0.5-3小时；用磷酸盐缓冲液进行缓冲溶解，使其达到平衡；平衡后，向胰蛋白酶粗品溶解液中加入海藻酸钠和氯化钙溶液，搅拌均匀；向搅拌均匀的溶液中加入戊二醛进行反应，用水去除多余的戊二醛；将溶液装入透析袋，浸于外透液中，过滤得结晶物，加水溶解，调节pH值；将溶液透析，去除杂质；取出透析液，抽滤，得滤液，调节pH值，冻干后得结晶胰蛋白酶成品能够提高胰蛋白酶的活性，提高工作效率。使得到的胰蛋白酶的活性达到4000U/mg以上。
一种活性胰蛋白酶制备工艺

[发明专利]一种重组蛋白酶K工业化纯化及冻干方法-CN202010960308.6在审
发明人：占全;杨代常 -专利权人：武汉禾元生物科技股份有限公司
申请日： 2020-09-14 - 公布日： 2022-03-15 - 主分类号： C12N9/58 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组蛋白酶K工业化纯化及冻干方法。将毕赤酵母表达的重组蛋白酶K发酵液澄清过滤后加入稀释液稀释，并经过超滤步骤进行浓缩和透析，获得含微量金属离子和色素的蛋白酶K透析液，将该透析液经过阳离子交换层析分离纯化，获得含重组蛋白酶K的洗脱液；将含重组蛋白酶K的洗脱液放在室温结晶沉淀4‑6h，搅拌混匀后倒入正压过滤装置中，压滤获得蛋白酶K滤饼；该滤饼复溶后，加入冻干赋形剂，按照优化的冻干工艺进行冻干，分包装后获得蛋白酶K成品。所获得的蛋白酶K目标物产量高、活性好。
一种重组蛋白酶工业化纯化方法

[发明专利]一种提高小分子核桃肽产率的方法-CN201810203643.4有效
发明人：周浩;卢莎莎;顾燕松;闵瑞 -专利权人：北京凯泰新世纪生物技术有限公司
申请日： 2018-03-13 - 公布日： 2022-01-07 - 主分类号： C12P21/06 文献下载
摘要：本发明保护一种制备核桃肽的方法，包括如下步骤：(1)采用复合酶对核桃粕进行酶解，收集固相；(2)取固相，采用酸性蛋白酶进行酶解，分别收集液相和固相；(3)取固相，采用中性蛋白酶和/或碱性蛋白酶进行酶解，收集液相；(4)将步骤(2)得到的液相和步骤(3)得到的液相混合，进行酶灭活；(5)完成步骤(4)后，收集液相并脱盐，然后进行干燥，得到核桃肽。本发明采取复合酶对核桃粕中的非蛋白物质进行部分降解，采用酸性蛋白酶和中性偏碱性蛋白酶分步对核桃粕固体物质进行酶解，使得其中的蛋白酶解和提取更加充分，进一步提高核桃蛋白收率以及最终产品中的蛋白含量。
一种提高分子核桃肽产率方法

[发明专利]一种用于鱿鱼加工副产物的新型靶向酶解工艺-CN202010832137.9在审
发明人：佘林荣;郑臣泉;郑鹏程;詹美娜 -专利权人：饶平县远腾冷冻食品有限公司
申请日： 2020-08-18 - 公布日： 2020-11-27 - 主分类号： C12P21/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于鱿鱼加工副产物的新型靶向酶解工艺，包括有以下工艺步骤：S1、对鱿鱼加工副产物进行打浆，添加蒸馏水；S2、对浆液进行加热；S3、向浆液添加蛋白酶，所述蛋白酶包括有酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶；S4、对浆液进行灭酶；S5、对浆液进行进行离心提纯，获取上清液；S6、采用中空纤维柱膜对上清液进行超滤，以获取多肽液。本发明采用靶向酶解技术对鱿鱼加工副产物的加工，以获得便于婴幼儿吸收的活性肽，实现对鱿鱼加工副产物的重新开发和利用。
一种用于鱿鱼加工副产物新型靶向工艺

