本发明公开了一种醇脱氢酶突变体及其应用。该脱氢酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO：9所示氨基酸序列发生突变的氨基酸序列，发生突变的氨基酸序列具有如下至少1个突变位点：第40位、第87位、第194位和第331位，且第40位的T突变为S、A或C；第87位的W突变为F、Y或H；第194位的V突变为I、L或E；第331位的R突变为A、K或M；或者，醇脱氢酶突变体的氨基酸序列具有发生突变的氨基酸序列中的突变位点，且与发生突变的氨基酸序列具有90具有上述至少一个突变位点或者保留上述突变位点且与其具有90％以上氨基酸序列同源性的醇脱氢酶突变体，其立体选择性和酶活性大大提高。
本发明提供了一种结肠癌相关分子标志物基因突变的crRNA、检测试剂盒与检测方法，所述crRNA包括：KRAS‑exon2突变位点的crRNA：其序列如SEQ ID NO.14‑16任一所示；KRAS‑exon3突变位点的crRNA：其序列如SEQ ID NO.17‑18任一所示；NRAS‑exon2基因突变位点的crRNA：其序列如SEQ ID NO.19‑20任一所示；BRAF基因突变位点的crRNA：其序列如本发明设计与结肠癌相关分子标志物突变靶点的4个crRNA，结合CRISPR‑cpf1系统进行突变检测，此方法具有速度快、灵敏度高、特异性强的特点。