[发明专利]通过酶解大豆蛋白制备大豆肽的方法-CN201310697710.X有效
发明人：刘新旗;张连慧;王一;刘泽龙;贺寅;应欣;郑岩;涂丛慧;杨佳;王宇 -专利权人：中粮营养健康研究院有限公司;中粮集团有限公司
申请日： 2013-12-18 - 公布日： 2018-04-03 - 主分类号： A23J3/34 文献下载
摘要：本发明涉及通过酶解大豆蛋白来制备大豆肽的方法。该方法所得大豆肽苦涩味低，大豆肽得率高，其中的游离氨基酸及分子量小于150Da或分子量大于2000Da的肽段含量均较低。所述方法包括如下步骤将大豆分离蛋白加水配制成4wt%‑12wt%的大豆分离蛋白液，调节温度和pH，然后将适量的作为内肽酶使用的碱性蛋白酶和中性蛋白酶以及作为外肽酶使用的风味蛋白酶按照先加入碱性蛋白酶和中性蛋白酶、后加入风味蛋白酶的顺序加入，进行酶解反应，调节酶解液的pH，灭酶，离心取上清液，进行杀菌后，喷雾干燥得到大豆肽。
通过大豆蛋白制备大豆方法

[发明专利]一种蛋白印记膜再生液的制备方法-CN202111168748.9在审
发明人：薛帮凯;樊菲;杨召军;田艳维;王硕;王立东 -专利权人：天津津科生物科技有限责任公司
申请日： 2021-09-30 - 公布日： 2021-12-03 - 主分类号： G01N33/53 文献下载
摘要：本发明涉及分子印迹技术领域，具体涉及一种蛋白印记膜再生液的制备方法，采用盐酸胍处理蛋白酶K溶液，得到处理后蛋白酶K溶液；将低活性蛋白酶K与复合盐溶液混合配置，调节pH值，得到蛋白印迹膜再生液，蛋白酶K能够将蛋白酶解成小片段多肽，从而使模板蛋白更容易从孔穴中洗脱出来，达到比较好的洗脱效果，通过盐酸胍处理蛋白酶K溶液能够使蛋白酶K进行一定程度上的去折叠，蛋白酶K的活力与构象具有较强的相关性，通过诱导蛋白酶K进行去折叠处理，能够降低蛋白酶K的活性，从而保障洗脱后留下较多的有效识别位点，从而能够直接进行其他蛋白的检测，本发明具有比较好的效果和洗脱效率。
一种蛋白印记再生制备方法

[发明专利]鳄鱼肉口服液及其制备方法-CN201310287710.2有效
发明人：魏小勇;王美玲 -专利权人：广州中医药大学
申请日： 2013-07-09 - 公布日： 2013-11-20 - 主分类号： A23L2/38 文献下载
摘要：本发明公开了一种鳄鱼肉口服液及其制备方法，属于肉类保健饮料技术领域。该制备方法包括以下步骤：1）新鲜鳄鱼肉捣碎加水，按总量为每克鳄鱼肉加入2000～8000活力单位木瓜蛋白酶、复合蛋白酶和风味蛋白酶；所述木瓜蛋白酶，复合蛋白酶，风味蛋白酶的加入活力单位之比为1～2：1～5：1～5；2）在45～65℃下酶解1～4h，然后将酶灭活，除去固体残渣得到酶解液，即得鳄鱼肉口服液。通过该方法制备得到的鳄鱼肉口服液中游离氨基酸含量高，易吸收，且口感佳，无明显苦腥味。
鳄鱼口服液及其制备方法

[发明专利]一种制备低苦味乳清蛋白抗氧化肽粉的方法-CN201810373739.5在审
发明人：李珊珊;步婷婷;吴建平 -专利权人：浙江大学
申请日： 2018-04-24 - 公布日： 2018-08-17 - 主分类号： C12P21/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种制备低苦味乳清蛋白抗氧化肽粉的方法，该方法包括：配制乳清蛋白水溶液，高温变性后，加入中性蛋白酶进行一次酶解，再加入ProteAX蛋白酶进行二次酶解，酶解结束后，高温灭酶，得到乳清蛋白酶解液；将乳清蛋白酶解液依次经离心和超滤处理后，冷冻干燥，得到乳清蛋白抗氧化肽粉。本发明采用中性蛋白酶和ProteAX蛋白酶对乳清蛋白进行两级酶解，得到氮回收率高、分子量小、抗氧化活性强且苦味低的乳清蛋白抗氧化肽粉。
乳清蛋白抗氧化肽苦味蛋白酶蛋白酶解液中性蛋白酶酶解乳清制备抗氧化活性超滤处理二次酶解高温变性高温灭酶乳清蛋白一次酶解配制乳清蛋白两级回收率

[发明专利]基因重组人中性粒细胞弹性蛋白酶及其制备方法和该弹性蛋白酶的医药用途-CN201110163759.8有效
发明人：阎智慧;张楷 -专利权人：天津金斯坦生物科技有限公司
申请日： 2011-06-17 - 公布日： 2011-11-23 - 主分类号： C12N9/66 文献下载
摘要：本发明公开了一种基因重组人中性粒细胞弹性蛋白酶及其制备方法和该弹性蛋白酶的医药用途，属于基因工程领域。本发明利用人中性粒细胞裂解液，取含有基因组DNA的上清液，扩增获得中性粒细胞弹性蛋白酶的基因片段ELA2，连接克隆质粒转化大肠杆菌，构建弹性蛋白酶的PET-28a-ELA2表达质粒，在大肠杆菌中表达弹性蛋白酶，收集菌体，超声裂解菌液，镍柱洗脱后获得纯化的弹性蛋白酶。这样设计的本发明，利用弹性蛋白酶的表达基因，获得足量稳定的基因重组人中性粒细胞弹性蛋白酶，为临床检测和试验研究提供弹性蛋白酶原料，并为制备弹性蛋白酶高效抗体提供特异性抗原。
基因重组人中粒细胞弹性蛋白酶及其制备方法医药用途

[发明专利]一种核酸提取试剂盒以及提取核酸的方法-CN202011480855.0在审
发明人：翟留伟;其他发明人请求不公开姓名 -专利权人：深圳市帝迈生物技术有限公司
申请日： 2020-12-15 - 公布日： 2022-06-17 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本申请涉及生物技术领域，具体公开了一种核酸提取试剂盒以及提取核酸的方法，该核酸提取试剂盒包括：裂解缓冲液、蛋白酶K冻干粉、漂洗缓冲液、洗脱液以及磁珠吸附液；蛋白酶K冻干粉包括：MOPSO、蛋白酶K、防腐剂通过上述方式，核酸提取试剂盒中蛋白酶K的剂型为冻干粉，可在室温下长期稳定储存，从而克服了已有蛋白酶K溶液存在的缺点。
一种核酸提取试剂盒以及方法

[发明专利]产蛋白酶的菌株、制备蛋白酶液的方法及使用该酶液于改善低次等烟叶品质-CN201110435521.6有效
发明人：王毅;魏云林;马永凯;唐兴宏;季秀玲;于会喜;吴潇 -专利权人：红塔烟草（集团）有限责任公司
申请日： 2011-12-22 - 公布日： 2012-12-12 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用细菌发酵蛋白酶液改善低次等烟叶品质的方法。按以下步骤进行：1)细菌发酵蛋白酶液的制备：①产蛋白酶的芽孢杆菌菌种经LB培养基活化后接入灭菌的种子培养基，于37℃、150rpm恒温摇床培养12h，按1∶100的比例转接于1L摇瓶中发酵60h制得发酵蛋白酶液；②发酵蛋白酶液的加工：发酵好的蛋白酶液经0.22μm中空纤维管过滤除菌，10000MWCO超滤浓缩制得粗酶液；2)改善低次等烟叶品质：粗酶液按一定2％的比例均匀地喷施于烟丝，置于自封袋中室温下作用12h，90℃、30min使酶失活，置于22℃，相对湿度55％的恒温恒湿箱平衡烟丝水分24h。感官评吸结果显示，此菌株发酵的蛋白酶液可以改善烟叶香气质，杂气减轻，质感、口感较好，烟叶品质明显改善。
蛋白酶菌株制备方法使用改善次等烟叶品质

[发明专利]一种利用酶技术水解鸡架制取浓缩液的工艺-CN201010605099.X无效
发明人：刘敏尧;刘靓;霍雨霞;项飞;刘玉霞 -专利权人：天津市诺奥科技发展有限公司
申请日： 2010-12-24 - 公布日： 2011-08-17 - 主分类号： A23L1/312 文献下载
摘要：一种利用酶制剂水解鸡架制取浓缩液的工艺，以鸡架为原料，利用酶技术进行水解，所用的蛋白酶为中性蛋白酶，碱性蛋白酶，木瓜蛋白酶，风味蛋白酶和胰蛋白酶的两种或两种以上的组合，经过胶体磨粉碎、调节底物浓度、高温加热、降温，40-60℃下酶解2-6h、升温灭酶，超滤浓缩得到浓缩水解液。用本方法得到的水解液，鸡架水解程度达65％-80％，具有鸡架原有的鲜香味和营养成分，可用于食品加工和香精行业，大大提高了鸡架的综合利用率。
一种利用技术水解制取浓缩工艺

[发明专利]一种胃、胰蛋白酶处理的桂附地黄口服液的制备方法-CN201310625516.0在审
发明人：白杨 -专利权人：白杨
申请日： 2013-11-30 - 公布日： 2015-06-03 - 主分类号： A61K36/8945 文献下载
摘要：本发明涉及一种胃、胰蛋白酶处理的桂附地黄口服液的制备方法，步骤如下：（1）将桂附地黄丸原料经粉碎后，制得原料粉末，然后加入水，混合均匀，制得原料浆液；（2）向原料浆液中加入酸调pH值，加入胃蛋白酶，处理，碱调pH值，制得胃蛋白酶处理的浆液；（3）向胃蛋白酶处理的浆液中加入胰蛋白酶，处理，酸调pH值，制得胃、胰蛋白酶处理的桂附地黄口服液。本发明通过将传统桂附地黄丸原料经胃、胰蛋白酶分解处理，得到了副作用较小的胃、胰蛋白酶处理的桂附地黄口服液，该品酸甜适口，且经实际应用，长期服用该胃、胰蛋白酶处理的桂附地黄口服液不仅能够达到服用桂附地黄丸治疗效果
一种胰蛋白酶处理地黄口服液制备方法

[发明专利]一种胃、胰蛋白酶处理的百合固金口服液的制备方法-CN201310633506.1在审
发明人：白杨 -专利权人：白杨
申请日： 2013-11-30 - 公布日： 2015-06-03 - 主分类号： A61K36/8968 文献下载
摘要：本发明涉及一种胃、胰蛋白酶处理的百合固金口服液的制备方法，步骤如下：（1）将百合固金丸原料经粉碎后，制得原料粉末，然后加入水，混合均匀，制得原料浆液；（2）向原料浆液中加入酸调pH值，加入胃蛋白酶，处理，碱调pH值，制得胃蛋白酶处理的浆液；（3）向胃蛋白酶处理的浆液中加入胰蛋白酶，处理，酸调pH值，制得胃、胰蛋白酶处理的百合固金口服液。本发明通过将传统百合固金丸原料经胃、胰蛋白酶分解处理，得到了副作用较小的胃、胰蛋白酶处理的百合固金口服液，该品酸甜适口，且经实际应用，长期服用该胃、胰蛋白酶处理的百合固金口服液不仅能够达到服用百合固金丸治疗效果
一种胰蛋白酶处理百合口服液制备方法